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建立检测18种(型/亚型)呼吸道病毒的两种循环参数的实时荧光定量PCR
引用本文:陈钰静,丁细霞,郭勇晖,余楠,潘玉先,余志武,陈满君,王压娣,杜晓棠,车小燕.建立检测18种(型/亚型)呼吸道病毒的两种循环参数的实时荧光定量PCR[J].临床检验杂志,2014(5):340-344.
作者姓名:陈钰静  丁细霞  郭勇晖  余楠  潘玉先  余志武  陈满君  王压娣  杜晓棠  车小燕
作者单位:南方医科大学珠江医院检验医学部,广州510282;南方医科大学珠江医院检验医学部,广州510282;南方医科大学珠江医院检验医学部,广州510282;南方医科大学珠江医院检验医学部,广州510282;南方医科大学珠江医院检验医学部,广州510282;南方医科大学珠江医院检验医学部,广州510282;南方医科大学珠江医院检验医学部,广州510282;南方医科大学珠江医院检验医学部,广州510282;南方医科大学珠江医院检验医学部,广州510282;南方医科大学珠江医院检验医学部,广州510282
基金项目:国家重大科技专项(2012ZX10004-213,2013ZX10004805-004);广东省高等学校珠江学者岗位计划(2009GDUPS);广东省普通高校工程技术研究(开发)中心立项建设项目(GCZX-A1106)。
摘    要:目的建立两种不同循环参数的实时荧光定量PCR,检测包括流感病毒、冠状病毒等18种(型/亚型)呼吸道病毒。方法引用文献报道的18种(型/亚型)呼吸道病毒引物和探针,建立两种不同循环参数的实时荧光定量PCR法,考核方法的敏感性、特异性和准确性,并用临床标本进行验证。结果成功建立了可检测18种(型/亚型)呼吸道病毒的两种不同循环参数的实时荧光定量PCR法;该法特异性较好,最低检测限为10拷贝数/μL,变异系数(CV)为1.26%~3.43%,重复性良好;408份临床标本中,用该法检测鼻拭子标本阳性率为63.2%(225/356),肺泡灌洗液标本阳性率为25.0%(13/52)。结论建立的实时荧光定量PCR法简便、特异、敏感、稳定,适用于临床常见呼吸道病毒感染的早期诊断。

关 键 词:呼吸道病毒  实时荧光定量聚合酶链反应  特异性  敏感性
收稿时间:2013/11/29 0:00:00
修稿时间:2014/3/26 0:00:00

Development of two panels of real-time PCR assay with different cycling parameters for detection of 18 type/subtypes of respiratory viruses
Abstract:
Keywords:
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