肠缺血再灌注损伤后大鼠肝和肺组织bFGF和TGFβ基因表达的变化

目的观察大鼠肠缺血再灌注损伤后肝和肺的损伤程度与内源性ｂＦＧＦ和ＴＧＦβｍＲＮＡ表达量的变化规律，探讨两类生长因子在内脏损伤与修复中的作用．方法采用大鼠（ｎ＝１６）肠系膜上动脉夹闭模型，（缺血４５ｍｉｎ，再灌注６ｈ和２４ｈ）用原位杂交方法检测内源性ｂＦＧＦ和ＴＧＦβｍＲＮＡ表达水平．结果肠缺血４５ｍｉｎ再灌注６ｈ时，对肝、肺的损伤最严重，而此时内源性ｂＦＧＦ和ＴＧＦβｍＲＮＡ表达水平显著增高，达峰值；再灌注２４ｈ，肝，肺的损伤已基本恢复，内源性ｂＦＧＦ和ＴＧＦβｍＲＮＡ表达量也基本恢复至正常水平．结论内源性ｂＦＧＦ和ＴＧＦβｍＲＮＡ表达水平的变化与肝、肺的损伤程度呈正相关，表明这两类生长因子在内脏损伤后可能存在促进修复的作用．     

c-fos和c-myc 原癌基因与bFGF在烧伤后早期创面组织中的表达规律

目的：探讨烧伤后创面组织原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ ｍｙｃ 和碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ） 的表达顺序及分布规律。方法：采用深Ⅱ度烫伤模型,将４２ 只大鼠分为７ 组,即正常对照组、烫伤后３ ｈ、６ ｈ、１ ｄ、３ ｄ、７ ｄ 和１４ ｄ 组。用ＳＰ免疫组化方法研究烫伤后不同时间点内源性ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ ｍｙｃ 和ｂＦＧＦ蛋白的表达规律及分布特征。结果：烧伤可以诱导ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ ｍｙｃ 和ｂＦＧＦ表达,但三者的表达模式不尽相同,正常皮肤即有ｃ－ｆｏｓ 表达,伤后３ ｈ 达峰值,以后逐渐下降,１ 天以后降至最低水平,其阳性颗粒主要分布于表皮基底细胞胞浆及真皮成纤维细胞的胞核内。ｃ－ ｍｙｃ 的表达在伤后３ 天达最高值,阳性信号分布于真皮层成纤维细胞的胞浆中;而ｂＦＧＦ则在伤后６ ｈ 开始出现,伤后第１ 天达最高值,主要分布于真皮层的成纤维细胞的胞浆中。结论：烧伤可以诱导皮肤创面组织原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ ｍｙｃ 及ｂＦＧＦ的表达,其表达具有时相与部位分布特征。三者表达的时相性提示在烧伤后早期原癌基因与生长因子基因之间具有相互调控作用,而这种调控作用对后期组织修复将产生一定的影响。     

缺血—再灌注肌肉损伤中程序性细胞死亡的研究

目的：探讨程序性细胞死亡在缺血再灌注肌肉损伤中的作用及缺血再灌注肌肉损伤的发生机制。方法：运用末端脱氧核糖转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记技术（ＴＵＮＥＬ）观察止血带致大鼠右后肢缺血再灌注腓肠肌细胞程序性死亡的特征与规律，并以左后肢作自身正常对照。结果：正常肌肉肌细胞完整，无程序性死亡细胞；再灌注４小时，肌细胞深度蓝染，程序性死亡细胞率为０．７０±０．０７；再灌注２４小时，肌细胞蓝染程度减轻，其程序性死亡细胞率为０．４８±０．０８，与再灌注４小时比较有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）；再灌注２４小时，重度程序性死亡细胞率为０．１２±０．０８，与再灌注４小时（０．３６±０．０９）比较有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论：缺血再灌注能致肌肉细胞发生程序性死亡，以再灌注４小时最重，再灌注２４小时较４小时明显缓解     

c-fos与c-jun基因在溃疡与增生性瘢痕创面表达的特征与意义

目的 探讨c-fos与c-jun两种原癌基因在溃疡与增生性瘢痕创面表达的特征与规律以及与不同组织修复结局发生的关系。方法16例标本均取自于外科手术患,其中增生性瘢痕8例,溃疡创面8例,取增生性瘢痕患中的5例的正常皮肤作为对照。用免疫组化法(ABC法)检测c-fos与c-jun两种原癌基因在3种组织切片的分布特征。结果在正常对照皮肤c-fos与c-jun的阳性表达主要见于表皮基底细胞和少量皮下成纤维细胞,但在相应部位c-jun的表达较c-fos为弱。在增生性瘢痕,c-fos与c-jun均出现强阳性表达,主要见于成纤维细胞。在溃疡组织,c-fos与c-jun的联合表达多见于毛细血管内皮细胞、部分炎症细胞以及成纤维细胞胞浆。结论 增生性瘢痕与溃疡创面c-fos与c-jun表达量与部位同正常皮肤差异有显性意义,提示这两种原癌基因在影响调控组织修复中有重要作用。     

