2015－2020年北京市急性呼吸道感染病例副流感病毒流行特征研究

  目的  了解北京市急性呼吸道感染病例中人副流感病毒（HPIVs）感染状况及流行特征,为呼吸道传染病防控策略的制订提供支撑。  方法  收集2015 — 2020年就诊于北京市哨点医院的急性呼吸道感染病例,采集其咽拭子、痰液、肺泡灌洗液、气管抽吸物等病原学标本,采用多重实时荧光聚合酶链式反应检测HPIV-1、HPIV-2、HPIV-3、HPIV-4及其他常见呼吸道病毒,检测结果采用SPSS 20.0软件进行统计分析,计数资料组间率的比较采用χ2检验。  结果  2015 — 2020年北京市急性呼吸道感染病例的HPIVs总体阳性率为3.90%（1 622/41 557）,其中HPIV-3最多（58.45%）,其次为HPIV-1（19.17%）、HPIV-2（12.70%）和HPIV-4（10.79%）;2020年HPIVs阳性率（1.65%,70/4 234）下降明显。 HPIVs感染年度间呈现两年一个流行高峰的特点;HPIVs流行高峰在5 — 7月,HPIV-3流行趋势同HPIVs,HPIV-1夏秋季阳性率高于其他季节,HPIV-2无明显的季节性,HPIV-4秋季阳性率高于其他季节。 男性患者HPIVs阳性率低于女性。 0～5岁人群HPIVs阳性率最高（8.81%,685/7 776）,其次是6～15岁人群（4.07%,173/4 247）以及≥60岁人群（3.25%,442/13 582）。HPIV-1和HPIV-3阳性率在上、下呼吸道感染病例中存在差异（χ2=4.449,P=0.039;χ2=17.513,P<0.001）。  结论  HPIVs是北京市流行的常见呼吸道病毒,15岁以下儿童是HPIVs感染的主要人群,2020年新冠疫情防控措施明显减低了HPIVs感染。     

基于电热型扫描微镜的微型双光子显微镜探头设计

双光子荧光显微镜的微型化对在体脑部神经活动研究和体内组织病理状态检测具有非常重要意义。本文设计了一种基于电热型扫描微镜的微型化双光子荧光显微镜探头,其微镜设计采用反向串联双S型双层材料结构,通过对微镜四个侧面执行器分别施加周期信号,实现了±3.5°的扫描范围;其光学设计是通过单模光纤导入800 nm飞秒激光,激光经微镜扫描,由光学系统聚焦作用于生物样品,激发样品产生荧光,荧光信号通过采集光路汇集并耦合到多模光纤输出,最后通过显微镜的图像采集系统成像。探头尺寸为26 mm(L)× 12 mm(W)× 8 mm(H),重量为5.6 g。利用该显微镜探头,对含有不同尺寸凹槽的微结构进行了成像测试,其结果表明,其扫描成像的范围可以实现150 μm × 150 μm,横向分辨率可达到5 μm;利用该探头对荧光染色小鼠肾脏冷冻切片进行的成像测试,成功得到了双光子二维荧光图像。基于本装置以及进一步的改进,将有助于构建便携式双光子荧光显微镜,置于活体动物头部,在体进行脑部神经活动研究。     

口腔液在新型冠状病毒核酸和抗体检测中的应用

为探讨新型生物标本口腔液在新型冠状病毒（SARS-CoV-2）核酸和抗体检测中的应用价值,采集2021年10—11月北京两起新型冠状病毒肺炎（简称“新冠肺炎”）聚集性疫情的7例确诊病例的口腔液及配对的呼吸道和血液样本。采用荧光定量PCR和血清抗体检测试剂盒分别检测SARS-CoV-2核酸和IgG抗体,同时采用新建的磁微...     

