矽肺患者血清miRNA-21、TGF-β1及Smad3的表达及临床意义

目的探讨矽肺患者血清miRNA-21、TGF-β1及Smad3的表达水平及临床意义。方法选取确诊的矽肺患者共计90例,包含Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期患者各30例,为矽肺组;同一采矿环境的同期接尘工人20例,为接尘组;同期参加体检的健康志愿者36例,为对照组。随机选取上述入组对象中4例矽肺患者和4例健康志愿者,抽取血清标本进行miRNAseq高通量测序,了解miRNA-21的相对表达情况。采取实时定量聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction, PCR)方法,检测各组对象血清miRNA-21表达水平;采用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)方法,检测各组对象血清TGF-β1和Smad3水平,探讨三指标之间相关性及与矽肺疾病严重程度的相关性。结果高通量筛选提示,与健康志愿者比较,矽肺患者血清miRNA-21表达量为8.26。矽肺组血清miRNA-21总体表达量为(1.95±0.62),与对照组(0.98±0.08)和接尘组(1.15±0.14)比较,明显升高,差异有统计学意义(均P0.05)。与对照组相比,接尘组miRNA-21表达量升高,差异有统计学意义(P0.05)。矽肺组Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期各亚组的miRNA-21表达量分别为(1.29±0.14),(2.05±0.49),(2.51±0.38),呈逐步升高,各亚组间差异有统计学意义(均P0.05)。矽肺组血清TGF-β1总体测值为(521.16±150.68)ng/L,高于对照组(280.03±51.80)ng/L和接尘组(304.00±56.09)ng/L,差异有统计学意义(均P0.05),接尘组TGF-β1与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。矽肺组Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期各亚组的TGF-β1表达量分别为(378.00±73.90)ng/L,(507.80±77.91)ng/L和(677.67±106.88)ng/L,呈逐步升高,各亚组间差异有统计学意义(均P0.05)。矽肺组血清Smad3的总体测值为(32.94±9.31)ng/L,高于对照组(17.39±3.66)ng/L和接尘组(18.98±3.90)ng/L,差异有统计学意义(P0.05)。矽肺组Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期各亚组的Smad3表达量分别为(27.00±4.88)ng/L、(31.44±7.61)ng/L和(40.38±9.39)ng/L,呈逐步升高,各亚组间差异有统计学意义(P0.05)。矽肺组miRNA-21与TGF-β1、Smad3的表达水平相关,在对照组、接尘组和矽肺Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期各亚组中未见类似现象。结论血清miRNA-21、TGF-β1和Smad3均可能作为矽肺辅助诊断和病情严重程度的临床检测指标,miRNA-21还可作为接尘工人早期矽肺筛查的指标。     

洛铂体外诱导人结肠癌细胞株LOVO细胞凋亡及其作用机制

[目的]探讨洛铂体外诱导人结肠癌细胞株LOVO细胞凋亡及其作用机制。[方法]采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度(500μM、1000μM、2000μM)的洛铂作用于LOVO细胞24h的生长抑制率;原位末端标记技术法(TUNEL)检测LOVO细胞凋亡指数,计算凋亡阈值;流式细胞技术检测细胞周期变化;分光光度法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3、8、9的表达。[结果]洛铂体外能抑制人结肠癌细胞株LOVO细胞的增殖,且呈剂量依赖性(P<0.05);洛铂能诱导LOVO细胞发生凋亡,凋亡阈值为1000μM;流式细胞技术分析显示洛铂致LOVO细胞周期明显阻滞在S期;分光光度法提示洛铂作用后LOVO细胞caspase-3、8、9表达明显高于阴性对照组(P<0.05)。[结论]洛铂能诱导体外培养的LOVO细胞凋亡,其作用机制可能与洛铂诱导LOVO细胞S期阻滞及促进caspase-8和caspase-9表达,进而促进cas-pase-3表达有关。     

洛铂体外诱导人结肠癌细胞株LOVO细胞凋亡及其作用机制的研究

背景与目的:化疗是结肠癌主要的治疗手段,含铂类药物的联合化疗方案延长了患者的生存期,但不良反应却很明显,尤其是奥沙利铂所致的外周神经病变较常见,并且FOLFOX4方案还容易引起耐药,因此有必要寻找一种疗效类似或优于奥沙利铂、不良反应小、对耐药肿瘤有效、水溶性好及稳定的新型铂类药物.本研究探讨洛铂体外诱导人结肠癌细胞株LOVO细胞凋亡及其作用机制,为洛铂的临床应用提供理论依据.方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度(500、1000和2 000 μmol/L)的洛铂作用LOV0细胞24 h的生长抑制率;Annexin V-FITC检测法检测人结肠癌细胞株LOV0细胞凋亡的变化;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达变化.结果:洛铂体外能抑制人结肠癌细胞株LOV0细胞的增殖,且呈剂量依赖性(P＜0.05);Annexin V-FITC检测显示,洛铂能诱导LOV0细胞凋亡,实验组的总凋亡率与对照组相比,差异均具有统计学意义(P＜0.05),且细胞的早期凋亡呈剂量依赖性,洛铂诱导细胞凋亡的阈值为1 000 μ mol/L;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3显示,与对照组相比,实验组Bax和Caspase-3的表达明显增加,而Bcl-2的表达明显减少,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论:洛铂能诱导体外培养的LOVO细胞凋亡,其作用机制可能是抑制LOVO细胞Bcl-2表达,激活Bax表达.洛铂介导的凋亡途径可能与线粒体通路Bcl-2(bax)-Caspase信号传导有关.     

