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目的研究大鼠血栓调节蛋白基因的扩增、克隆及在原核细胞中的表达。方法以大鼠基因组DNA为模板,进行PCR扩增,用pMD18-Tsimple vector进行T克隆并测序。经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切,将目的基因克隆到pET-28a(+)表达载体质粒中,转化E.coliBL21(DE3)表达重组蛋白,通过SDS-PAGE分析表达产物。结果含有大鼠血栓调节蛋白基因的PCR产物约为1850bp。重组pMD18-Tsimple vector质粒和重组pET-28a(+)质粒经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切后,有相应大小的目的片段,测序结果正确。经IPTG诱导,重组pET-28a(+)质粒在E.coliBL21(DE3)中有相对分子质量约为72000的融合蛋白表达。结论成功克隆了大鼠血栓调节蛋白基因,并成功表达了该基因编码的蛋白。 相似文献
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目的探讨朱砂对大鼠脑组织中兴奋性氨基酸类神经递质水平的影响及机制。方法将32只Wistar大鼠随机分为实验组24只和对照组8只,实验组分别给予朱砂12、、4 g/kg灌胃(各8只),对照组予0.3%羧甲基纤维素钠灌胃,1次/d,灌胃14 d。采用氢化物发生原子吸收法测定两组脑组织汞(Hg)的含量,高效液相色谱法测定谷氨酸(Glu)和天门冬氨酸(Asp)水平。结果随朱砂剂量增加,大鼠脑组织Hg含量增加,Glu、Asp水平下降。结论朱砂对大鼠兴奋性氨基酸类神经递质有抑制作用,其可能机制为干扰Glu和Asp神经递质的正常代谢。 相似文献
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HPLC测定强精胶囊中淫羊藿苷含量 总被引:2,自引:0,他引:2
强精胶囊为淫羊藿、黄芪、菟丝子、山药、甘草等十余味中药组成的复方制剂,其中以淫羊藿为君药。淫羊藿中的淫羊藿苷为其有效成分。有研究表明淫羊藿苷具有促进精液分泌,增强性腺功能等药理作用。为有效地进行产品质量控制,对方中淫羊藿苷含量进行定量研究。方法快速、简便,结果准确,可以作为本品的一个质控指标。1仪器与试药强精胶囊由辽宁省计划生育科研院生产。淫羊藿苷(icariine)由中国药品生物制品检定所提供(批号:07379910)。水为重蒸馏水,乙腈为色谱纯,其它试剂均为分析纯。LC-10A型高效液相色谱仪(日本岛津)。UV-3000紫外分光光度… 相似文献
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目的:筛选纯化黄芩总黄酮的最佳树脂,确定树脂纯化黄芩总黄酮的工艺参数。方法:以黄芩中总黄酮含量为指标,对3种不同型号大孔吸附树脂进行筛选,确定了吸附分离黄芩总黄酮的最佳树脂,并通过单因素考察确定了该树脂分离、纯化黄芩总黄酮的工艺奈件。结果:AB-8型树脂对黄芩总黄酮有良好的吸附分离性能,其吸附分离黄芩总黄酮的工艺条件为:上样浓度0,04g生药/mL,最大上样量为树脂的8倍体积,洗脱剂为80%乙醇,洗脱剂用量为7倍量树脂柱体积。结论:AB-8型树脂在所确定的工艺奈件下,纯化黄芩总黄酮效果良好,黄芩总黄酮含量可达90%以上。 相似文献
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采用高效液相色谱法对心脉宁胶囊中丹酚酸B进行含量测定方法的研究。丹酚酸B在0.194~0.970μg范围内线性关系良好,回归方程为Y=818657.7X-1549.8。样品的平均回收率为99.9%。相对标准偏差(RSD)为1.67%。 相似文献