二甲双胍对人胆管癌RBE细胞的作用及其机制

目的：探讨二甲双胍对人肝胆管癌细胞的增殖、凋亡和细胞周期的影响及机制。 方法：将人肝胆管癌RBE细胞分别用二甲双胍、Compound C（AMPK抑制剂）、二甲双胍+ Compound C处理,以未处理的RBE细胞作为空白对照,分别用MTT法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期、Western blot检测细胞AMPK/mTOR通路蛋白的表达。 结果：与空白对照组比较,二甲双胍作用后的RBE细胞存活率降低;细胞凋亡率升高;G0/G1期比例增加,而S期比例减少;磷酸化AMPK（p-AMPK）蛋白表达上调,而磷酸化mTOR（p-mTOR）蛋白表达明显下调,差异均有统计学意义（均P<0.05）。二甲双胍与Compound C联合作用RBE细胞后,二甲双胍的上述作用均被取消,各项指标与空白对照组差异均无统计学意义（均P>0.05）。单独的Compound C作用RBE细胞后,各项指标未见明显改变,与空白对照组差异均无统计学意义（均P>0.05）。 结论：二甲双胍能抑制人胆管癌RBE细胞的增殖、促进凋亡和细胞周期阻滞,该作用可能其与激活AMPK从而抑制mTOR下游效应分子有关。

     

miR-362-3p的表达及其靶基因与胆囊癌恶性特征的关系

目的:探讨miR-362-3p在胆囊癌中的表达及功能。方法:用qRT-PCR检测手术切除的44例胆囊癌患者手术标本中miR-362-3p的表达,并分析其表达与胆囊癌临床病理特征及预后的关系。miR-362-3p模拟物转染胆囊癌细胞后,分别用MTT法、细胞划痕试验及Transwell侵袭试验观察细胞增殖、迁移及侵袭的改变。通过生物信息学方法及双荧光素酶报告基因试验分析miR-362-3p的靶基因,并采用补救试验验证。结果:miR-362-3p在胆囊癌组织的表达明显低于相应癌旁组织(P0.05)。miR-362-3p的低表达与肿瘤TNM分期、淋巴结转移及远处转移明显有关(均P0.05)。低表达miR-362-3p患者总体生存率较高表达miR-362-3p患者明显降低(P0.05)。转染miR-362-3p模拟物后,胆囊癌细胞的增殖,迁移及侵袭能力明显减弱(均P0.05)。Nemo样激酶(NLK)被确定为miR-362-3p的潜在靶基因,转染NLK过表达载体后,miR-362-3p模拟物对胆囊癌细胞的上述作用被明显逆转(均P0.05)。结论:miR-362-3p在胆囊癌中表达下调,下调的miR-362-3p减少了对靶基因NLK的抑制,从而促进了胆囊癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

微探头超声在食管静脉曲张腔内外联合断流术中的应用

目的运用微探头超声观察门脉高压症食管静脉曲张患者食管下段壁内外静脉结构治疗前后的变化以及对腔内外联合断流术的疗效、预后进行评价。方法对23例门脉高压食管静脉曲张患者，在接受腔内外联合断流术前后应用微探头超声对食管下段静脉结构情况进行对比观察。随访追踪食管静脉曲张的复发率、再出血率。结果治疗后食管黏膜下曲张静脉消失，食管周围静脉丛曲张程度也明显减轻或消失。短期追踪随访静脉曲张的再发率和出血率分别为5．0％和0。结论腔内外联合断流能有效闭塞食管下段壁内外的静脉，阻断门奇分流，防治食管静脉曲张出血与复发，而且操作简便，值得推广应用。微探头超声检查食管下段静脉的变化在食管静脉曲张治疗的评价中具有重要意义。     

