3-溴丙酮酸通过AMPK/mTOR信号通路调控成纤维样滑膜细胞凋亡/自噬失衡的作用北大核心CSCD

目的基于AMPK/mTOR信号通路探讨3-溴丙酮酸(3-bromopyruvate,3-BrPA)对大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)凋亡、自噬的调控作用和机制。方法使用肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导体外培养的大鼠FLS来构建类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)模型。MTT实验检测TNF-α诱导FLS以及3-BrPA治疗FLS的适宜浓度,划痕实验和Transwell实验检测3-BrPA对FLS迁移和侵袭能力的影响,流式细胞术和JC-1线粒体膜电位实验检测FLS的凋亡情况,mCherry-EGFP-LC3B过表达质粒检测FLS自噬流变化,Western blot检测FLS凋亡/自噬相关蛋白及AMPK/mTOR通路相关蛋白的表达。结果3-BrPA(15μmol·L^(-1))明显抑制了TNF-α(25μg·L^(-1))刺激下FLS的增殖、迁移和侵袭。此外,还促进FLS凋亡、下调FLS线粒体膜电位并阻断FLS的自噬流。Western blot检测结果显示,相比于TNF-α组,3-BrPA上调caspase-3、Bax、P62和p-mTOR/mTOR的表达,下调LC3B、Beclin1、Bcl-2和p-AMPK/AMPK的表达。结论3-BrPA能够在体外调节大鼠FLS凋亡/自噬失衡来抑制其异常活化,其机制可能与抑制AMPK/mTOR信号通路有关。     

肺动脉高压对内皮祖细胞与骨形成蛋白-2的影响

目的分析特发性肺动脉高压（IPAH）对血浆骨形成蛋白2（BMP-2）的浓度和外周血内皮祖细胞（EPC）数量的影响以及BMP-2与肺动脉压（PAP）及EPC的关系。方法选取经右心漂浮导管检测肺动脉压确诊的IPAH住院患者28例为试验组;同时选取健康志愿者20例为对照组。采用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）法测定血浆BMP-2的浓度,同时显微镜下计数外周血EPC。统计分析两组差异并对BMP-2与PAP和EPC的相关性进行分析。结果 IPAH患者血浆BMP-2水平高于对照组,差异有统计学意义[（0.1294±0.0292）μg/mlvs.（0.0898±0.0295）μg/ml,P〈0.01],外周血EPC数量低于正常对照组,EPC数量具差异有统计学意义[（26.75±5.87）个vs.（42.65±8.37）个,P〈0.01]。BMP-2与PAP呈正相关,与EPC数量呈负相关。结论血浆BMP-2升高及EPC数量下降可能参与IPAH的发病过程;且BMP-2与PAP和EPC均有关。     

左卡尼汀联合水化对伴有肾功能不全的冠心病患者造影剂肾病的预防作用研究

目的探讨左卡尼汀联合水化对伴有肾功能不全的冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者造影剂肾病的预防作用。方法选取于2018年6月至2019年12月于河南大学第一附属医院行择期冠状动脉(冠脉)造影术或冠脉支架植入术的肾功能不全的冠心病患者,将入组患者按照治疗方法分为左卡尼汀联合水化组(n=51)和单纯水化组(n=57)。比较两组术后48 h造影剂肾病的发生率,测定两组术前和术后6 h中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)及术后48 h血肌酐、肾小球滤过率(eGFR)水平。结果左卡尼汀联合水化组造影剂肾病的发生率(9.80%)低于单纯水化组(24.73%),差异有统计学意义(P<0.05)。左卡尼汀联合水化组术后6 h NGAL及48 h肌酐水平低于单纯水化组,eGFR的水平高于单纯水化组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论左卡尼汀联合水化可降低伴有肾功能不全的冠心病患者造影剂肾病的发生率。     

重症患儿电子纤维支气管镜检查的护理配合及T型接头与气胀式气囊的应用

电子纤维支气管镜(以下简称纤支镜)是于80年代末出现,从检查、记录到手术和非手术治疗,纤支镜的功能不断扩展,已成为诊治气管和肺部疾病的有力工具,并且在急危重症领域的应用也日益受到重视[1].纤支镜检查在我国成人已普遍应用,但由于小儿气道狭小、黏膜柔嫩、缺乏配合等原因,使纤支镜在儿科的应用中有较大难度.危重症患儿病情危重,术前已存在缺氧,部分患儿已予机械通气支持治疗,此类患儿行纤支镜检查有更大风险,在术中更易出现spO2下降、发绀,如何保障患儿良好的通气至关重要,是目前纤支镜术尚待解决的问题之一.     

