抗河流弧菌单克隆抗体的建立及初步鉴定

目的 制备高效、特异的抗河流弧菌单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),为海洋致病细菌的快速免疫诊断提供技术支持.方法 选用雌性BALB/c小鼠(8周龄)制备成为灭活河流弧菌免疫小鼠,利用杂交瘤细胞融合技术,制备出抗河流弧菌杂交瘤细胞株,用Giemsa染色对其进行染色体鉴定,并用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法筛选其与河流弧菌及其他重要海洋细菌的交叉反应特异性.结果 共获得4株抗河流弧菌mAb,均符合杂交瘤细胞染色体特点,具有良好的特异性和免疫反应性,分别命名为01H10,02F12,05F3和03G10.结论 本研究制备、筛选出抗河流弧菌的mAb,有助于建立抗河流弧菌快速免疫检测试剂盒.     

179例血液病患者EBV和HCMV核酸检测阳性率与患者年龄的关系

目的了解再生障碍性贫血、急性淋巴细胞白血病及髓系白血病患者EB病毒(EBV)和人巨细胞病毒(HCMV)核酸检测阳性率与其年龄的关系。方法收集中国人民解放军海军总医院2012年1月至2013年12月骨髓穿刺后临床确诊为再生障碍性贫血、急性淋巴细胞白血病及髓系白血病患者为研究对象,采用达安基因核酸检测试剂盒对EBV和HCMV核酸进行检测,分析EBV和HCMV感染阳性率与患者年龄的关系。结果 EBV和HCMV在3种血液病中核酸检测阳性率不同,HCMV核酸检测阳性检出率(15.8%)低于EBV(43.7%)。再生障碍性贫血和髓系白血病患者中,不同年龄患者EBV核酸检测阳性率比较差异有统计学意义(P0.01)。结论对于儿童再生障碍性贫血病和髓系白血病患者应更加重视EBV和HCMV核酸的监测。     

靶向脐带间充质干细胞的构建及其在小鼠脾脏内的定位

目的 构建含小分子肽P1-GFP融合基因慢病毒载体, 用携带P1-GFP融合基因的慢病毒感染MSC, 使MSC具有靶向性, 将靶向MSC注入小鼠体内后观察MSC在小鼠脾脏的定位及与淋巴细胞的关系。方法 用组织片贴壁法培养健康人脐带间充质干细胞, 用基因工程技术构建含小分子肽P1-GFP融合基因慢病毒载体并感染人脐带间充质干细胞, 通过尾静脉将转入P1-GFP融合基因的MSC注入小鼠体内, 18 h后免疫组化染色观察GFP在小鼠脾脏的定位。 结果 培养的健康人脐带间充质干细胞生长良好, MSC感染含P1-GFP融合基因的慢病毒18 h后MSC开始出现绿色荧光, 随着培养时间的延长, 荧光强度逐渐增强, 72 h达高峰。靶向MSC表达髓系干细胞的表面标记 CD105(90.0%)/CD44(98%),CD73(85.0%)/CD90(98.5%)。将靶向MSC经尾静脉注入小鼠体内, 18 h后小鼠脾脏出现大量GFP阳性细胞, 并与脾脏淋巴细胞密切接触。结论 本研究成功构建了含P1-GFP融合基因的靶向MSC, 靶向MSC成功定向脾脏, 并与脾脏淋巴细胞密切接触, 可用于后续的实验研究。     

血浆1-3-β-D葡聚糖检测深部真菌感染的应用研究

目的探讨血浆1-3-β-D葡聚糖水平检测与传统真菌培养方法的一致性,为深部真菌感染的临床诊断寻找快速、准确的方法。方法对212例临床疑似深部真菌感染病例采集静脉血标本,用MB-80微生物动态快速检测系统测定血浆1-3-β-D葡聚糖,同时行痰液真菌培养和真菌涂片染色,比较血浆1-3-β-D葡聚糖水平检测与传统真菌培养方法的一致性。结果本组88例血浆1-3-β-D葡聚糖阳性,24例可疑阳性,阳性率52.8%。84例痰液真菌培养阳性,阳性率39.6%,其中78例(92.9%%)1-3-β-D葡聚糖阳性。46例真菌涂片染色阳性,阳性率21.7%,其中42例1-3-β-D葡聚糖阳性。若以真菌培养结果作为诊断标准,则1-3-β-D葡聚糖检测的灵敏度为95.3%,特异性为90.6%。结论血浆1-3-β-D葡聚糖水平检测比痰液真菌培养能更早、更灵敏地反映深部真菌感染,但具有一定的假阴性率,故应同时行真菌培养,以提高诊断准确性。     

