串联质谱法在过氧化物酶体病筛查中的应用

目的：探讨串联质谱法检测极长链酰基肉碱（VLCAC）和溶血磷脂酰胆碱（LPC）在过氧化物酶体病筛查中的价值。方法：选取2017年1月至2021年3月以发育迟缓等神经系统异常就诊于上海市儿童医院,根据临床症状、磁共振成像和基因检测结果明确诊断为X-连锁肾上腺脑白质营养不良（X-ALD）患儿14例和脑肝肾综合征（ZS）患儿4例。另选取同年龄段体检儿童200名为健康对照组。使用含稳定同位素内标的溶剂萃取所有对象干血斑标本中的VLCAC和LPC,直接采用串联质谱法检测二十碳酰基肉碱（C20）、二十二碳酰基肉碱（C22）、二十四碳酰基肉碱（C24）、二十六碳酰基肉碱（C26）、二十碳溶血磷脂酰胆碱（C20:0-LPC）、二十二碳溶血磷脂酰胆碱（C22:0-LPC）、二十四碳溶血磷脂酰胆碱（C24:0-LPC）和二十六碳溶血磷脂酰胆碱（C26:0-LPC）水平,并计算C24/C20、C24/C22、C26/C20、C26/C22、C24:0-LPC/C20:0-LPC、C24:0-LPC/C22:0-LPC、C26:0-LPC/C20:0-LPC、C26:0-LPC/C22:0-LPC比值。采用Kruskal-Wallis H检验和Mann-WhitneyU检验比较各组间VLCAC和LPC各指标检测值及比值,采用偏最小二乘法和变量投影重要度权重评分分析各指标对判断疾病的贡献度。结果：除C24:0-LPC/C20:0-LPC外,所有指标和比值在各组间差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;X-ALD组与健康对照组、ZS组与健康对照组间,各指标有不同程度的差异,但X-ALD组与ZS组间差异无统计学意义（P>0.05）;偏最小二乘法分析显示X-ALD和ZS组与健康对照组能够完全分离,C26的变量投影重要度值最大。结论：串联质谱法检测VLCAC和LPC可作为过氧化物酶体病筛查的方法,其中C26或可作为诊断敏感指标。     

新生儿苯丙酮尿症两种实验室筛查方法的质量评价

目的比较筛查新生儿苯丙酮尿症(PKU)的2种检测苯丙氨酸(Phe)的方法——细菌抑制法(B IA)和荧光法。方法参加美国疾病控制中心(CDC)质量评价,分析B IA和荧光法的批内、批间误差及相对偏差,比较2种方法的结果。结果用CDC质控品测得BIA批内变异系数(CV)为14.29%,荧光法为5.85%;用不同浓度质控品测得B IA批间CV分别为25.34%、20.86%、34.78%和25.72%,荧光法为16.46%、13.22%、19.53%和15.41%;B IA的PKU阳性检出率为5.04/10万,荧光法为7.79/10万。结论荧光法较B IA具有更灵敏、准确、可定量、费时少的优点,国内今后应顺应其发展趋势,普及推广运用荧光法筛查新生儿PKU。     

尿α2-巨球蛋白检测在血尿来源鉴别中的意义

自 2 0世纪 90年代以来 ,已有不少尿α2 巨球蛋白 (α2 MG)临床应用的研究报告 ,认为对血尿来源的鉴别具有重要价值。现就 2 70例血尿患儿α MG测定结果及临床意义报道如下。1　材料与方法1.1　对象　 2 70例血尿患儿 ,男 174例 ,女 96例 ,平均年龄5 .8岁 (1月～ 14岁 )。另取 10 3例体检正常小儿作对照 ,平均年龄 5 .9岁 (3月～ 15岁 ) ,近期均未用过肾毒性药物。1.2　仪器和试剂　美国产Bio Rad 4 5 0型酶标分析仪 ;由上海德波生物技术公司提供的尿系列微量蛋白测定试剂盒。1.3　方法　采集正常小儿或血尿患儿随意尿 10ml,- 2 0℃保…     

气相色谱-质谱联用技术在遗传代谢性疾病诊断中的应用

目的探讨气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术在遗传代谢病诊断中的应用。方法收集5 778例疑似遗传代谢病患儿的尿液,经萃取、衍生后采用GC-MS技术检测132种代谢产物,通过遗传代谢病分析软件并结合实验室其他检测等进行诊断。结果 5 778例疑似患儿尿液样本中有1 100例(19%)有异常代谢产物,共有106例患儿被明确诊断出17种疾病,其中尿液中特征性指标异常的患儿80例、结合血串联质谱结果确诊26例患儿。80例尿液出现特征性指标异常的患儿中有机酸代谢障碍疾病患儿65例,确诊疾病11种;氨基酸代谢障碍疾病患儿15例,确诊疾病3种;包括甲基丙二酸血症33例、高苯丙氨酸血症12例、丙酸血症7例、戊二酸血症Ⅰ型7例、尿素循环障碍6例、β酮硫解酶缺乏症3例、乙基丙二酸血症2例、枫糖浆尿症2例、异戊酸血症2例、多种羧化酶缺乏症2例、酪氨酸血症Ⅰ型1例、2-羟基戊二酸血症1例、3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症1例、3-羟基-3-甲基戊二酸尿症1例。结合血串联质谱结果确诊的26例患儿中希特林蛋白缺乏症19例、极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症5例、中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症2例。结论 GC-MS技术对有机酸代谢异常和部分氨基酸代谢异常诊断有特异性。GC-MS技术检测结果影响因素多,但对疾病最终诊断无影响。     