特发性肺动脉高压患者外周血内皮祖细胞数量和肺动脉压力的关系研究

目的检测特发性肺动脉高压(IPAH)患者外周血内皮祖细胞(EPCs)数量,分析EPCs和肺动脉压力的关系。方法收集28例住院的IPAH患者为IPAH组,选择同期20例健康志愿者为对照组,采用体外培养外周血EPCs,激光共聚焦显微镜鉴定正在分化的EPCs,在倒置相差显微镜下计数EPCs数目。同时对28例IPAH患者经右心漂浮导管检测肺动脉压力。结果对照组外周血EPCs为(34.7±7.6)个,IPAH组外周血EPCs为(61.6±10.4)个,两组外周血EPCs数量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。经右心漂浮导管检测,肺动脉平均压力与外周血EPC水平呈负相关(r=-0.625,P<0.001)。结论 IPAH患者外周血EPCs数量低于正常对照组,并和肺动脉压力呈负相关,提示EPCs的减少可能加重IPAH患者内皮功能的紊乱,EPCs可能参与IPAH形成的病理生理过程。     

IL-4协同雌二醇对小鼠乳腺癌细胞生长的促进作用及其机制

目的：探讨白细胞介素4（IL-4）协同雌二醇对小鼠乳腺癌4T1细胞对其生物学行为的影响,并阐明其作用机制。方法：体外培养4T1细胞,加入不同浓度（0、12.5、25.0、50.0和100.0 μg·L^-1） IL-4或雌二醇（0、6.25、12.50、25.00、50.00 nmol·L^-1）,作用72 h后MTT法检测乳腺癌4T1细胞增殖率。将乳腺癌4T1细胞分为对照组（不进行任何处理）、IL-4组（加入50.0 μg·L^-1 IL-4）、雌二醇组（加入12.50 nmol·L^-1雌二醇）和联合组（加入50.0 μg·L^-1 IL-4+12.50 nmol·L^-1雌二醇）,MTT法检测各组乳腺癌4T1细胞增殖率,流式细胞术检测各组不同细胞周期乳腺癌4T1细胞百分比,Western blotting法检测各组乳腺癌4T1细胞中STAT6、p-STAT6、ERα、Erk、p-Erk、P70S6K、p-P70S6K、S6和p-S6蛋白表达水平。结果：与0 μg·L^-1 IL-4组比较,25.0、50.0和100.0 μg·L^-1IL-4组乳腺癌4T1细胞增殖率升高（P<0.05）。与0 nmol·L^-1雌二醇组比较,12.50、25.00、50.00 nmol·L^-1雌二醇组乳腺癌4T1细胞增殖率升高（P<0.05）。与对照组比较,IL-4组乳腺癌4T1细胞增殖率升高（P<0.05）;与对照组比较,雌二醇组乳腺癌4T1细胞增殖率升高（P<0.05）;与IL-4组或雌二醇组比较,联合组乳腺癌4T1细胞增殖率升高（P<0.05）。与对照组比较,IL-4组乳腺癌4T1细胞中S期和G₂/M期细胞百分比升高（P<0.05）,G₀及G₁期细胞百分比降低（P<0.05）;雌二醇组乳腺癌4T1细胞中S期细胞百分比明显升高（P<0.05）,G₀及G₁期细胞百分比降低（P<0.05）。与IL-4组或雌二醇组比较,联合组乳腺癌4T1细胞中S期和G₂/M期细胞百分比升高（P<0.05）,G₀及G₁期细胞百分比降低（P<0.05）。与对照组比较,IL-4组乳腺癌4T1细胞中ERα、p-Erk、p-P70S6K和p-S6蛋白表达水平升高,雌二醇组乳腺癌4T1细胞中p-STAT6、ERα、p-Erk、p-P70S6K、S6和p-S6蛋白表达水平升高（P<0.05）;联合组乳腺癌4T1细胞中STAT6、p-STAT6、ERα、p-Erk、p-P70S6K和p-S6蛋白表达水平升高（P<0.05）。结论：IL-4协同雌二醇可促进小鼠4T1乳腺癌细胞膜IL-4受体（IL-4R）和雌激素受体（ER）表达,增强乳腺癌4T1细胞中Erk1和p70S6K激酶的激活及下游分子S6蛋白的磷酸化。     

