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1.
目的 研究不同部位木瓜提取物在细胞水平上的抗炎作用及机制.方法 依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取已用65%乙醇抽提的木瓜粉末,得到乙酸乙酯、正丁醇及水溶性部位提取物;建立THP-1及L929细胞炎症模型,用MTr法检测3个部位提取物的抗炎活性.利用核转录因子(NF-κB)报告基因系统检测NF-κB的活性,并用半定量PCR检测药物处理后细胞内炎症反应相关基因的表达.结果 与对照组比较,用乙酸乙酯部位处理后的THP-1细胞内Toll样受体及其下游炎症因子的表达水平明显下降,且用该组上清液处理后的L929细胞的活细胞数明显高于其他组.结论 木瓜的乙酸乙酯部位提取物具较好的抗炎效果. 相似文献
2.
Objective To investigate the effect of protease-activated receptor2 (PAR-2) on rat apoptotic cardiomyocytes underwent iachemia reperfusion (I/R) injury. Methods Healthy male Sprague-Dawley rats were randomly divided into five groups (n = 8 each): sham-operation group, I/R (ligating the left coronary artery for 30 minutes and followed by 120 minutes reperfusion) group and three SLIGRL-NH2 groups treated with intravenous PAR-2 agonist SLIGRL-NH2 at different doses (0.5,1,3 mg/kg) 5 minutes before reperfusion. Apoptic cardiomyocytes was detected by TUNEL staining and by DNA ladder on agarose gel electrophoresis. Bax and Bcl-2 expression in myocardium was analyzed by immunohistochemical technique. The mRNA expression of PAR-2 was determined by Real-time quantitative polymerase chain reaction(RT-PCR). Results (1) The apoptosis index and the expression of Bcl-2 and Bax were significantly increased in IR group and SLIGRL-NH2 groups than those in sham group (P<0. 05~0.01). (2) Compared with I/R group, the apoptosis index and the expression of Bax were significantly reduced while the expression of Bcl-2 and PAR-2 mRNA were significantly upregnlated by SLIGRL-NH2 in a dose-dependent manner. (3) DNA Agarose gel electrophoresis demonstrated that DNA ladder existed in I/R and 0.5 mg/kg SLIGRL-NH2 group, but not in 1,3 mg/kg SLIGRL-NH2 groups. Conclusions PAR-2 agonist SLIGRL-NH2 could reduce myocardial apoptosis by upregulating the Bcl-2 and PAR-2 mRNA level and downregnlating Bax expression in a dose-dependent manner in this rat I/R model. 相似文献
3.
目的:观察米托蒽醌(Mitoxantrone,MXT)联合顺铂(Cisplatin,CDDP)对脑胶质瘤U87细胞杀伤活性及对Sonic Hedgehog信号通路的影响。方法:应用MTT法检测不同浓度米托蒽醌、顺铂以及两药物联合对U87细胞成活率的影响。显微镜观察细胞的形态变化DiOC6荧光染料对细胞线粒体染色检测其膜电位变化来反映细胞凋亡。RT-PCR法检测顺铂、米托蒽醌及两药联合对U87细胞Gli1和Ptch基因表达的影响。结果:MTT结果显示顺铂、米托蒽醌均可以有效抑制U87细胞的增殖,当米托蒽醌和顺铂浓度≤0.625μg/ml时,两药联合对U87细胞增殖具有协同抑制作用;细胞形态变化及线粒体膜电位结果显示,单药处理可促进U87细胞凋亡,而联合用药可以协同促进U87细胞的凋亡;RT-PCR法检测显示顺铂对Gli1基因的表达有上调作用,而米托蒽醌、米托蒽醌联合顺铂能下调Ptch和Gli1基因的表达。结论:胶质瘤U87细胞在化疗药物米托蒽醌以及两药物联合作用下可影响Sonic Hedgehog信号通路,协同发挥其促凋亡作用,进而增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。 相似文献
4.
目的:对天花粉蛋白(TCS)的第120-123位氨基酸进行缺失突变,并在原核系统中对其进行表达和纯化。方法:利用重叠延伸PCR的方法得到TCS突变体cDNA,并克隆入原核表达载体pET-28(a+)。酶切和测序鉴定后,将突变体质粒pET-28(a+)-mTCS转化BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导表达后,对表达产物用Ni2+-NTA亲和层析柱进行纯化和Western-blot鉴定。结果:利用重叠延伸PCR成功获得突变天花粉蛋白的编码序列,并构建pET-28(a+)-mTCS原核表达质粒。在BL21(DE3)菌中,突变体蛋白(mTCS)可被IPTG诱导性表达,并被Ni2+-NTA树脂有效纯化。结论:本实验成功获得一种突变体TCS,并建立该突变TCS的原核表达和纯化的实验方法。 相似文献
5.
7.
8.
目的:研究湖北长阳县皱皮木瓜的发酵工艺,以抗氧化活性作为活性评价标准优化发酵参数。方法:通过比色法建立双氧水诱导红细胞溶解的氧化损伤模型。应用单因素实验测定不同条件对木瓜发酵的抗氧化活性影响。结果:通过调整实验条件建立了稳定的H2O2诱导红细胞溶解的氧化模型。通过木瓜发酵提取液体外抗氧化活性试验,建立最佳发酵模型,得到了木瓜发酵影响因素的最佳条件:糖浓度2.0g/100ml、发酵温度37.0℃、发酵时间2天、发酵初始pH 4.0。结论:应用体外抗氧化活性模型,获得具有较好的抗氧化生物学活性的木瓜发酵条件。 相似文献
9.
Th17细胞和调节性T细胞(Treg)是具有相反作用的T细胞亚群,它们的平衡有利于维持机体稳定的免疫状态,在炎症性疾病中发挥重要作用。在炎性条件下,Treg可以转换成Th17细胞,Th17细胞数量增多,Treg数量显著减少或其抑制功能降低,致使Th17细胞/Treg的失衡,从而导致炎症性疾病的发生和发展。Th17细胞/Treg的平衡紊乱已经成为炎症性疾病研究领域中的新热点。本文对Th17细胞和Treg的基本功能作用、两者之间的平衡关系及其机制以及Th17细胞/Treg与炎症性疾病的关系进行了综述,为炎症性疾病的早期诊断、预后及免疫治疗提供新的思路。 相似文献
10.
为了探讨人巨细胞病毒(humancytomegalovirus,HCMV)与宫颈癌发生之间的关系,我们利用紫外线灭活的HCMV诱发小鼠宫颈癌的动物模型进行了研究.经UV-灭活的HCMV液接种于小鼠宫颈部,3次/周×8周,并设HEL培养液对照组.5个月后,HCMV组宫颈癌前病变率达27.7%(23/83),癌发率20.5%(17/83);对照组仅1例发生宫颈内皮瘤(CIN,I),癌发率为0(0/31).此结果提示:紫外线灭活的HCMV具有在体内转化宫颈上皮细胞,从而诱发宫颈癌发生的能力,因而也讨论了HCMV致癌的可能机制. 相似文献