2015-2019年北京市肺炎衣原体流行特征分析

目的 分析北京市2015-2019年急性呼吸道感染患者中肺炎衣原体感染者的流行特征。方法 利用北京市呼吸道病原体监测系统,收集全市35家哨点医院就诊的急性呼吸道感染患者流行病学资料,采集临床标本开展肺炎衣原体检测,并对阳性标本ompA基因的VD4区序列做进化分析。结果 2015-2019年,北京市急性呼吸道感染就诊患者中肺炎衣原体总体阳性率为0.34%（129/37 460）,肺炎衣原体阳性率在每年3月升高,5月达到峰值,7月回落,持续时间约5~8个月,不同年份流行季可能提前或推迟1~2个月;每年流行季肺炎衣原体月阳性率均≥ 0.30%。5~44岁人群高发,其中10~14岁组肺炎衣原体阳性率最高;<25岁患者中,随年龄增加,感染肺炎衣原体的风险增加,≥ 25岁患者,随年龄增加,感染肺炎衣原体的风险降低;男、女性患者阳性率分别为0.33%（68/20 830）和0.37%（61/16 528）,组间差异无统计学意义（χ²=0.486,P=0.486）;普通肺炎患者中的肺炎衣原体阳性率高于上呼吸道感染患者与重症肺炎患者（χ²=36.797,P<0.01）;40.31%（52/129）肺炎衣原体感染者标本中检出≥ 1种其他呼吸道病原体,排名前4位依次是：流感嗜血杆菌（15份）、肺炎链球菌（13份）、鼻病毒（8份）、嗜麦芽窄食单胞菌（7份）;129份肺炎衣原体阳性标本中的101株经测序鉴定均为A型。结论 北京市肺炎衣原体每年呈单峰流行模式,流行季一般为3-7月,流行季节特征可用于与其他呼吸道病原体的鉴别诊断,5~44岁人群好发,基因型以A型为主;如果连续2个月肺炎衣原体核酸阳性率超过0.30%,可初步认为进入肺炎衣原体高流行期;肺炎衣原体感染发生肺炎后进展为重症肺炎的概率较高。     

22种呼吸道病原体核酸多重联检试剂盒检测效能评估

  目的   通过对1种新型呼吸道病原体核酸多重联检试剂盒检测效能评价,为新型冠状病毒（SARS-CoV-2）、流行性感冒（流感）病毒等叠加流行的大规模检测提供适宜技术方法。  方法   收集北京地区急性呼吸道感染病例阳性标本252份,采用4种核酸检测试剂盒（3种核酸多重检测试剂盒A、B、C及1种SARS-CoV-2检测试剂盒D）分别进行荧光聚合酶链式反应（PCR）检测,评价其与临床标本检测结果的一致性。 选取3份呼吸道病原体标本核酸,使用无核糖核酸（RNA）酶水10倍梯度稀释,并选取1份SARS-CoV-2阳性标本核酸稀释为10?1～10?6,评价A试剂盒的检出能力及批内重复性。  结果   A、B、C试剂盒对甲型流感病毒、鼻病毒、腺病毒、肠道病毒、人偏肺病毒、副流感病毒3型、副流感病毒4型、冠状病毒NL63的检出率均为100%,Kappa值均为1,结果完全一致。 对乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒1型、副流感病毒2型、冠状病毒OC43、冠状病毒229E、冠状病毒HKU1及肺炎支原体的Kappa值范围为0.91～1。 3种核酸联检试剂盒对呼吸道病原体的最低检出限相当。 A与D试剂盒对SARS-CoV-2的阴阳性符合率均为100%,批内重复性显示在稀释度10?1～10?3范围内,2种试剂各重复检测5次变异系数（CV）值均<5%。 在稀释度10?4～10?5范围内,A试剂对ORF1ab基因检出率为40%,N基因检出率为80%,D试剂对ORF1ab基因检出率为30%,N基因检出率为20%。  结论   A试剂盒与其他3种试剂盒对病毒载量较高的阳性标本检测的准确度无明显差异,检测性能相似;本研究为大规模核酸检测提供了检测试剂盒的多种选择。