榕树下的青春年少

雨后，在空中翩跹的榕树花，湿透的水泥路面都溢出榕花的气息．是谁用我们稚嫩的翅膀在榕树下写下——青春。     

面向成人教育的病理学教学设计与实施

针对成人教育发展的需要,从确定教学设计的思路和目标出发,在改革教学内容和课程体系、教学方法和手段、病理学教材、教学组织形式、课程考核方式以及规范教学管理等方面对成人教育病理学教学进行教学设计,并探讨了实施策略和体会。     

Bcl-2 siRNA抑制HL-60细胞bcl-2基因表达

目的应用RNA干扰技术观察Bcl2siRNA对白血病细胞HL60中bcl2基因表达的影响,探讨siRNA技术在白血病治疗中的作用。方法利用化学合成法体外化学合成Bcl2siRNA,将Bcl2siRNA与HL60细胞共孵育,用MTT法、荧光染色观察细胞增殖及凋亡情况,用RTPCR检测Bcl2mRNA水平,用荧光染色测Bcl2蛋白水平。结果Bcl2siRNA与HL60细胞共孵育48h后,HL60细胞凋亡率增加,Bcl2mRNA水平下调,Bcl2蛋白表达水平降低。转染GAPDHsiRNA组的细胞对Bcl2表达无影响。结论Bcl2siRNA能够特异性降低Bcl2mRNA水平及蛋白质的表达,促进HL60细胞凋亡。     

PBL结合多媒体教学法在护理专业病理学教学中的应用

目的探讨基于问题的学习(PBL)结合多媒体教学法在护理专业病理学教学中的应用效果。方法将护理专业两个班分成试验组(n=47)和对照组(n=46),试验组采用PBL结合多媒体教学方法;对照组采用传统的教学方法。结果 PBL结合多媒体教学法对提高学生学习积极性和主动性,加深对病理学内容的理解和掌握,培养学生分析问题、解决问题的能力,提高团队合作精神等方面有明显的促进作用;考试成绩显示,试验组学生成绩明显优于与对照组(P0.05)。结论 PBL结合多媒体教学法明显优于传统教学法,是一种有益的教学方法,值得推广应用和进一步深入研究。     

子宫颈鳞癌组织中基质金属蛋白酶2的表达及其意义

目的:探讨基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)与宫颈鳞癌的发生、发展及转移的关系.方法:用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法(SP法)测定MMP-2的表达及分布;用明胶酶谱法测定活性型MMP-2蛋白的含量;用RT-PCR技术检测MMP-2 mRNA表达水平.结果:在宫颈鳞癌组织(squamouscell carcinomas,SCC)中MMP-2的阳性表达率为81.13%(43/53),高于在重度鳞状上皮细胞内损害(high-gradesquamous intraepithelial lesions,HSIL,47.62%,10/21)及轻度鳞状上皮细胞内损害(low-grade squamous intraepithe-lial lesions,LSIL,10.00%,1/10))中的表达;而HSIL则高于LSIL(P<0.05).淋巴结转移组MMP-2的阳性率(91.30%)高于非淋巴结转移组(73.33%,P<0.05),但其表达在不同的病理分级与临床分期之间差异无统计学意义.在官颈鳞癌组织中MMP-2蛋白酶活性[(5.81±2.17)×10⁴]高于HSIL[(2.28±0.83)×10⁴]和LSIL[(1.94±0.71)×10⁴,P<0.01,P<0.01].MMP-2 mRNA在宫颈鳞癌中的表达量(0.87±0.44)亦高于HSIL(0.46±0.22)和ISIL(0.37±0.20)中的表达量.结论:MMP-2与宫颈鳞癌的发生、发展及转移有关,MMP-2表达量的增高,尤其是其酶活性的增高可作为判断宫颈鳞癌具有浸润、转移倾向的临床参考指标.     

骨肉瘤中c-kit的表达及其临床意义

目的探讨骨肉瘤中c-kit的表达与肿瘤生物学行为及预后的关系,检测c-kit基因的突变状态,为临床判断预后及靶向治疗骨肉瘤提供依据。方法采用免疫组化EnVision两步法检测c-kit蛋白在40例普通型骨肉瘤组织中的表达,结合临床资料分析其与肿瘤生物学行为的关系,并应用单链构象多态性分析c-kit基因第11、17外显子的突变情况。结果c-kit在普通型骨肉瘤中表达阳性率为62.5%(25/40);c-kit高表达者更易局部复发,术后生存时间显著低于c-kit低表达组。未在38例普通型骨肉瘤标本中检测到SSCP银染异常条带,进一步测序证实无基因突变。结论c-kit在普通型骨肉瘤中的表达与骨肉瘤的生物学行为有关,对评价患者的预后有一定参考价值。c-kit外显子的突变在骨肉瘤中是低概率事件,不能成为酪氨酸激酶抑制剂的治疗靶点。     

