广东省2009－2013 年霍乱弧菌病原学特征分析

目的 分析广东省2009－2013 年霍乱病例及环境来源O1/O139 群霍乱弧菌病原学特征。方法 选取2009－2013 年广东省霍乱病例来源、环境（水体和海水产品）来源的O1/O139群霍乱弧菌。采用血清分型、抗菌药物敏感性试验、毒力基因PCR 检测和脉冲场凝胶电泳（PFGE）分子分型方法 , 研究不同来源的霍乱弧菌血清型、抗菌药物敏感性、毒力基因携带以及分子分型方面的异同。结果 2009－2013 年广东省共分离得到各类来源O1/O139 群霍乱弧菌190株（病例16 株, 外环境174 株）。病例来源菌株分为O1 群稻叶型（3 株）、小川型（7 株）和O139 群（6株）3 种菌型;其中10 株ctxA 基因阳性, 2 株小川型菌株携带不完整CTXΦ噬菌体;5 株菌对11 种抗菌药物完全敏感, 3 株对4 种抗菌药物表现出耐受。外环境来源菌株中53 株稻叶型, 22 株小川型和2 株O139 群菌株携带不完整CTXΦ噬菌体;2 株O139 菌株检出ctxA 基因阳性;25 株对≥4 种抗菌药物耐受, 其中有2 株同时对11 种抗菌药物中的7 种耐受, 以水产品中的稻叶型菌株为主（13株）。PFGE分子分型结果显示, 菌株经NotⅠ酶切后的PFGE型别表现出明显的多样性。稻叶型和O139 群病例菌株的带型聚集在同一个聚类中, 小川型病例菌株带型分散在不同的聚类中, 病例来源菌株与环境来源菌株的带型差别较大。结论 广东省O1/O139 群霍乱弧菌毒力基因和遗传特征复杂多样, 菌株多重耐药形势严峻, 需要加强菌株型别变异及耐药监测。     

实时聚合酶链反应检测O1群和O139群霍乱弧菌方法的建立及应用

目的建立检测O1群和O139群霍乱弧菌的实时荧光聚合酶链反应（RT—PCR）方法并进行水体标本的检测评价。方法根据O1群和O139群霍乱弧菌O抗原编码基因rfb序列设计引物，利用SYBRGreen染料，建立同时检测霍乱弧菌O1群和O139群的RT—PCR方法，对所建立的方法分别进行实验室内的灵敏度、特异性及重复性评价。采集河口水标本增菌后进行RT—PCR检测，与分离培养方法比较评价实际应用价值。结果建立了检测O1群和O139群霍乱弧菌的双重RT—PCR方法，根据扩增产物的溶解温度能有效区分O1群和O139群霍乱弧菌两种目标片段的扩增；对其他10种弧菌染色体DNA没有扩增；RT—PCR检测524份河口水体标本的增菌液，与常规分离方法相比显示了明显的灵敏性，并且所有常规分离方法阳性标本其荧光PCR检测亦为阳性。结论以O1群和O139群rfb基因为目标检测片段建立的霍乱弧菌RT—PCR方法可用于环境水体样本中霍乱弧菌常规分离前的快速筛查。     

广东省伤寒沙门菌株的脉冲场凝胶电泳分型研究

目的 运用脉冲场凝肢（PFGE）电泳研究广东省伤寒沙门菌的分子流行病学。方法用PFGE对菌株进行分子分型，所得结果用BionumefiscV4．0软件进行聚类分析。结果 来自广东省6个地区的51株伤寒沙门菌，根据电泳图谱分析，可分为45个PFGE型别，菌株间的相似值在38．27％-100．00％，6个地区间没有同源的菌株，同一个地区不同年份也没有同源的菌株，而同一地区同一年份可出现同源的菌株。结论 PFGE是一种敏感的研究伤寒沙门菌分子流行病学的基因分型方法。     

广东省人感染猪链球菌2型10株病原学特征

目的分析广东省2005-2006年分离的10株2型猪链球菌菌株的病原学特征，为诊断、治疗和制定今后防控措施提供科学依据。方法对10株菌进行常规方法鉴定及PCR技术检测。结果经血清学分型和生化鉴定，10菌株均为猪链球菌2型，其中9株菌三种基因（菌种基因（16SrRNA）、荚膜多糖编码基因（CPS2J）和溶菌酶释放相关蛋白基因（mrp））均阳性，1株菌mrp基因检测阴性。结论广东省人感染猪链球菌病由2型猪链球菌引起。     

广东省2007年度非伤寒沙门菌监测及病原学特征分析

目的 了解广东省腹泻病患者中非伤寒沙门菌感染情况和菌株的血清型别、分布、耐药性变化.方法 对纳入研究的腹泻病患者进行非伤寒沙门菌检测,对分离到的菌株进行血清分型、药物敏感性试验和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型.结果 2007年度共检测1128份腹泻粪便标本,分离到71株沙门菌,阳性检出率为6.29%;共分得29种血清型,肠炎和鼠伤寒沙门菌居多;大多数沙门菌对常用的头孢类和喹诺酮类抗生素敏感,鼠伤寒沙门菌的耐药率普遍较肠炎和斯坦利沙门菌高;除肠炎沙门菌外,其余的血清型没有同一PFGE型别的菌株;用Xba Ⅰ酶切17株肠炎沙门菌可分为PFGE-XbaⅠ 1～8型,其中PFGE-XbaⅠ 4型为优势型别.用Sfi Ⅰ和Not Ⅰ酶对12株肠炎沙门菌进行再分型,综合用Xba Ⅰ/Sfi Ⅰ/Not Ⅰ三种酶的结果 发现仍有三组菌的PFGE图谱是完全一致的.结论 2007年度广东省非伤寒沙门菌的感染多数为散发病例,头孢类和喹诺酮类抗生素是治疗非伤寒沙门菌感染的首选药物.     