微探头超声研究食管壁外侧支静脉在食管静脉曲张形成中的作用

目的：探讨微探头超声检测食管壁外侧支静脉在食管静脉曲张形成中的作用。方法：对35例门脉高压症患者在食管静脉套扎(EVL)前进行常规胃镜检查，记录食管静脉曲张分级；然后用UM—3R超声成像系统中的20MHz微探头进行食管下段超声检查，记录食管周围静脉、旁静脉的曲张程度以及穿静脉的有无及类型。结果：35例患者中有30例检测到周围静脉(85．7％)，27例检测到旁静脉(77.1％)。内镜下食管静脉曲张分级越高，周围静脉曲张越严重(P＜0.05)；静脉曲张分级和旁静脉的严重程度之间无统计意义。26例患者检测到穿静脉(74．3％)，曲张静脉分级越高，穿静脉显示率越率。结论：食管壁外侧支静脉在食管静脉曲张形成中均起作用，其中食管周围静脉发挥着更大的作用。     

门静脉高压症患者胃黏膜内皮素受体的基因表达

【目的】探讨内皮素受体（ETR）亚型基因表达在门静脉高压症胃病（PHG）中的变化及作用。【方法】采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）分析42例肝硬化门静脉高压症患者PHG病变部位ETA受体和ETB受体mRNA的变化。【结果】轻度PHG胃黏膜ETAR mRNA、ETBR mRNA表达明显升高，与无PHG组及对照组比较差异均有显著意义（P〈0．001），重度PHG的ETAR mRNA、ETBR mRNA表达进一步增强，与轻度PHG者比较差异亦有显著意义（P〈0．001）；【结论】PHG患者ETR基因过度表达可能是加重胃黏膜损害的重要因素之一。     

MiR-21通过PTEN/PI3K/AKT信号通路抑制胰腺癌细胞系生长侵袭能力的体外研究

目的 探讨MiR-21对胰腺癌细胞生长和侵袭的影响.方法 采用脂质体Lipofectamine 2 000将MiR-21 inhibitor和MiR-21 inhibitor阴性对照转染至胰腺癌细胞ASPC-1,qRT-PCR检测转染效果,细胞免疫荧光、Western blot检测转染后目的蛋白的表达,Transwell、划痕实验检测细胞迁移侵袭能力,MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布的改变.结果 成功构建稳定下调MiR-21的胰腺癌细胞亚系ASPC-1-MiR-21,荧光定量PCR结果显示MiR-21表达量明显下调,抑制MiR-21表达后ASPC细胞的侵袭和增殖能力均受到明显抑制;抑制MiR-21能明显增强PTEN蛋白和减低p-AKT蛋白表达水平,对AKT蛋白水平无明显影响.结论 抑制MiR-21表达可能通过调控PTEN/AKT通路抑制胰腺癌细胞AS-PC-1增殖和侵袭.     

穿静脉--食管曲张静脉内镜治疗后复发的指标

内镜下食管曲张静脉套扎术是目前常用的有效治疗方法 ,但如何防止食管曲张静脉治疗后复发是目前急需解决的问题。国外研究发现 ,超声内镜可清晰显示食管曲张静脉、周围静脉及穿静脉 ,在评估食管曲张静脉复发方面有实用价值[1] 。本研究用超声内镜微探头和食管曲张静脉微创测压仪研究穿静脉与食管曲张静脉内径、压力的关系 ,探讨穿静脉对食管曲张静脉套扎术后复发的影响 ,阐述其在食管静脉曲张复发中的作用。一、材料和方法1.患者 :1998年 9月～ 2 0 0 2年 2月在我院行内镜下食管曲张静脉套扎术的 2 5 6例患者中随机抽取 70例 ,其中酒精性肝…     

彩色多普勒血流参数在评价食管静脉曲张程度中的价值

目的 :评价彩色多普勒血流参数在食管静脉曲张程度中的价值。方法 :运用彩色多普勒超声对重度曲张组 (32例 )、轻 中度曲张组 (2 0例 )及健康对照组 (15例 )食管静脉曲张的胃左静脉血流量、门静脉血流量及胃左静脉分流指数分别进行研究。结果 :重度曲张组的上述血流参数与轻 中度曲张组及对照组相比差异均具有显著性 (均P<0 .0 5 )。其中胃左静脉分流指数在判断食管静脉重度曲张程度上具有更高的敏感性和特异性。结论 :胃左静脉分流指数是评价食管静脉重度曲张的好指标。     