缺血-再灌注诱导bcl2基因表达及其对肠道细胞凋亡的影响

目的：观察缺血再灌注肠道组织原癌基因ｂｃｌ２表达的特征、规律以及与肠道细胞凋亡发生的关系。方法：将１６只Ｗｉｓｔａｒ大鼠分成正常对照、肠系膜上动脉夹闭缺血４５分钟、肠系膜上动脉夹闭４５分钟与再灌注６小时和再灌注２４小时４组。用免疫组化法和末端脱氧核糖转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记技术（ＴＵＮＥＬ技术）分别观察以上各组肠道组织细胞ｂｃｌ２基因表达与凋亡发生的关系。结果：肠系膜上动脉夹闭可以导致肠粘膜细胞凋亡发生增加与激活ｂｃｌ２基因表达。在正常肠道ｂｃｌ２表达为阴性,缺血可诱导ｂｃｌ２表达,并且在ｂｃｌ２表达增加的同时凋亡细胞逐渐减少。与再灌注６小时组相比,再灌注２４小时肠道组织ｂｃｌ２表达不仅强度明显增加,而且还有分布广泛与涉及多种组织的特点。结论：缺血再灌注激活ｂｃｌ２基因表达是体内最重要的抗凋亡机制之一。成纤维细胞生长因子减轻肠道凋亡现象可能与其激活和上调ｂｃｌ２基因表达有关     

应用外源性bFGF对缺血再灌注后脏器组织损伤及修复的实验研究

目的：观察应用外源性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对大鼠肠缺血－再灌注后肝功能与肠组织Ｐ物质（ＳＰ）含量的影响及其与组织损伤修复的关系。方法：５４只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为３组：假手术组、生理盐水对照组及ｂＦＧＦ治疗组（每只大鼠４μｇｂＦＧＦ）。生理盐水对照组及ｂＦＧＦ治疗组动物于再灌注后２、６、２４和４８小时活杀,检测小肠组织ＳＰ含量及血浆Ｄ－乳酸、二胺氧化酶（ＤＡＯ）和丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）水     

基因治疗技术与组织修复的基因治疗

基因治疗是现代分子生物学技术发展的产物,自美国第一例基因治疗以来,发展迅速,得到了社会和科学家的重视,不但在一些遗传性疾病如血友病、白化病等方面引起了重视,也在一些非遗传性疾病如癌症、获得性免疫缺陷综合征的治疗等方面得到了应用。组致修复有其自身的特点,创面经过炎症期、肉芽期等几个时期逐渐愈合。研究发现,部分伤口中某些生长因子半衰期较短,以及一些酶活力增高,致使生长因子浓度相对降低,伤口迁延不愈,形成慢性难愈合创面,而另一些创面由于生长因子浓度的持续增高,细胞增生过度,则形成瘢痕或瘢痕疙瘩,因此修复质量是创伤治疗的核心。自基因治疗技术发展以来,为创伤的临床治疗     

缺血-再灌注对大鼠肠道组织碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β基因表达的影响

目的：研究缺血再灌注损伤致肠道内源性碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）和转化生长因子β（ＴＧＦβ）基因表达的变化特征与规律，探讨这两种因子基因表达变化与肠道修复的关系。方法：利用大鼠肠系膜上动脉夹闭４５分钟与再灌注６小时与２４小时动物模型，用原位杂交与逆转录聚合酶链式反应技术检测两种因子ｍＲＮＡ表达水平、定位及时相变化。结果：在正常小肠粘膜，ｂＦＧＦ与ＴＧＦβ的ｍＲＮＡ表达均为弱阳性，主要位于小肠绒毛的固有层。缺血４５分钟，小肠粘膜ｂＦＧＦｍＲＮＡ的阳性信号消失，而ＴＧＦβｍＲＮＡ的表达量却明显增加；再灌注６小时与２４小时，两种因子ｍＲＮＡ表达量接近于伤前。结论：缺血再灌注损伤可导致肠道内源性ｂＦＧＦ与ＴＧＦβ基因表达的改变，而这种改变与创伤本身的病理生理过程和后期组织修复作用密切相关     

急性肠缺血再灌流对肺bFGF与TGFβ基因表达的影响

利用大鼠肠系膜上动脉夹闭造成缺血再灌流动力模型，用原位杂交和ＲＴ－ＰＣＲ技术检测肺内源性ｂＦＧＦ和ＴＧＦβ基因表达的变化。通过观察肠缺血再灌流损伤后肺内源性ｂＦＧＦ和ＴＧＦβ基因表达的变化规律，探讨这两种生长因子与肺损伤修复的关系。结果：在正常肺泡上皮细胞和微静脉中，ｂＦＧＦ和ＴＧＦβ均有一定表达。缺血４５ｍｉｎ时，ＴＧＦβ表达量显著增加，而ｂＦＧＦ无明显改变。再灌注６ｈ后，两种因子基因表达水平均