综合医院感染金黄色葡萄球菌耐药性分析

目的调查医院住院患者感染金黄色葡萄球菌(SAU)的耐药现状,为临床医师合理使用抗菌药物提供依据。方法对医院感染性标本中培养分离的420株SAU临床资料进行回顾性调查分析,SAU鉴定严格按照《全国临床检验操作规程》进行;药物敏感性(药敏)试验采用K-B法,结果参照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)标准判定。结果 420株SAU检出标本以痰(64.2%)和血液(14.5%)为主;SAU感染主要分布在高压氧科、ICU、神经内科和神经外科等,MRSA检出率达75.0%;药敏试验结果显示,SAU对多种抗菌药物均不同程度耐药,仅对万古霉素和呋喃妥因敏感率为100.0%。对红霉素耐药而克林霉素敏感的59株SAU中44株(74.6%)为诱导型克林霉素耐药。结论 SAU感染率呈逐渐升高趋势,其中甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对大部分抗菌药物仍保持较好的敏感性,而MRSA表现为多药耐药性,应引起临床高度重视;检测克林霉素诱导型耐药具有重要的临床应用价值。     

多种指标联合检测非小细胞肺癌的诊断价值

目的：探讨血清中神经元特异性烯醇化酶（NSE）、癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片断（CYFRA21‐1）、乳酸脱氢酶（LDH）检测在非小细胞肺癌临床诊断中的价值。方法选择病理确诊的非小细胞肺癌患者86例作为研究对象,选取50例非肿瘤肺部感染患者及60例体检健康者血清作对照,采用Beckman全自动免疫分析系统检测患者血清中CEA、CYFRA21‐1水平,Roche411检测患者血清中NSE水平,Beckman全自动生化仪（AU5821）检测LDH水平,分析NSE、CEA、CYFRA21‐1、LDH水平与非小细胞肺癌临床特征之间的关系。结果（1）非小细胞肺癌患者血清中NSE、CEA、CYFRA21‐1、LDH水平明显高于非肿瘤肺部感染患者及健康者;（2）非小细胞肺癌组中NSE在未分型患者中水平明显高于鳞状细胞癌和腺癌患者,CYFRA21‐1在鳞状细胞癌中水平较高,CEA、LDH的水平差异不明显;（3）NSE、CEA、CYFRA21‐1联合检测阳性率高于NSE单独检测的阳性率。结论血清NSE、CEA、CYFRA21‐1水平联合检测有利于提高非小细胞肺癌的诊断率。     

创伤弧菌实验室诊断的研究进展

创伤弧菌自然存在于近海和海湾的海水和海底沉积物中，属弧菌属，为低度嗜盐菌。流行病学和微生物学研究显示，海水温度超过20℃持续2周以上，海水可污染大量创伤弧菌。人通过进食生的牡蛎，经胃肠道黏膜或破损的皮肤接触海水而感染创伤弧菌。临床主要表现为原发性败血症、下肢创伤感染，出现大疱性皮肤损害、皮肤淤斑坏死、蜂窝组织炎等，同时伴高热、低血压、休克。病情进展迅速，最终发展为感染性休克、多器官衰竭甚至死亡，死亡率高达70％。     

关于转化医学的思考

回顾转化医学的产生和进展过程,分析当前国内大力推进转化医学的背景,对转化医学定义和模式进行阐述;并提出加强推进转化医学实践需要关注的要点和措施,提出检验医学是转化医学最活跃的领域,初步探讨医院与科研院校协作开展转化医学的策略。     

004 Th细胞的活化与树突状细胞

树突状细胞(dendritic，DC)是体内功能最强的专职抗原提呈细胞(APC)，具有很强的抗原呈递能力，并能有效激发T细胞应答。DC在免疫学及肿瘤学乃至其它各学科中的作用也日益受到重视。选择性激活Th1和Th2是许多免疫反应发生的关键，而Th的分化由DC所控制，本文就免疫应答中DC和T细胞相互作用方面的最新研究作一综述。     

蓖麻毒素快速ELISA检测法的建立

目的:建立蓖麻毒素快速ELISA检测方法。方法:从8株抗蓖麻毒素的杂交瘤细胞中,筛选亲和力较高的单克隆抗体,用Westernblot和ELISA鉴定、ProteinA纯化、HRP标记,经交叉配伍筛选最佳的抗体组合。结果:建立了蓖麻毒素的快速ELISA检测方法,对蓖麻毒素的最低检出浓度为175ng/L,目视检测最低浓度为625ng/L,整个实验不需仪器可在40min内完成检测。结论:蓖麻毒素快速ELISA检测法为蓖麻毒素生物战剂的快速侦检提供了有效手段。