高盐诱导左心室舒张功能障碍大鼠心肌Zip13表达增高

目的 探讨锌及锌转运体Zip13在高盐诱导的左心室舒张功能障碍（LVDD）大鼠心肌中的表达及作用机制。方法 将36只Dahl盐敏感大鼠（Dahl salt sensitive rat,DSS大鼠）随机分为模型组（8% 氯化钠高盐饮食,n=22）和对照组（0.3%氯化钠饮食,n=14）。用Vevo 2100小动物超声仪评价各组大鼠心功能;电感耦合等离子体发射光谱法（inductively coupled plasma optical emission spectroscopy, ICP DES）测定血清和心肌组织中锌离子浓度;分别用Western blot和荧光实时定量PCR技术检测心肌中Zip13的蛋白和mRNA表达水平。结果 与对照组相比,模型组左心室后壁舒张末期厚度（LVPWd）、左心室舒张末期内径（LVDd）、舒张末期室间隔厚度（IVSd）、左心室后壁收缩末期厚度（LVPWs）、左心室质量（LVM）以及左心室体重比（LVM/Weight）均显著升高（P＜0.05）。心肌组织中锌离子浓度明显升高,而血清中锌离子浓度明显降低（P＜0.05）;模型组心肌组织中Zip13蛋白和mRNA表达水平均显著升高（P＜0.05）。结论 LVDD大鼠出现了心肌锌离子浓度升高的锌稳态失衡,同时Zip13蛋白和mRNA表达均上调,提示Zip13可能参与了调控和纠正锌稳态失衡,从而实现抑制LVDD心肌重构作用,具体机制有待进一步研究。     

高血压与肥胖引起左心室重构的性别差异

目的探讨高血压与肥胖引起左心室重构的性别差异。方法对2015年7月至2016年12月在天津医科大学总医院心血管内科住院的748例患者进行一项观察性研究。结果入选男413例,女335例。男女性患者的收缩压(SBP)、相对壁厚(RWT)和甘油三酯(TC)的差异无统计学意义。肥胖在男性患者中更常见(75.1%比62.7%,P 0.01)。男性患者中,左心室质量指数(LVMI)与SBP(r=0.241,P=0.000)、舒张压(DBP)(r=0.218,P=0.005)、体重指数(BMI)呈正相关(r=0.105,P=0.025);也与高密度脂蛋白(HDL)(r=0.225,P=0.000)、肌酐呈正相关(r=0.113,P=0.025);与TC、总胆固醇(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、年龄相关性无统计学意义(P0.05)。相对壁厚(RWT)与SBP(r=0.374,P=0.000)、DBP(r=0.328,P=0.000)、BMI呈正相关(r=0.154,P=0.056);也与肌酐(r=0.151,P=0.009)、TC(r=0.179,P=0.018)、TG(r=0.133,P=0.027)、LDL呈正相关(r=0.130,P=0.036);与年龄呈负相关(r=-1.71,P=0.021);与HDL相关性无统计学意义(P0.05)。女性患者中,LVMI与SBP(r=0.353,P=0.000)、DBP(r=0.178,P=0.006)呈正相关;也与年龄(r=0.123,P=0.042)、肌酐(r=0.188,P=0.010)呈正相关;与TC、TG、LDL、HDL、BMI相关性无统计学意义(P0.05)。RWT与SBP(r=0.259,P=0.000)、DBP(r=0.218,P=0.000)、肌酐(r=0.143,P=0.015)呈正相关;与年龄、TC、TG、HDL、LDL、BMI相关性无统计学意义(P0.05)。在男性患者中,RWT高血压组[(0.43±0.06)比(0.40±0.05),P=0.008]和高血压肥胖组[(0.44±0.07)比(0.40±0.05),P=0.007]均显著高于对照组,但肥胖组与对照组的RWT差异无统计学意义;高血压组[(0.43±0.06)比(0.41±0.04),P=0.017]和高血压肥胖组[(0.44±0.07)比(0.41±0.04),P=0.009]均显著高于肥胖组,但高血压组与高血压肥胖组的RWT差异无统计学意义。LVMI肥胖组[(118.4±23.2)比(109.1±23.6),P=0.035]、高血压组[(127.6±32.1)比(109.1±23.6),P=0.006]和高血压肥胖组[(132.4±30.9)比(109.1±23.6),P=0.004]均显著高于对照组;高血压肥胖组显著高于肥胖组[(132.4±30.9)比(118.4±23.2),P=0.006];高血压组和肥胖组、高血压肥胖组的LVMI差异无统计学意义。在女性患者中,RWT高血压组[(0.43±0.06)比(0.39±0.04),P=0.006]和高血压肥胖组[(0.44±0.06)比(0.39±0.04),P=0.005]均显著高于对照组,但肥胖组与对照组的RWT差异无统计学意义;高血压组[(0.43±0.06)比(0.41±0.05),P=0.018]和高血压肥胖组[(0.44±0.06)比(0.41±0.05),P=0.008]均显著高于肥胖组,但高血压组与高血压肥胖组的RWT差异无统计学意义。LVMI高血压组[(123.6±27.8)g/m~2比(97.1±25.7)g/m~2,P=0.006]和高血压肥胖组[(124.6±27.8)g/m~2比(97.1±25.7)g/m~2,P=0.005]均显著高于对照组,但肥胖组与对照组的LVMI差异无统计学意义;LVMI高血压组[(123.6±27.8)g/m~2比(103.4±25.8)g/m~2,P=0.008]和高血压肥胖组[(124.6±27.8)g/m~2比(103.4±25.8)g/m~2,P=0.007]均显著高于肥胖组,但高血压组和高血压肥胖组的LVMI差异无统计学意义。通过二元Logistic回归分析得到,高血压患者发生离心性肥厚的风险是对照组的3.654倍(95%CI=1.665～8.018);高血压患者发生向心性肥厚的风险是对照组的6.943倍(95%CI=2.785～17.310);高血压肥胖患者发生向心性肥厚的风险是对照组的9.940倍(95%CI=4.328～22.827)。结论研究表明,高血压较肥胖更容易诱发左心室肥厚。向心性肥厚和离心性肥厚的患病率在高血压组、肥胖组和高血压肥胖组患者之间有所不同,但均无性别差异。     

