增龄大鼠阴茎组织中一氧化碳含量与细胞凋亡的相关性研究

目的:通过研究不同月龄大鼠阴茎组织内细胞凋亡及CO含量变化,进一步探讨勃起功能障碍发生机制。方法:雄性Wistar大鼠24只分为3组(每组8只),成年组(8月龄)、老年组(16月龄)和衰老组(24月龄)。取阴茎组织用苏木精-伊红(HE)染色,原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,改良双波长法检测CO含量。结果:增龄大鼠阴茎组织中细胞凋亡显著增多(成年组:4.38±1.06,老年组:9.38±1.69,衰老组:18.50±1.60),CO含量减少[成年组:(12.19±0.87)nmol/μg,老年组:(7.93±0.63)nmol/μg,衰老组:(5.68±0.62)nmol/μg],组间差异均有显著性(P<0.05)。CO含量与细胞凋亡的变化呈现良好的负相关性(r=-0.889,P<0.01)。结论:增龄大鼠阴茎组织中细胞凋亡与CO含量呈负相关,CO可能通过调控细胞凋亡机制从而参与了雄性性功能障碍的发生。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠皮质和海马区谷氨酸、γ-氨基丁酸含量的调节

目的：观察使用灵芝孢子粉后，癫痫点燃大鼠模型皮质和海马区谷氨酸和1一氨基丁酸的含量及神经元形态学改变。 方法：实验于2005-08在佳木斯大学基础医学院完成。选择健康雄性wistar大鼠30只（鼠龄12周），随机分为3组，空白对照组、癫痫模型组、灵芝孢子粉组，每组10只。采用戊四氮腹腔注射制作大鼠慢性点燃模型，癫痫模型组采用戊四氮腹腔注射＋生理盐水灌胃；灵芝孢子粉组采用戊四氮腹腔注射＋灵芝孢子粉灌胃；空白对照组采用生理盐水腹腔注射＋生理盐水灌胃。腹腔注射剂量为35mg／kg，灌胃剂量为150mg／kg，1次／d，持续28d。每次注射后观察大鼠60min，记录癫痫发作情况。惊厥发作评分标准：0级，没有行为上的发作；Ⅰ级，节律性点头或头部颤搐；Ⅱ级，阵挛性咀嚼；Ⅲ级，头部颤搐加前肢阵挛性抽搐；Ⅳ级，袋鼠姿势（上身直立）；Ⅴ级，跌倒；Ⅵ级，强直性惊厥。凡显示连续5次Ⅱ级以上惊厥的大鼠为达到点燃标准。点燃后断头取脑，行免疫组化染色观察各指标含量变化及神经元形态学改变。显微镜观察显示棕黄色颗粒者为阳性。结果：实验过程中，无动物死亡，全部进入结果分析。①灵芝孢子粉组和癫痫模型组所有大鼠均有连续多次的Ⅲ～Ⅴ级癫痫发作，均达到癫痫模型点燃标准。②免疫组织化学染色后，空白对照组大脑皮质谷氨酸免疫反应阳性细胞密集分布于各层，海马谷氨酸免疫反应阳性细胞主要分布在海马回的锥体细胞层和齿状回的颗粒层。谷氨酸阳性神经元胞体呈圆形、椭圆形或不规则形，谷氨酸阳性反应产物为棕黄色，呈细颗粒状。癫痫模型组大脑皮质及海马谷氨酸免疫反应阳性细胞数比空白对照组明显增多，差异具有显著性[（206&#177;41），（96&#177;12）个／张，P〈0．05]；[（164&#177;41），（69&#177;14）个／张，P〈0．05]。灵芝孢子粉组大脑皮质及海马谷氨酸免疫反应阳性细胞比癫痫模型组数减少，差异具有显著性[（108&#177;23），（206&#177;41）个／张，P〈0．05]；[（100&#177;12），（164&#177;41）个／张，P〈0．05]。③免疫组织化学染色后空白对照组大脑皮质γ-氨基丁酸有较多分布，浅层尤为明显。大鼠海马回和齿状回均可见γ-氨基丁酸阳性细胞散在分布γ-氨基丁酸阳性神经元胞体呈圆形，胞浆均匀深染。癫痫模型组大脑皮质及海马γ-氨基丁酸免疫反应阳性细胞数比空白对照组明显减少，差异具有显著性[（69&#177;16），（149&#177;21）个／张，P〈0．05]；[（47&#177;9），（108&#177;10）个／张，P〈0．05]；灵芝孢子粉组大脑皮质及海马γ-氨基丁酸免疫反应阳性细胞比癫痫模型组数增多，差异具有显著性[（113&#177;17）（69&#177;16）个／张，P〈0．05]；[（80&#177;11）（47&#177;9），个／张，P〈0．05]。 结论：灵芝孢子粉能够有效降低皮质和海马区兴奋性氨基酸谷氨酸的含量，降低病变神经元兴奋性以达到抗癫痫作用。同时还能增强抑制性氨基酸氨基丁酸的表达，使神经元兴奋性减弱，抑制癫痫的发作，从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤，所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用。     