Bcl-2 RNA有效靶点的筛选及其对白血病细胞HL-60的促凋亡作用

目的筛选有效的Bcl-2 siRNA并观察其对白血病细胞HL-60的生长抑制作用。方法用体外转录合成法合成双链Bcl-2 siRNA,将其转染入HL-60细胞;用流式细胞术检测Bcl-2蛋白表达,MTT法、流式细胞术及吉姆萨(Giemsa)染色法观察细胞增殖及凋亡情况。结果有效Bcl-2 siRNA有抑制HL-60细胞生长及促进细胞凋亡作用。结论有效Bcl-2 siRNA能特异性促进HL-60细胞凋亡,抑制其生长。     

MMP-9在宫颈鳞癌组织中的表达和意义

目的 探讨基质金属蛋白酶MMP-9与宫颈鳞癌的发生、发展及转移的关系.方法 免疫组化SP法测定MMP-9的表达及分布.结果 在宫颈鳞癌组织(SCC)和重度鳞状上皮细胞内损害(HSIL)中MMP-9蛋白的表达量均高于轻度鳞状上皮细胞内损害(LSIL) (P＜0.01,P＜0.05);宫颈鳞癌组织中淋巴结转移组MMP-9的阳性率(78.3%)显著高于无淋巴结转移组(63.3%),P＜0.01;MMP-9的表达在不同的病理分级与临床分期之间差异无显著性.结论 MMP-9与宫颈鳞癌的早期浸润及转移有关,MMP-9表达量的增高有助于临床医师正确评估病人的预后并制定适当的临床治疗方案.     

bcl-2 siRNA的设计、合成及其对HL-60 bcl-2基因表达的干扰作用

 目的 应用RNA干扰技术研究bcl-2 siRNA对白血病细胞HL-60 bcl-2基因表达的干扰作用。方法 扫描bcl-2 mRNA的全序列,记录从AUG启动子的AA及下游19个核苷酸肽作为潜在作用靶点。GC含量控制在30 % ~ 65 %之间。由BLAST分析排除与其他基因有高度同源性的序列。由体外转录合成法合成双链bcl-2 siRNA,将bcl-2 siRNA转染入HL-60细胞。收集转染48 h后的细胞,流式细胞术检测蛋白表达情况,筛选出最佳作用序列进一步作各项指标检测。从mRNA水平、蛋白质水平等观察bcl-2 siRNA对细胞HL-60 bcl-2基因表达的干扰作用。结果 收集转染48 h后的细胞,经细胞免疫荧光、RT-PCR、MTT及Hoechst33258荧光染色等指标检测,可见转染bcl-2 siRNA阳性组的细胞bcl-2基因表达降低及HL-60细胞凋亡等现象。而转染GAPDH siRNA组的细胞对bcl-2表达无影响。结论 采用生物信息学的方法设计出有效siRNA靶位点;bcl-2 siRNA可通过降低bcl-2 mRNA水平特异性抑制bcl-2蛋白质的表达。     

体外化学合成bcl-2 siRNA及脂质siPORT脂质体转染siRNA至细胞HL-60的鉴定

目的　为将RNA干扰技术深入应用到血液肿瘤做铺垫 ,体外化学合成bcl 2小干扰RNA(small interferenceRNA ,siRNA)及si PORT脂质体转染siRNA至细胞HL 6 0的鉴定。方法　通过互联网从GenBank获得人bcl 2mRNA全序列 ,经扫描bcl 2mRNA的全序列记录AA及下游 19个核苷酸肽并与基因组数据库比较去除与其它基因有高度同源性的序列 ,选取距离AUG启动子约 30个核苷酸以后的靶序列作siRNA模板的设计 ,且GC含量控制在 30 %～ 6 5 %之间。选择了三条序列作为我们实验设计的靶序列并由靶序列设计合成出它们的正、反义寡核苷酸肽模板。由化学合成试剂盒体外合成双链bcl 2siRNA ,纯化并定量后用Cy3红色荧光标记 ,利用脂质siPORT转染试剂将bcl 2siRNA转染入HL 6 0细胞 ,转染 4 8h后收集并固定细胞 ,荧光显微镜下观察转染结果。结果　纯化的siRNA经 2 %琼脂糖凝胶电泳证实其长度为 2 1bp ,说明bcl 2siRNA被成功合成。转染Cy3标记的siRNA 4 8h后的细胞荧光显微镜下经绿色光激发可见较亮的深红色荧光 ,而未转染bcl 2siRNA的细胞仅有微弱的红色自发荧光。结论　体外成功化学合成bcl 2siRNA ,LipidsiPORT转染试剂能将bcl 2siRNA成功转染入白血病细胞HL 6 0中。