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1.
2.
目的在真核细胞中表达人Wnt7b基因并且观察对大鼠原代软骨细胞的退变作用。方法取出生24 h SD大鼠关节处软
骨,Ⅱ型胶原酶多次消化后获得原代软骨细胞,取P1 代细胞进行实验。扩增人Wnt7b 基因及克隆至PCDH-GFP 上,转染
PCDH-GFP和PCDH-Wnt7b 至293ft 细胞中,48 h 后收集细胞上清及转染细胞,Western blot 鉴定Wnt7b 在293ft 细胞中的表
达。收集的上清分别稀释10倍和50倍培养大鼠软骨细胞,24 h后观察细胞形态并收集细胞蛋白和抽提RNA,Western blot和定
量PCR检测软骨退变指标MMP13、MMP3、Ⅱ型胶原、A-can、ADAMTS5、ColⅩ和SOX9的表达。结果成功克隆人Wnt7b基
因至PCDH-GFP载体上且在293ft细胞中得到有效表达。含Wnt7b培养基干预软骨细胞24 h后,软骨细胞形态由原来的多角形
变成长梭形,Wnt7b处理组软骨细胞MMP13和MMP3表达显著上调,Ⅱ型胶原的表达下调。PCR结果表明A-can和Sox9表达
下降,ColⅩ和ADAMTS5表达增强。结论有效在真核细胞中表达Wnt7b基因并且促进大鼠软骨细胞退变,建立软骨细胞退变
的体外模型。
相似文献
骨,Ⅱ型胶原酶多次消化后获得原代软骨细胞,取P1 代细胞进行实验。扩增人Wnt7b 基因及克隆至PCDH-GFP 上,转染
PCDH-GFP和PCDH-Wnt7b 至293ft 细胞中,48 h 后收集细胞上清及转染细胞,Western blot 鉴定Wnt7b 在293ft 细胞中的表
达。收集的上清分别稀释10倍和50倍培养大鼠软骨细胞,24 h后观察细胞形态并收集细胞蛋白和抽提RNA,Western blot和定
量PCR检测软骨退变指标MMP13、MMP3、Ⅱ型胶原、A-can、ADAMTS5、ColⅩ和SOX9的表达。结果成功克隆人Wnt7b基
因至PCDH-GFP载体上且在293ft细胞中得到有效表达。含Wnt7b培养基干预软骨细胞24 h后,软骨细胞形态由原来的多角形
变成长梭形,Wnt7b处理组软骨细胞MMP13和MMP3表达显著上调,Ⅱ型胶原的表达下调。PCR结果表明A-can和Sox9表达
下降,ColⅩ和ADAMTS5表达增强。结论有效在真核细胞中表达Wnt7b基因并且促进大鼠软骨细胞退变,建立软骨细胞退变
的体外模型。
相似文献
3.
目的:观察反式维甲酸(TRA)对体外培养大鼠软骨细胞的生长增殖、形态和软骨退变相关基因表达的影响。方法:取出生24hSD大鼠关节处软骨,Ⅱ型胶原酶多次消化后获得原代软骨细胞,取P1代细胞进行实验。对照组软骨细胞于体积分数为10%的胎牛血清(FBS)的高糖DMEM培养基中进行培养,而TRA组是在对照组培养基的基础上加入10μmolTRA进行培养。培养24h后,观察细胞形态变化,MTT法检测两组细胞的增殖情况,Western Blot检测Ⅱ型胶原和MMP13的表达,DMMB法测定细胞中GAG的含量,定量PCR检测ADAMTS5,MMP9,A-can,Sox9,COLX和ALP的表达。结果:TRA组的软骨形态由原来的多角形变成长梭形,且TRA组抑制软骨细胞的增殖,同时下调基质蛋白Ⅱ型胶原,A-can,GAG含量及转录因子Sox9表达,上调MMP13,MMP9,ADAMTS5,COLX及ALP的表达。结论:TRA具有促进软骨退变的作用,可用于建立体外软骨退变模型。 相似文献
4.