注射毒品致感染性股动脉假性动脉瘤18例治疗体会

【目的]探讨注射毒品致感染性股动脉假性动脉瘤的有效治疗方法。【方法】回顾性分析2006年12月至2009年12月收治的18例因注射毒品致感染性股动脉假性动脉瘤患者的临床资料。全组病例均采用手术治疗,16例行假性动脉瘤切除＋髂动脉一股浅动脉人工血管搭桥术;1例行假性动脉瘤切除＋取自体大隐静脉行股动脉修补术;1例行假性动脉瘤切除＋股动脉结扎术。【结果】全组18例患者无死亡、无截肢,1例出现人工血管感染,术后140d再次手术取出人工血管,1例术后d2出现结扎处股动脉破裂大出血,再次手术结扎股动脉止血。2例随诊发现分别于术后3个月、4个月人工血管血栓形成。【结论】经解剖外途径血管重建是治疗注射毒品致感染性股动脉假性动脉瘤的有效方法。     

脾切除对肝纤维化大鼠肝脏PDGF-B表达及血清PDGF-BB水平的影响

目的 研究脾切除对肝纤维化大鼠肝脏PDGF-B表达和血清PDGF-BB水平的影响,探讨脾切除在肝纤维化治疗中的作用.方法 大鼠皮下注射CCl4,建立65只肝纤维化大鼠模型.于建模开始、肝纤维化期以及肝硬化期三组切除大鼠睥脏,并设立同期假手术组作为对照组.第一、二组及其对照组于建模后第10周,第三组及其对照组于建模后12周分别取大鼠肝脏和血液标本.用免疫组化SABC法测定肝脏PIGF-B的表达.HE染色检测肝纤维化,用双抗体夹心ELISA法测定血清PIGF-BB水平.结果 各切脾组PDGF-B阳性细胞A值(光密度值)明显低于其对照组;各切脾组血清PDGF-BB含量明显低于其对照组.根据HE染色,建模开始时切脾再行肝纤维化诱导,肝纤维化进程缓慢;建模第5周切脾后,肝脏病理状态比对照组明显缓解;肝硬化期切脾后,肝脏炎性改变和纤维化程度有一定减轻.结论 早期脾脏切除对实验性肝纤维化有一定延缓作用.脾切除后PDGF水平的下降可能是造成该延缓的机制之一.

Abstract：

Objective To explore the effects of splenectomy on hepatic fibrosis and on the expression of PDGF-B in the liver and PDGF-BB in the serum of rats with hepatic fibrosis. Methods By hypodermic injection CCl4, we established 65 rat models with hepatic fibrosis, splenectomies were performed in the three groups at different phases: before hypodermic injection CCl4 (A group), five weeks after hypodermic injection CCl4 (B group), and ten weeks hypodermic injection CCl4 (C group). The control groups were established at the same time, with samples of the livers and serum of the rats taken in different phases. The expressions of PDGF in the liver were detected by immunohistochemistry technique and the degree of hepatic fibrosis was detected by HE staining. The serum levels of PDGF-BB were analyzed by ELISA technique. Results Absorbance values of PDGF-B in the experimental group were significantly lower than the control groups (P＜0. 05). Serum levels of PDGF-BB of the rats after splenectomy were significantly lower than those in the control groups (P＜0.05). HE and Masson's staining showed that the progression of Hepatic fibrosis was slow in the A group. Hepatic pathologic state was significantly relieved in the B group and the inflammation and fibrosis was relieved in the C group. Conclusion Earlier period splenectomy could delay the proceeding of experimental hepatic fibrosis. After splenectomy the decline in the level of PDGF may be one of the mechanisms causing the delay.