营养不良患儿酰基肉碱谱变化

目的 探讨营养不良患儿血酰基肉碱谱特点及用于代谢病的鉴别.方法 收集营养不良患儿13例,同期同年龄段非代谢病患儿214例作为对照组.入院时空腹采集末梢血制成千血片,串联质谱非衍生化法检测其肉碱和多种酰基肉碱浓度.结果 脂肪酸氧化分解相关的脂酰基肉碱,营养不良组从十八碳脂酰基肉碱至乙酰基肉碱,包括酮体酰基肉碱,即丙二酰基肉碱和羟基丁酰基肉碱都有不同程度增高,以中链酰基肉碱增高明显,其中营养不良组癸酰基肉碱为（0.203 ±0.105） μmol/L,超出正常参考值范围（0～0.200 μmol/L）,显著高于对照组[0.054±0.030）μmol/L,P＜0.001].氨基酸分解相关的丙酰基肉碱、戊酰基肉碱、羟基戊酰基肉碱和戊二酰基肉碱等,营养不良组和对照组比较差异均无统计学意义（均P＞O.05）.结论 营养不良患儿血中脂肪酸代谢相关的酰基肉碱增高,以中链酰基肉碱增高明显,癸酰基肉碱略超出正常值等特点,可与中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症和多种酰基肉碱辅酶A脱氢酶缺乏症等疾病鉴别.     

应用TRFIA在31万余新生儿中筛查先天性甲状腺功能低下症

目的 开展新生儿先天性甲状腺功能低下症（CH）筛查，降低残疾儿童的发生率，提高我国人口素质。方法 应用先进的时间分辨荧光免疫法TRFIA检测新生儿促甲状腺素的浓度筛查CH。结果 筛查新生儿CH315472名，确诊66例，筛查阳性率为1／4780。结论 应用TRFIA筛查CH，是理想的非放射性免疫分析法。接受国际和国内新生儿筛查实验室质量监控，是对大批量筛查标本质量的有效保证。选用该法筛查CH能逐渐适宜于我国经济实力不断发展的国情。     

新生儿先天性甲状腺功能减退症的筛查及临床分析

目的：开展新生儿先天性甲状腺功能减退症（CH）的筛查及临床治疗,以期降低残疾儿童的发生率,提高我国人口素质,方法：应用国际先进的时间分辨荧光免疫法（Tr-FIA)检测新生儿滤纸干血片上TSH的[浓度筛查CH;且对筛查阳性的患儿进行临床分析。结果：筛查新生儿315 472例,确诊CH者66例,包括47例典型甲减,19例亚临床甲减,筛查阳性率为1／4 780,47例典型病例最终诊断为永久性甲减的41例,暂时性甲减2例,2例未满2岁未再作重新评估,1例因其他原因夭折,1例放弃,19例亚临床型病例最终诊断永久性甲减7例,暂时性甲减4例,商TSH血症5例,有3例未满2岁未再作重新评估,随访患儿目前体格及智力发育皆正常,结论：Tr-FIA法是筛查CH十分理想的非放射性免疫分析技术,筛查阳性的CH患儿,包括甲减和亚临床甲减病例,都应给以及时合理剂量甲状腺素治疗,是否终身治疗则需要根据2岁及5岁的重新评估作出决定。     

肾病综合征患儿血清白细胞介素13、18测定及其意义

目的 探讨白细胞介素13(IL-l3)、IL-l8与肾病综合征(NS)之间的关系。方法 采用酶联免疫分析法定量测定74例原发性肾病血清IL-l3、IL-l8水平。结果 NS患儿发作期血IL-l3、IL-l8均显著高于对照组和缓解组(P＜0．01)，恢复期与对照组比较无差异(P＞0.05)。单纯性肾病IL-l3、IL-l8明显高于肾炎性肾病(P＜0．01)。结论 IL-l3、IL-l8参与肾病综合征的发病，互单纯性肾病较肾炎性肾病明显。     

用时间分辨荧光免疫法测定孕早期妇女血清甲胎蛋白的初步研究

本文用时间分辨荧光免疫法(Tr-FIA)测定了孕6-16周(W)妇女的血清甲胎蛋白(MSAFP)水平.共742份血清标本,其中无流产史组300份标本/300例,有习惯性流产史组238份/61例,为了便于筛查,前者用毛细管微量采血与静脉血测定MSAFP浓度对照为204份.在无流产史组中有1例MSAFP浓度显著增高,为死胎;习惯性流产史组中215份/52例保胎成功,23份/8例保胎失败,其中3例为染色体核型异常.