目的:疼痛是人类的第五大生命体征,膝痛是膝骨关节炎患者到医院就诊的主要原因和主诉。而对于膝痛的直接描述尚不完善,本研究提出了一种新方法 CKPM(Chinese Knee Pain Map),以期能够更直接有效的描述膝痛。方法:通过对300例患膝的研究,观察KPM疼痛类型和经筋病证类型的特点,并结合X线K-L分级、MRI半定量评估(WORMS法)以及WOMAC的临床症情描述法分析两者与这些指标间的相关性以及两者间的相关性,验证CKPM的有效性和可靠性的同时提出常见的KPM疼痛以及经筋分布类型。结果:膝痛KPM疼痛类型出现频率依次为混合性疼痛,占38.44%;复合性疼痛,占34.01%;单关节痛,占27.55%.经筋病证类型依次为两经筋病变124例,占42.18%、多经筋病变110例,占37.41%和单经筋病变60例,占20.41%、KPM疼痛类型与经筋病证类型呈一致性,与KL分级、MRI半定量评估(WORMS法)以及WOMAC临床症情改变情况呈正相关。结论:在膝骨关节炎中CKPM疼痛类型较复杂的或者说疼痛范围较大的其临床表现(包括临床症状和影像学表现)相对较重。CKPM可以作为膝骨关节炎诊疗评估的有效的、可靠的一种手段。 相似文献
5.
正关节炎是导致数百万人致残的主要原因之一,临床中常见的主要有退行性关节炎,如骨关节炎(Osteoarthritis,OA),以及不同形式的慢性炎症性关节炎,如类风湿性关节炎(RA)等~([1])。OA是一种常见的好发于中老年的慢性、进行性关节病~([2,3])。OA的发病因素尚未完全清楚,目前研究显示主要与劳损、体质量(BMI)、创伤等诸多因素相关~([4])。而慢性炎症性关节 相似文献
6.
兔骨关节炎关节软骨含水率随时间变化的实验研究 总被引:2,自引:0,他引:2
骨关节炎 (osteoarthritis,OA)的主要病理改变在关节软骨 ,关节软骨中水占湿重的 80 % ,在关节软骨的生化组成中所占比例最大 ,水与蛋白多糖及胶原相结合共同提供了软骨细胞生物学功能的内环境。在OA时 ,关节软骨内的各个生化组成部分都在发生“退变” ,本实验观察了兔骨关节炎不同时间点内关节软骨的含水率 ,旨在研究伴随软骨退变程度的加重 ,关节软骨含水率的动态变化情况。1 材料与方法1 1 实验动物48只新西兰大白兔 ,6个月龄 ,雌性 ,体重 (2 5 0± 0 10 )kg ,由上海中医药大学实验动物中心提供。随机分为模型组… 相似文献
7.
金利胶囊对膝骨关节炎兔骨骼肌收缩蛋白基因与软骨基质蛋白多糖表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]通过观察免膝骨关节炎(KOA)骨骼肌蛋白与软骨基质蛋白多糖(PGs)表达,探讨柔肝中药金利胶囊治疗KOA的作用及机理.[方法]42只新西兰大白兔分为空白对照组(K组),模型对照组(MD组),金利干预组(R组);MD组与R组动物以改良Hulth法造模,R组造模并给药;取膝关节行番红/固绿染色、Mankin评分;RT-PCR检测肌肉α-肌动蛋白(a-actin)、重链肌球蛋白亚型(MHC Ⅰ,MHCⅡa,MHCⅡd/x,MHCⅡb)、Aggrecan与ADAMTS5 mRNA表达,检测关节软骨糖胺聚糖(GAG)水平.[结果]与模型组比较,R组Mankin评分降低,α-actin与多种MHC亚型mRNA表达水平上调(P<0.05);Aggrecan mRNA呈高表达,ADAMTS5 mRNA低表达(P<0.05).[结论]金利胶囊能够延缓OA软骨退变,促进骨骼肌收缩蛋白基因表达,改善软骨基质蛋白多糖代谢. 相似文献
8.
