2665例急性上呼吸道感染患儿的病原学及临床特征

目的 分析急性上呼吸道感染儿童患者的病原学及临床特征。方法 以南方医科大学珠江医院2009年11月至2015年9月收治的2 665例急性上呼吸道感染儿童为研究对象,采用qRT-PCR方法检测临床上常见的8种呼吸道病毒(流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、腺病毒、人类博卡病毒、人类冠状病毒、人类偏肺病毒、鼻病毒)。结果 共检测患儿标本2 665份,其中阳性标本1 566份,总阳性率为58.8%。四个季节中8种呼吸道病毒检出率存在明显差异,并以春季最高,夏冬季次之,秋季最低。儿童呼吸道病毒感染率随着年龄增加而逐渐降低,并以0~1岁婴幼儿病毒检出率最高64.5%。男童呼吸道病毒感染率高于女童,住院患儿呼吸道病毒检出率高于门诊患儿。混合感染标本260份,占阳性标本数的16.6%,主要集中于0~3岁儿童患者标本中,并因季节而异,秋冬季节较少,而春夏季节较为普遍。咳嗽为呼吸道病毒感染的主要临床症状,咳痰和流涕次之,临床症状在8种呼吸道病毒感染患儿中存在差异。结论 本调查分析了急性上呼吸道感染患儿中8种常见呼吸道病毒的病原学及临床特征,为指导临床治疗及防控提供相关数据。     

建立检测18种（型/亚型）呼吸道病毒的两种循环参数的实时荧光定量PCR

目的建立两种不同循环参数的实时荧光定量PCR,检测包括流感病毒、冠状病毒等18种(型/亚型)呼吸道病毒。方法引用文献报道的18种(型/亚型)呼吸道病毒引物和探针,建立两种不同循环参数的实时荧光定量PCR法,考核方法的敏感性、特异性和准确性,并用临床标本进行验证。结果成功建立了可检测18种(型/亚型)呼吸道病毒的两种不同循环参数的实时荧光定量PCR法;该法特异性较好,最低检测限为10拷贝数/μL,变异系数(CV)为1.26%~3.43%,重复性良好;408份临床标本中,用该法检测鼻拭子标本阳性率为63.2%(225/356),肺泡灌洗液标本阳性率为25.0%(13/52)。结论建立的实时荧光定量PCR法简便、特异、敏感、稳定,适用于临床常见呼吸道病毒感染的早期诊断。     

2009-2016年广州市呼吸道合胞病毒感染的流行特征及临床特点分析北大核心CSCD

目的分析急性上呼吸道感染患者中呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的流行特征及临床特点。方法以南方医科大学珠江医院2009年11月至2016年6月收治的具有发热呼吸道症状患者为研究对象,采集鼻拭子标本3446份,提取标本RNA,采用qRT-PCR方法进行RSV检测,并对RSV阳性标本进行临床上常见的7种(14个亚型)呼吸道病毒的检测,以了解混合感染情况。结果共检测患者标本3446份,其中RSV阳性标本672份,总阳性率为19.5%。4个季节中RSV检出率差异具有统计学意义(χ2=133.184,P<0.001),并以春节最高,冬季次之,夏秋两季最少。RSV感染患者随着年龄的增长检出率逐渐降低,并以3岁及以下儿童检出率最高,占RSV阳性标本数的90.8%(610/672),儿童患者检出率明显高于成年患者(χ2=266.433,P<0.001),男性患者检出率明显高于女性患者(χ2=4.940,P=0.026),住院患者检出率明显高于门诊患者(χ2=60.433,P<0.001)。混合感染标本160份,其中双病毒感染标本143份,3种病毒混合感染16份,4种病毒混合感染1份,并以鼻病毒和呼吸道合胞病毒混合感染率最高,住院患者混合感染率高于门诊患者(χ2=20.896,P<0.001)。与非RSV感染者相比,RSV感染者咳嗽、咳痰、气促/呼吸困难等临床症状发生率均较高(χ2_(咳嗽)=108.934,χ2_(咳痰)=60.626,χ2_(气促/呼吸困难)=38.139,均P<0.001),而咽喉痛、头痛、乏力、寒战/畏寒和肌肉酸痛等发生率相对较低(χ2_(咽喉痛)=46.499,χ2_(头痛)=29.516,χ2_(乏力)=16.972,χ2_(寒战/畏寒)=9.616,χ2_(肌肉酸痛)=8.801,均P<0.001)。此外,RSV感染组与非RSV感染组在临床诊断上也存在统计学差异(χ2=212.157,P<0.001)。结论RSV是引起3岁以下儿童呼吸道病毒感染的主要病原体,也是引起3岁以下儿童呼吸道病毒感染住院的主要原因,咳嗽、咳痰及气促/呼吸困难的发生率较高,临床上应加强对该年龄段儿童的防护。     

双抗原夹心ELISA法检测登革病毒感染患者血清中的EDⅢ抗体

目的 建立一种检测登革病毒(dengue virus, DENV)特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法?方法 利用毕赤酵母系统表达4个血清型登革病毒包膜蛋白Ⅲ区(envelope protein domain Ⅲ, EDⅢ),并采用改良过碘酸钠法对EDⅢ蛋白标记辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP),建立一种可同时检测4个血清型登革病毒EDⅢ蛋白特异性抗体的双抗原夹心ELISA法?并对2014年广州珠江医院门诊和住院确诊的登革热患者血清标本进行检测,并与澳洲Panbio MAC ELISA检测的敏感性进行比较?结果 本研究成功建立了一种检测4个血清型登革病毒EDⅢ蛋白特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,该方法能同时检测到4个血清型登革病毒EDⅢ蛋白免疫的小鼠血清和Ⅰ型登革病毒EDⅢ蛋白免疫的兔血清,而与烟曲霉AF-MP蛋白免疫的小鼠血清和兔血清均无交叉反应?对184份健康人血清标本检测全为阴性,而对168份确诊为登革病毒感染患者血清标本检测结果表明,两种诊断方法检测结果差异无统计学意义,P<0.001(57.1% vs 57.7%),联合NS1抗原检测方法,其敏感性提高到97.6%?结论 双抗原夹心ELISA法检测登革病毒EDⅢ特异性抗体具有高度的特异性,但如果能同时联合抗原检测可明显提高登革热的早期诊断率?