2型糖尿病大鼠血浆同型半胱氨酸与阴茎海绵体内NOS和内源性CO的相关性研究

目的:研究2型糖尿病性大鼠血浆同型半胱氨酸(Hcy)与阴茎海绵体内NOS和内源性CO的相关性。方法:选取3月龄雄性Wistar大鼠50只,随机选取10只为对照组(A组);高糖高脂饲料饲养4周后从其他40只大鼠中筛选出30只构建成功的糖尿病(DM)大鼠模型,随机分成3组:DM大鼠组(B组);胰岛素治疗组(C组)和叶酸+维生素B12治疗组(D组)。8周及12周后注射阿朴吗啡观察各组大鼠阴茎勃起情况。12周后测各组大鼠血浆总Hcy含量及阴茎海绵体内NOS活性和CO含量。结果:与A组比较,B组大鼠血浆Hcy浓度明显升高,阴茎勃起功能明显降低,阴茎海绵体NOS活性和CO含量均下降,差异有显著性(P<0.01)。2型DM大鼠中高Hcy血症发生率为55%。与B组比较,C组和D组中大鼠血浆Hcy浓度显著下降,阴茎勃起功能、阴茎海绵体NOS活性均升高(P<0.01),Hcy与NOS(rA=-0.89,rB=-0.76,rC=-0.91,rD=-0.91)及CO含量(rA=-0.82,rB=-0.77,rC=-0.93,rD=-0.81)均呈负相关。结论:2型DM大鼠血浆中的高Hcy可能是引起阴茎海绵体NOS活性下降、CO含量下降,进而导致DM ED发病的分子机制之一。胰岛素、叶酸和维生素B12可以改善DM大鼠的勃起功能,提高阴茎海绵体NOS活性和CO含量。     

白术附子肉桂合剂对老年小鼠脑线粒体细胞色素C氧化酶、细胞色素C的影响

目的　从能量代谢及抗氧化系统的角度探讨白术、附子、肉桂合剂 (简称合剂 )对老年小鼠脑作用的机制。方法　检测脑线粒体丙二醛 (MDA)、细胞色素C(CC)含量以及锰 超氧化物歧化酶 (MnSOD)、细胞色素C氧化酶 (CCO)活性 ,以合剂灌喂老年小鼠 ,并检测其对上述指标的影响。结果　老年小鼠脑线粒体MDA、CC含量降低 ,MnSOD和CCO活性增高。结论　合剂具有抗氧化作用 ,并能增加细胞功能。     

心衰患者TNF-α、生长激素与下丘脑-垂体-甲状腺轴的相关性

目的:研究充血性心衰(CHF)患者肿瘤坏死因子、生长激索与下丘脑-垂体-甲状腺轴(HHTA)的关系。方法:应用放免法测定28例CHF患者及14例健康人的血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),生长激素(GH)及甲状腺激素的含量。后者包括三碘甲状腺原氨酸(T3),四碘甲状腺原氨酸(T4),游离T3(FT3).游离T4(FT4)及反T3(rT3)。还测定了促甲状腺激素(TSH),促甲状腺激素释放激素(TRH)的含量。结果:①CHF患者血清TNF-α,GH,T3,FT3,FT4,rT3浓度与对照组相比发生显著性变化,而TSH、TRH无显著变化;②血清TNF-α与FT3呈显著负相关(r=-0.54.P<0.05);③血清GH与HHTA系统呈显著负相关(r=-0.57)。结论:①在CHF患者,HHTA系统调节失衡;②TNF-α,GH与HHTA系统间相互影响,可能加速心功能恶化。     

槲皮素抑制异烟肼诱导的L-02细胞线粒体氧化应激性DNA损伤

目的:探讨活性氧(ROS)介导的线粒体氧化损伤在异烟肼(INH)诱导L-02细胞DNA损伤中的作用及槲皮素对细胞的保护作用。方法:建立体外培养INH致肝细胞L-02损伤的模型,将细胞分为对照(control)组、INH组、槲皮素低剂量(Que low)及高剂量(Que high)组。利用彗星试验评价细胞DNA损伤;制备L-02细胞线粒体,应用荧光探针DCFH-DA和rhodamine 123检测细胞线粒体ROS水平及线粒体膜电位(ΔΨm);采用TBA法测定丙二醛(MDA)含量;应用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)的活性;采用Western blotting法检测细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达,计算Bax/Bcl-2值。结果:INH可诱导L-02细胞DNA损伤,使细胞线粒体ROS水平、细胞MDA含量及Bax/Bcl-2值明显增高,并使细胞ΔΨm值和SOD活性明显下降。而槲皮素能减轻细胞DNA损伤,减少细胞ROS水平,增加细胞ΔΨm值,降低细胞MDA含量,增加SOD活性,减少Bax/Bcl-2值。结论:INH可通过诱导细胞线粒体氧化应激导致L-02细胞DNA损伤。槲皮素能减轻INH诱导L-02细胞的DNA损伤,对L-02细胞具有保护作用,可能与其抑制ROS介导的线粒体氧化损伤有关。     