浅谈“以气为主、以血为先”在伤科临床中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
上海石氏伤科肇始于清末石兰亭先生,19世纪70年代由江苏无锡迁至上海;其子晓山先生以理伤续断声誉日盛,至筱山、幼山先生昆仲则名震沪上,誉及江南。石氏伤科传人石印玉教授执诊于上海中医药大学附属曙光医院,带领学术团队,全面继承石氏伤科经验,并结合当代中医骨伤科学之特点,形成了系列石氏伤科学术理论。石氏伤科精于内治,“以气为主、以血为先”是石氏伤科重要的学术思想,学者同道也对此多有阐发。笔者有幸跟师学习,感悟良多,此结合l临床体会,对“以气为主、以血为先”的具体运用作一浅谈。 相似文献
9.
目的:探讨膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)风寒湿痹证素评分与膝骨关节炎病情严重程度的关系。方法:从课题组前期风寒湿痹证队列研究中筛选患者,从病例资料中提取患者的性别、年龄、体质量指数、中医证候、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(Western Ontario and McMaster Universities osteoarthritis index, WOMAC)评分和膝骨关节炎全器官磁共振成像评分(whole-organ magnetic resonance imaging score, WORMS)。拟定包含25个证候条目的KOA风寒湿痹证素评分量表,并对入选患者进行证素评分。分析KOA风寒湿痹证素评分与WOMAC评分、WORMS的关系。结果:(1)一般情况。共纳入102例KOA患者,男22例、女80例;年龄47~73岁,中位数61岁;体质量指数17.87~31.14 kg·m-2,中位数23.43 kg·m-2;KOA风寒湿痹证素评分0~21分,中位数7分;WOMAC评分0~159.4分,中位数39.... 相似文献
10.
目的观察养血软坚胶囊治疗膝骨关节炎的有效性与安全性。方法采用随机、双盲、安慰剂对照的研究设计,将84例膝骨关节炎患者随机分为治疗组和对照组,每组42例。对照组予养血软坚胶囊模拟剂口服,治疗组予养血软坚胶囊口服。两组疗程均为4周,分别于治疗前、治疗2周、治疗4周时观察中医证候积分、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(Western Ontario and McMaster Osteoarthritis Index,WOMAC)总积分及其疼痛子积分、僵硬子积分、关节功能子积分的变化情况,同时评价安全性。结果①84例病例均完成了2周节点的访视;治疗4周时,治疗组脱落6例(失访),对照组脱落7例(失访)。②治疗前与治疗2周组内比较,两组WOMAC总积分、疼痛子积分、僵硬子积分、关节功能子积分差异无统计学意义(P0.05)。治疗前与治疗4周组内比较,治疗组WOMAC总积分、疼痛子积分、僵硬子积分、关节功能子积分减少(P0.05),对照组WOMAC总积分、疼痛子积分、关节功能子积分减少(P0.05)。③组间治疗2周与治疗4周、治疗前与治疗4周差值比较,治疗组WOMAC总积分、疼痛子积分、僵硬子积分、关节功能子积分差值大于对照组(P0.05)。④治疗前与治疗2周、治疗4周组内比较,两组中医证候积分均较治疗前减少(P0.05)。组间中医证候积分各时间点差值比较,差异无统计学意义(P0.05)。⑤治疗前后,两组血常规、尿常规、肝肾功能指标无异常,均未见不良反应发生。结论养血软坚胶囊能有效缓解膝骨关节炎患者的关节疼痛、僵硬、功能障碍等症状,且安全性高,该制剂具有进一步研发的价值。 相似文献