吉非替尼对比培美曲塞二线治疗晚期非鳞型非小细胞肺癌的随机对照临床研究

背景与目的吉非替尼和培美曲塞均是晚期非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)二线治疗的药物,但直接对比两者二线治疗的研究数据有限。本研究旨在比较吉非替尼和培美曲塞二线治疗晚期非鳞型NSCLC的疗效、安全性及对生活质量的影响。方法将46例一线含铂双药化疗方案(不含培美曲塞)治疗失败的晚期非鳞型NSCLC患者随机分为两组,每组23例,分别给予吉非替尼口服(吉非替尼组),或静脉滴注培美曲塞(培美曲塞组),比较两组的疗效和安全性及治疗对生活质量的影响。结果培美曲塞组的客观缓解率(objectiveresponserate,ORR)为13.0%(3/23),疾病控制率(diseasecontrolrate,DCR)为30.4%(7/23),中位无进展生存时间(medianprogression-freesurvival,mPFS)为3.1个月;吉非替尼组的ORR17.3%(4/23),DCR39.1%(9/23),mPFS4.4个月;两组的ORR、DCR和mPFS均未见统计学差异(P>0.05)。培美曲塞最常见的不良反应为中性粒细胞减少(n=9,39.13%)和乏力(n=8,34.78%);吉非替尼最常见的不良反应为皮疹(n=8,34.78%)和腹泻(n=4,17.39%)。和治疗前基线相比,培美曲塞组和吉非替尼组治疗后生活质量评分均有不同程度的改善,吉非替尼组在情绪,活动能力及肺癌附加关注的其它因素方面较培美曲塞组改善更明显(P<0.05)。结论吉非替尼和培美曲塞二线治疗晚期非鳞型NSCLC的疗效相似,不良反应各异;两者均能改善患者的生活质量,但是吉非替尼改善更明显。     

炎症因子评分对晚期非小细胞肺癌患者预后评估的应用价值

目的: 探讨炎症因子评分在晚期非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)患者预后评估中的应用价值。方法: 收集156例NSCLC患者的临床资料,检测改良格拉斯哥预后评分(mGPS)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)。mGPS根据C 反应蛋白和白蛋白分为0、1、2分组,NLR、PLR分别以中位数为截取值分为低分组和高分组。回顾性分析炎症评分指标与患者临床特征、化疗近期疗效及肿瘤无进展生存时间(PFS)的关系。将可能影响疾病预后的临床病理因素纳入Cox回归模型进行单因素和多因素预后分析。结果： 客观有效率,mGPS 0分组高于mGPS 1分组和2分组,NLR低分组高于NLR高分组(P＜0.05);PLR低分组与高分组间差异无统计学意义(P＞0.05)。疾病控制率,mGPS 0分组高于mGPS 1分组和2分组,NLR低分组高于NLR高分组,PLR低分组高于PLR高分组(P＜0.05)。PFS在mGPS 0、1、2分三组间,低分组较高分组延长(P＜0.05);NLR低分组较NLR高分组延长,PLR低分组较PLR高分组延长(P＜0.05)。NLR和PLR高分组发生胸膜转移者较低分组明显增多(P＜0.05)。多因素预后分析证实,mGPS是NSCLC患者PFS预后的独立危险因素(HR=1.962,95%CI：1.417～2.716,P＜0.05)。结论： 炎症因子评分mGPS、NLR、PLR均与NSCLC患者预后有关,其中mGPS评分是晚期NSCLC患者PFS预后的独立危险因素。     

针刺法治疗多发性寻常疣、跖疣126例临床研究

目的探讨用针刺法治疗多发性寻常疣、跖疣的临床疗效。方法选择126例寻常疣、跖疣患者，应用针灸针法和针刀法（适用于跖疣或体积较大的疣）分别治疗。结果经过治疗，所有寻常疣或跖疣就自然萎缩消失，愈后局部皮肤无疤痕及色素沉着。经治愈1～5年，随访75人次均无复发，随访人数占本组人数的59．5％，所随访人数无复发率达100％。结论不论多发性寻常疣有多少个，针刺法治疗即只需针刺一个母疣就能使所有疣脱落，且治疗方法简便、痛苦少、易接受，治愈率高，无复发、无疤痕。     

