凝血酶原基因G 20210 A多态性与心肌梗死和脑卒中的相关性

目的；研究凝血酶原基因G20210A（FⅡG20210A）多态性在中国人群中的分布频率及其与急性化肌梗死和缺血性脑卒中之间的相关性。方法：运用PCR、限制性内切酶消化及聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法检测173例缺血性脑卒中患者，97例急性心肌梗死患者及107例正常人对照的FⅡG20210A等位基因。结果：未检出一例FⅡG20210A基因突变者，提示被检测及正常人FⅡG20210A基因变异频率为0。结论：在中国人群中，FⅡG20210A基因变异罕见甚至缺如。FⅡG20210A基因多态性不足以成为中国人缺血脑卒中与急性心肌梗死的危险因素。     

血小板CD40配体对内皮细胞表达组织因子的影响

目的探讨活化血小板CD40配体对内皮细胞表达组织因子、组织因子抑制物的影响及其分子机制。方法建立活化血小板与人脐静脉内皮细胞的共孵育体系(细胞比例10∶1),观察内皮细胞组织因子及其抑制物表达的变化,以及阻断CD40-CD40配体相互作用对上述效应的影响。结果活化血小板与脐静脉内皮细胞共育8 h后,内皮细胞组织因子mRNA及蛋白表达显著增高,而应用抗CD40配体的抗体和抗CD40抗体可分别抑制其表达(P<0.05)。但是组织因子抑制物mRNA无明显变化。结论活化血小板可通过其表达的CD40配体分子诱导内皮细胞产生组织因子,但并不能增强内皮细胞组织因子抑制物的表达,此效应对不稳定性斑块的形成可能具有促进作用。     

悬浮细胞电转染条件的优化及影响因素

目的 以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,优化悬浮培养的白血病细胞的电穿孔转染条件.方法 通过控制电压(200～400 V)、电容(450～1200μF)、细胞状态及缓冲液血清浓度(0%、10%、15%)等转染条件,采用不同条件组合后用电穿孔法将质粒转入悬浮培养的人白血病细胞株K562,通过流式细胞仪和荧光显微镜分析转染率.结果 K562细胞在310 V、1050μF条件下转染率最高,pEGFP-C2/K562为67.04%,pEGFP-C2/BRD7/K562为59.29%.对数生长期细胞电转染率高于生长过老期细胞;而缓冲液中的血清浓度与电转染率无关.结论 电穿孔是一种高效的基因转染法,通过优化转染条件、控制影响因素,可提高转染率.     

以特殊症状为首发表现的白血病临床分析

目的 讨论以髓外浸润为首发表现的白血病的临床特点,提高对这一类白血病的认识.方法 分析3例以髓外浸润为首发表现的白血病患者的临床表现、实验室及影像学检查,并进行文献复习.结果 3例白血病患者在确诊前均分别出现不同的髓外浸润症状:头痛、呕吐及颅骨破坏表现;会阴部感觉障碍,小便失禁;肢体麻木、疼痛.3例患者均经骨髓细胞形态学检查确诊为白血病,经抗白血病治疗,上述浸润症状得到明显改善.结论 以颅骨破坏、颅高压、脊髓压迫症等为首发表现的白血病罕见,易给早期诊断带来困难,需提高对这一类白血病的警惕.     

整合素αⅡbβ3缺陷对血小板由内到外信号传导的影响

目的：探讨整合素αⅡbβ3缺陷对血小板由内到外信号传导的影响。方法：采用DNA序列分析、流式细胞术、RT－PCR和Western blotting等检测细胞中转染cDNA的存在、表达及细胞结合PAC－1、纤维蛋白原（fibrinogen,Fb)的能力。结果：血小板无力症（GT）患者整合素αⅡbβ3明显低下，且血小板在ADP激活后不能结合PAC－1，转染β3和αⅡb（突变αⅡb^R995A或正常αⅡb）cDNA的CHO细胞株分别表达αⅡb^R995Aβ3和αⅡbβ3，并且突变株中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary,CHO)细胞αⅡb基因30外显子上第3077和3078位碱基由CG突变为GC，导致第995位精氨酸被替换为丙氨酸；在未活化的情况下，αⅡbβ3 CHO细胞几乎不结合PAC－1，但能结合Fb，而αⅡb^R995Aβ3 CHO细胞能结合PAC－1，且Fb明显增加。结论：αⅡb^R995A突变能诱导血小板内到外信号传导，使αⅡb^R995Aβ3表现为激活型受体；而GT患者却因整合素αⅡbβ3缺陷使αⅡbβ3介导的血小板由内到外信号传导受阻，使该GT患者表现出血小板聚集异常。     