2型糖尿病下肢血管病变患者C反应蛋白与晨尿微量白蛋白的关系

目的:观察单纯2型糖尿病和并发下肢血管病变患者C反应蛋白及微量白蛋白尿的变化,探讨其在糖尿病下肢血管病变发生中的影响。方法:80例2型糖尿病患者根据有无下肢血管病变分为单纯2型糖尿病组(A组)和下肢血管病变并发症组(B组)及健康对照组(C组),于入院后测定血浆hs-CRP,晨尿微量白蛋白水平,比较3组超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平及晨尿微量白蛋白的水平。结果:并发下肢血管病组的C反应蛋白水平明显升高,其晨尿微量白蛋白的水平也明显增高。结论:应加强对糖尿病患者C反应蛋白及晨尿微量白蛋白的筛查,并给予积极早期的干预治疗。     

参知健脑胶囊对脑缺血大鼠局部脑血流量的影响

目的观察参知健脑胶囊对大鼠局部脑血流量的影响。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,金纳多组,参知健脑胶囊低、中、高组,每组10只。将大鼠囟门处颅骨磨薄,然后采用结扎双侧颈总动脉建立低灌注模型,术后10 min,除假手术组和模型组给予等体积生理盐水外,其余各组直肠注射给药,分别给予金纳多20 mg/kg以及参知健脑胶囊40、120、360 mg/kg。应用激光多普勒血流仪检测各组给药后30、60、90、120 min时点动物rCBF变化。结果模型组术后rCBF下降明显,与假手术组相比有显著统计学差异(P0.01);参知健脑胶囊在给药后30 min~120 min可明显抑制脑缺血大鼠rCBF的下降,与模型组比较差异显著(P0.05,P0.01),与金纳多组相比无显著差异(P0.05)。结论参知健脑胶囊抑制脑缺血大鼠rCBF的疗效与金纳多相似,其治疗血管性痴呆的作用可能与其改善脑部缺血状态有关。     

造影剂对早期糖尿病肾病患者肾功能影响

目的观察行冠状动脉造影时造影剂对早期糖尿病肾病患者肾功能的影响。方法拟诊冠心病行冠状动脉造影检查的早期糖尿病肾病患者(24h白蛋白总量30～300mg,血肌酐正常130例,比较造影前、造影后第1,3天血尿素氮、肌酐、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C,Cys C)、尿微量白蛋白(microalbumin,mAlb)和尿β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)水平,并观察造影剂肾病发生情况。结果患者均未发生造影剂肾病;造影后第1,3天血尿素氮、肌酐和尿β2-MG水平与造影前比较差异无统计学意义(P>0.05);造影后第1天血Cys C与尿mAlb均高于造影前(P<0.05),且超过正常值高值;造影后第3天血Cys C与尿mAlb均较造影后第1天下降(P<0.05),与造影前比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论早期糖尿病肾病患者应用非离子型低渗性造影剂行冠状动脉造影检查可出现一过性血Cys C和mAlb水平增高。     