关于吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌副反应分析

目的观察吉非替尼单药对化疗失败的晚期非小细胞肺癌的毒性反应。方法 41例既往化疗失败的非小细胞肺癌患者,口服吉非替尼250mg,每日1次直到病情进展或出现不可耐受的不良反应停药,同时评价疗效及药物不良反应。结果 41例患者中皮疹发生率60.98%;腹泻发生率26.83%,其中一例发生严重间质性肺炎。结论吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌疗效好,但有皮疹、腹泻、肝肾功能损伤、间质性肺炎等副作用。     

7种β-微管蛋白同型在非小细胞肺癌中的表达及其和紫杉类药物敏感性的研究

目的探讨7种β-微管蛋白同型mRNA及Ⅲ型β-微管蛋白在非小细胞肺癌(Non small cell lung cancer,NSCLC)中的表达,及其表达与紫杉类药物敏感性的关系。方法收集55例未经化疗的不能手术的转移性或复发晚期NSCLC患者肿瘤组织标本,一线均采用铂类联合紫杉类药物的双药化疗方案治疗,两个周期后评估疗效,将完全缓解(CR)和部分缓解(PR)归为紫杉类敏感组,疾病稳定(SD)为紫杉类次敏感组,疾病进展(PD)为紫杉耐药组。采用RT-RCR方法检测肿瘤组织中7种β-微管蛋白同型mRNA的表达;采用免疫组织化学法(IHC)方法检测Ⅲ型β-微管蛋白的表达。分析各组标本中7种β-微管蛋白同型的mRNA表达水平和Ⅲ型β-微管蛋白的表达阳性率,并与紫杉类的敏感性进行相关性分析。结果在55例NSCLC标本中,均可检测到7种β-微管蛋白同型mRNA的表达,以Ⅱ型和V型β-微管蛋白相对表达量最高。Ⅲ型β-微管蛋白的mRNA表达在紫杉敏感组和紫杉次敏感组均低于紫杉耐药组(P0.05);而其他6种β-微管蛋白同型(I,Ⅱ,Iva,IVb,V,VI)的mRNA表达在三组均无统计学差异(P0.05)。IHC结果显示,Ⅲ型β-微管蛋白在紫杉敏感组,紫杉次敏感组的表达阳性率分别为16.67%(3/18),20.00%(4/20),均低于紫杉耐药组52.94%(9/17),差异具有统计学意义(P0.05);而Ⅲ型β-微管蛋白在紫杉敏感组和紫杉次敏感组的表达阳性率无统计学差异(P0.05)。结论 7种β-微管蛋白同型在NSCLC肿瘤组织中均可检测到mRNA表达,其中Ⅲ型β-微管蛋白的mRNA和蛋白表达与紫杉类药物的敏感性相关,高表达者显示出对紫杉类药物的耐药。     

TUBB3和MAPT预测非小细胞肺癌对紫杉类药物敏感性的研究

目的 探讨Ⅲ型β-微管蛋白（TUBB3）和微管相关蛋白tau（MAPT）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达水平及其对紫杉类化疗药物敏感性的预测价值。 方法 收集55例未经化疗的不能手术的转移性或复发晚期NSCLC患者的肿瘤组织标本,一线治疗均采用铂类联合紫杉类双药化疗方案,2个周期后评估疗效,将完全缓解和部分缓解的患者归为敏感组,疾病稳定的患者归为次敏感组,疾病进展的患者归为耐药组。采用逆转录-聚合酶链反应检测3组TUBB3和MAPT的mRNA水平,分析NSCLC组织中TUBB3和MAPT mRNA的相关性,采用免疫组织化学法检测3组TUBB3和MAPT的蛋白表达情况。 结果 在55例NSCLC组织中,TUBB3和MAPT mRNA在3组均有不同程度的表达,且两者蛋白均定位在细胞质内。敏感组、次敏感组及耐药组的TUBB3 mRNA水平分别为0.12±0.13、0.17±0.24和0.51±0.19,MAPT mRNA水平分别为0.09±0.05、0.14±0.09和0.46±0.21,TUBB3阳性表达率分别为22.22％（4／18）、20.00％（5／20）和70.59％（12／17）,MAPT阳性表达率分别为16.67％（3／18）、25.00％（4／20）和52.94％（9／17）;耐药组的TUBB3和MAPT mRNA水平及阳性率均高于其余两组（P＜0.05）,且敏感组和次敏感组的以上差异均无统计学意义（P＞0.05）。TUBB3和MAPT的mRNA水平呈正相关（r=0.219,P=0.047）。 结论 TUBB3和MAPT的mRNA和蛋白表达与紫杉类药物的敏感性有关,高表达者提示对紫杉类药物耐药,联合检测TUBB3和MAPT可能对紫杉类药物化疗敏感性具有较好的预测价值。