广东省水产品致病性弧菌污染调查

在我国生吃水产品已有悠久的历史 ,特别是在广东的珠江三角洲地区尤为普遍。水产品生吃具有肉鲜味美、营养丰富等特点 ,深受消费者喜爱。但水产品在其生长的水域或在加工过程中可能会受到污染。近年来有关致病性弧菌引起腹泻的报道日渐增多 ,成为引起腹泻病的重要的病原微生物。为了解广东省珠江三角洲地区日常供应的生吃水产品及其养殖水致病性弧菌的污染情况 ,于 1 999～ 2 0 0 0年分别采集珠江三角洲地区 1 7家酒店、餐厅日常供应的生吃水产品及相关主要环节的样品进行致病性弧菌检测 ,现将结果报道如下。1　材料和方法1 1　样品采集从…     

广东省布鲁氏菌菌株脂肪酸成分分析

目的探讨脂肪酸成分分析方法对广东布鲁氏菌菌株进行分型的可能性,获得广东布鲁氏菌脂肪酸成分的本底资料。方法选择历年从广东不同地区分离到的29株布鲁氏菌进行了菌体脂肪酸成分分析,利用MIDI公司Sherlock系统的软件进行聚类分析。结果广东布鲁氏菌的主要脂肪酸成分为19：0cycloω8c酸、16：0酸、18：0酸,其中牛种菌的19：0cycloω8c酸含量最高,羊种次之,猪种最低,其中羊种和猪种布鲁氏菌19：0cycloω08c酸、18：0酸含量差异有统计学意义,1965年和近3年的羊种布鲁氏菌株19：0cycloω8c酸、18：0酸含量差异有统计学意义。结论菌株的脂肪酸成分稳定,但各种间脂肪酸含量存在差异,一定的欧氏距离时,可以在种的水平上区分布鲁氏菌的3个种。     

广东省流行性脑脊髓膜炎流行菌群变化趋势分析

目的研究流行性脑脊髓膜炎（流脑）流行菌群的变迁趋势。方法对广东省1966—2009年分离的656株流脑菌株的血清群构成进行分析。结果656株流脑菌株中,A群占24％、B群占47％、C群占9％,其它群占20％。1966—2001年的447株流脑菌株中,A群占22％、B群占46％、C群占6％,其它群占26％;2002—2009年的209株流脑菌株中,A群占28％、B群占53％、c群占13％,其它群占6％。A群流脑病人来源菌株比例由85％下降至47％,B群流脑病人来源菌株比例由15％上升至28％,c群流脑病人来源菌株比例由0％上升至22％。健康人群鼻咽部携带C群流脑菌株的比例由7％上升至11％,A群由9％上升至24％,B群由53％上升至58％。结论广东省流脑病人及健康人群携带菌株中,C群、B群流脑菌株的比例呈上升趋势,流脑流行菌群正在发生从A群到C群、B群的变化。     

广东省发现三株新型沙门氏菌的分析

1998 - 1 999年间我们对饮食从业人员健康体检 ,自 2 3438份粪便标本中检出了诺威奇 (编号 :98- 2 892 )、胥莱士亥姆 (编号 :99- 32 1 8)、南班克 (编号 :99- 4533)三株沙门氏菌。现将分离鉴定结果报告如下。1 分离方法 :用棉拭子采集粪便置于肠道增菌肉汤中 37℃增菌过夜 ,转种ＳＳ平板 37℃分离培养 ,2 4小时后将可疑菌落接种于克氏双糖铁培养基上。2 菌落形态与镜检 :上述菌株在ＳＳ平板上均呈园形、光滑、湿润、半透明、中心带黑色的菌落。镜检为革兰氏阴性短杆状。3 生化反应结果 :见附表。 肠杆菌科噬菌体裂解试验 :使用珠海东大生…     

广东省2009年副溶血弧菌暴发与散发菌株的病原学特征分析

目的 了解2009年广东省副溶血弧菌食物中毒分离株和腹泻患者监测分离株的血清分型、毒力基因携带情况及分子特征.方法 对95株副溶血弧菌食物中毒分离株和15株腹泻患者分离株进行血清分型,耐热直接溶血素相关基因(trh)和耐热直接溶血素基因(tdh)PCR检测以及选取不同血清型副溶血弧菌81株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型.结果 从监测腹泻患者分离的15株副溶血弧菌,血清型以O3:K6(46.67％)和O4:K8(33.33％)为主;从11起副溶血弧菌食物中毒分离的95株菌,血清型以O3:K6(44.21％)和O4:K8(28.42％)居多;7株食品分离株都不是O3:K6血清型;93株(84.54％)为tdh+ trh-菌株,13株(11.81％)为tdh-trh菌株,3株(3.65％)为tdh+ trh+菌株.81株副溶血弧菌的PFGE相似值为57.7％～100.0％,被分为36种不同的PFGE型别,PFGE001型和029型为2009年广东省副溶血弧菌优势PFGE型别.结论 2009年广东省引起感染性腹泻和食物中毒的副溶血弧菌以O3:K6和O4:K8型为主要血清型,多数菌株携带tdh基因,存在优势PFGE型别菌株不断引起各地区的散发和暴发.