脑梗死患者组织因子途径抑制物C-399T多态性

组织因子途径抑制物（TFPI）是外源性凝血途径起始步骤的生理性抗凝物质，在调节血栓形成、抑制溶栓后血管再闭塞等方面具有重要作用。近年研究表明TFPIC-399T基因多态性与静脉血栓形成无关，但与动脉血栓性疾病的关系仍有争论，且不同人种TFPIC-399T的分布频率不同。为了研究TFPIC-399T多态性在中国人群中的分布频率及其与脑梗死（Cerebral Infarction，CI）之间的可能联系，我们分析了部分CI患者及正常人的TFPIC-399T等位基因的变异情况及血浆总TFPI抗原浓度，现报道如下。     

脐血CD34+细胞体外培养生成成熟巨核细胞并产出血小板的研究

目的：诱导脐血造血细胞在体外分化为成熟的巨核细胞并产出血小板，以探讨血小板的生成及释放机制。方法：通过采用优化的培养体系对免疫磁珠分选后得到的脐血CD34^＋细胞分别进行向巨核系分化的液体培养和集落培养，将培养的细胞和分离的上清液中的血小板样颗粒进行流式细胞术、免疫组织化学染色、光镜、电镜及血小板聚集实验的检测。结果：培养的巨核细胞有前血小板伸出，培养的巨核细胞和血小板样颗粒与正常的巨核细胞和血小板结构一致。免疫组织化学染色检测显示培养的细胞表达血小板特异性抗原GPⅡbⅢa的阳性率为95％以上，且为强阳性。培养的血小板大小颗粒与正常血小板均能对凝血酶产生聚集反应。流式细胞仪检测显示培养的血小板与正常血小板均具有同样的CD41高表达率。结论：脐血造血细胞能在体外诱导生成高纯度且成熟的巨核细胞并产出血小板．为血小板生成机制研究提供一个良好的技术平台。     

川芎嗪和顺铂联用对小鼠Lewis肺癌生长和转移的抑制作用

目的探讨川芎嗪联合顺铂对小鼠Lewis肺癌生长和转移的抑制作用及其机制。方法将40只接种Lewis肺癌的C57BL小鼠随机分成4组：对照组、顺铂组、川芎嗪组及联合用药组，每组10只，连续用药20天，于接种后第22天处死全部小鼠，剥离皮下肿瘤称瘤重并计算抑瘤率，取出双肺观察表面肿瘤转移情况，计算肿瘤肺转移发生率、肺表面转移结节数及肺表面结节转移抑制率，采用免疫组化检测肿瘤组织微血管密度（MVD）及P-选择素的表达水平。结果各用药组肿瘤的生长明显受到抑制，瘤重明显低于对照组（P〈0．01），联合用药组抑瘤率明显高于顺铂组和川芎嗪组（P〈0．05），各用药组肺表面转移结节数及转移发生率明显低于对照组（P〈0．05或0．01）；联合用药组肺表面结节转移抑制率明显高于顺铂组和川芎嗪组（P〈0．05）。川芎嗪组、联合用药组MVD及P-选择素表达水平显著低于对照组（P〈0．01）。结论川芎嗪可明显抑制Lewis肺癌细胞在小鼠体内的生长和转移，与顺铂联用有协同作用，其作用机制可能与抑制微血管生成和降低P-选择素表达有关。     

农村留守老人：幸福在何方？

一个个年轻人背井离乡,到陌生的城市“寻梦”;他们身后留下了一个个孤独的身影在村口守望。这些孤独身影,就是他们留守家园年迈体弱的双亲。留守老人们在农村是怎么生活的呢？谁来关怀、呵护这些老人？     

组织因子途径抑制物与缺血性脑血管病

凝血系统在缺血性脑血管病的发生发展过程中发挥着重要作用?组织因子途径抑制物作为一种生理性抗凝物质，即外源性凝血途径起始步骤的生理性抑制物，与缺血性脑血管病的关系密切。文章重点介绍了组织因子途径抑制物在缺血性脑血管病中的变化、作用机制及其临床治疗前景。