WPBL教学法在循环内科教学中的应用研究

目的:探讨WPBL教学法在"循环内科"教学中的效果。方法:对我校2010级临床医学专业内科学的课程中"冠心病"和"心律失常"的部分教学内容进行了WPBL教学尝试,自行撰写PBL案例"我胸痛了"和"我心慌了"应用于教学实践中,并设立以传统教学方式授课班级为对照组。通过考核和问卷调查形式来评价教学效果。结果:WPBL教学组的考试成绩平均分高于对照组(P<0.01)。问卷调查结果显示,86.21%的学生对WPBL教学法持肯定态度。90.68%的学生学习兴趣高涨,并且分析问题的能力、小组合作的能力及自主学习的能力得到较大程度提高。结论:WPBL教学法有利于学生自主学习等多种能力的提高,显著提高学生学习兴趣,并且有助于提高学习成绩,因此,WPBL在临床医学专业教学实践中具有一定的推广应用价值。     

雌激素对大鼠动脉血红素氧合酶／一氧化碳体系的调节

目的：研究雌激素对大鼠主动脉血红素氧合酶／一氧化碳体系的影响，以探讨雌激素对心血管系统保护作用的机制。方法：对30只雌性大鼠随机分为三个组，每组10只，去卵巢组（A组）、去卵巢＋雌激素组（B组）、假手术组（C组）。正常饮食2个月后处死大鼠，测雌激素，主动脉匀浆血红素氧合酶及一氧化碳含量。结果：同假手术组相比，去卵巢大鼠主动脉匀浆血红素氧合酶活性及CO含量显降低，在补充适量的雌激素后，主动脉匀浆血红素氧合酶活性及CO含量显上升，结论：雌激素可以调节大鼠动脉血红素氧合酶／一氧化碳体系，可能是其对心血管系统具有保护作用的机制。     

中频交变磁场照射后小鼠的行为学变化

目的:目前电磁辐射对生物体行为学方面的研究还很薄弱,设立不同磁场的强度和不同照射的周期,观察中频领域磁场照射对小鼠的自主活动和学习记忆的影响。方法:实验于2007-05-10/06-15在清华大学医学院和中国医学科学院药用植物研究所完成。①实验材料:磁场发生装置:中频交变磁场发生装置由清华大学工程物理系医学物理与工程研究所自主研发,可产生频率为40kHz,场强为28.8A/m,28.8kA/m的中频交变磁场。自主活动测试箱:中国医学科学院药用植物研究所提供,为一可封闭的金属箱,内置摄像头。4只黑色塑料测试桶分别置于箱子四角。水迷宫测试箱:中国医学科学院药用植物研究所提供。②实验动物及方法:将80只小鼠随机分为不同场强照射组和对照组。强磁场照射1组:11.6kA/m/40kHz,1h/d,连续照射7d。强磁场照射2组:11.6kA/m/40kHz,2h/d,连续照射7d。强磁场照射3组:11.6kA/m/40kHz,2h/d连续照射15d。弱磁场照射组:28.8kA/m/40kHz,2h/d,连续照射7d。对照组除了未放入磁场照射,其他条件与照射组一致。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。③实验评估:观察其一般活动的改变,并采用自主活动测试箱和水迷宫测试箱进行测试,观察各组小鼠的自主活动和学习记忆的改变。结果:①一般行为观察:与对照组小鼠对比,经过中频交变磁场照射过的各组小鼠活跃度减低,毛色较差。强磁场照射3组(145G,2h/d,连续15d)于第11天和13天分别死亡1只。②自主活动检测结果:强磁场照射2,3组小鼠的运动路程、运动速度、运动时间明显低于对照组(P<0.05)。③水迷宫测试结果:在学习记忆检测阶段撤掉平台,发现各组动物2min内穿越平台原来所在象限的次数没有明显差别(P>0.05)。结论:中频交变磁场照射会给小鼠的自发活动造成一定影响,对学习记忆没有影响。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑海马区NCAM-1表达影响的研究

目的：通过检测灵芝孢子粉对戊四氮（PTZ）致癫痫大鼠脑海马神经细胞黏附分子1（NCAM-1）表达的影响,进一步探讨灵芝孢子粉对减轻癫痫症状的机制。方法：健康雄性Wistar大鼠30只．随机分为空白对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉用药组,每组10只。模型组和用药组复制癫痫模型。采用Western—blot方法检测大鼠脑海马区NCAM-1的表达。结果：模型组NCAM-1表达明显高于对照组（0．85±0．07vs0．36±0．08．P〈0.01）,用药组明显低于模型组（0．54±0．07vs0．85±0．07．P〈0．01）,高于对照组（0.54±0．07vs0．36±0．08,P〈0．05）。结论：灵芝孢子粉能有效降低癫痫大鼠NCAM-1的过度表达。从而降低NCAM-1对中枢神经系统的毒性损害。