微小 RNA-125a-3p介导 Notch1信号通路对骨质疏松性骨折大鼠愈合过程的影响

目的 探讨微小核糖核酸(miR)-125a-3p靶向介导Notch1信号通路对Wistar大鼠骨质疏松性骨折愈合的影响.方法 6月龄Wistar大鼠58只,假手术组8只(假手术组),其余50只鼠切除卵巢建立骨质疏松大鼠模型,测骨密度验证模型成立,再手术建立一侧股骨中点骨折模型,克氏针固定.去除模型不成功大鼠后分组转染,每组8只,包括:模型组、inhibitor NC组(转染抑制剂阴性对照组)、miR-125a-3p inhibitor组(转染miR-125a-3p抑制剂)、si-Notch1组(转染Notch si-RNA干扰)、miR-125a-3p inhibitor+si-Notch1组(miR-125a-3p抑制剂及Notch1 si-RNA联用组).大鼠饲养8周后取断端组织,实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-125a-3p及Notch1的表达,过生物信息学网站预测及双荧光素酶报告实验检测miR-125a-3p与Notch1的靶向作用,病理组织学及免疫组化观察、骨密度及生物力学测量共同分析各组骨折愈合情况.结果 模型组较假手术组骨密度下降(P<0.05).与假手术组相比,模型组中miR-125a-3p表达量(1.48±0.11)均上调,Notch1表达(0.75±0.02)下调(P<0.05).miR-125a-3p mimic与野生型Notch1-WT共转染组中荧光素酶活性强度[萤火虫荧光素酶(0.58±0.02)]下降(P<0.05).与inhibitor NC组相比,miR-125a-3p inhibitor组(0.62±0.29)及miR-125a-3p inhibitor+si-Notc1组(0.73±0.21)表达下调(P<0.05).与inhibitor NC组相比,miR-125a-3p inhibitor组Notch1表达(0.93±0.35)提高,si-Notch1组(0.40±0.15)表达降低(P<0.05).与si-Notch1组相比,miR-125a-3p inhibitor+si-Notc1组(0.79±0.33)Notch1表达提高(P<0.05).转染8周后,假手术组骨小梁开始大量形成,厚度均匀,排列紧密、方向一致.模型组、inhibitor NC组骨细胞数大量减少,骨小梁较细,间隙较大且排列紊乱.miR-125a-3p inhibitor组骨小梁厚度增加,骨细胞数增多,骨质改善,与假手术组显微形态较为相似.si-Notch组骨细胞数大量缺失,骨小梁间隙极大,显微结构较模型组病理形态更明显.miR-125a-3p inhibitor+si-Notc1组介于miR-125a-3p inhibi-tor组与si-Notch1组间,骨小梁厚度有所增加.同inhibitor NC组相比,miR-125a-3p inhibitor组(120.60±6.65)阳性表达增加,si-Notch1组(60.60±2.84)减少(P<0.05).同miR-125a-3p inhibitor组相比,miR-125a-3p inhibitor+si-Notc1组阳性细胞表达(78.00±2.27)降低,与si-Notch1组相比增多(P<0.05).第4、6、8周,同假手术组相比,模型组(104.25±10.52、110.25±13.03、116.75±10.59)骨密度下降(P<0.05).同inhibitor NC组相比,miR-125a-3p inhibitor组(119.02±9.55、131.25±10.57、146.75±12.47)骨密度上升,si-Notch1组降低(P<0.05).同miR-125a-3p inhibitor组相比,miR-125a-3p inhibitor+si-Notc1组各项骨生物力学指标下降(P<0.05).同假手术组相比,模型组各项骨生物力学指标,包括最大负载、极限应力及剪切应力下降(P<0.05);同inhibitor NC组相比,miR-125a-3p inhibitor组[最大负载:(125.01±12.05)N;极限应力:(86.75±5.11)Mpa;剪切应力:(1.62±0.34)N/mm2]各项骨生物力学指标上升,si-Notch1组降低(P<0.05).同miR-125a-3p inhibitor组相比,miR-125a-3p inhibitor+si-Notc1组[最大负载:(95.02±8.41)N;极限应力:(56.52±4.95)Mpa;剪切应力:(1.30±0.17)N/mm2]各项骨生物力学指标下降;与si-Notch1组相比上升(均P<0.05).结论 抑制miR-125a-3p可以促进Notch1表达,增加BMP-2的阳性表达、增强骨密度及生物力学强度,进而促进骨质疏松性Wistar大鼠骨折愈合.