阿托伐他汀对大鼠左室心肌细胞瞬时钠通道电流的作用

目的观察阿托伐他汀对正常和模拟缺血大鼠左室心肌细胞瞬时钠通道电流(INa)的作用。方法Wist-ar大鼠30只,用于分离左室心肌细胞。细胞按异体配对原则分为他汀组(阿托伐他汀5μmol/l+乙醇8.575mmol/L)和对照组(乙醇8.575 mmol/L)。采用全细胞膜片钳技术记录INa:测定正常和模拟缺血状态下,用药前和用药后3～5 min的数据;比较标准化INa峰值、半激活电压(V1/2)、激活曲线斜率(k)和衰减时间常数(τ)。结果正常状态下,他汀组用药后在-40 mV、-35 mV和-30 mV测试电位下的标准化INa峰值分别由0.93±0.14,0.92±0.06和0.88±0.08降低至0.68±0.16,0.68±0.17和0.65±0.18(P均<0.01);用药前后V1/2、k不变;用药后在-30 mV、-25 mV和-20 mV测试电位下的τ值(ms)分别由1.22±0.27,1.12±0.23和1.04±0.21延长至1.34±0.33,1.24±0.31和1.17±0.30(P均<0.05)。他汀组用药后对模拟缺血细胞INa的作用和正常细胞的作用相似。对照组对照液使用后不引起INa上述指标的变化。结论阿托伐他汀对正常和模拟缺血状态的大鼠左室心肌细胞的INa均有钠通道阻滞样作用。     

Apelin-13对大鼠缺血心室肌细胞瞬时钠电流的影响

 目的：观察apelin对正常和缺血心室肌细胞瞬时钠电流（INa）的影响以及其对室性心律失常和心脏功能的影响。方法：应用Landgendorff逆灌流系统酶解分离大鼠左室心肌细胞,采用全细胞膜片钳技术观察大鼠左室心肌细胞INa,通过改变电极外液的方法来模拟正常/缺血细胞状态,分正常组（N组）、正常apelin组（N+A组）、缺血组（I组）和缺血apelin组（I+A组）（各组n=10）,分别观察apelin-13对正常/模拟缺血心室肌细胞INa的影响;另建立Langendorff灌流离体缺血大鼠心脏模型分为4组（各组n=4）：N组、N+A组、I组、I+A组,观察apelin-13对各组大鼠离体灌流心脏模型心功能和室性心律失常的影响。结果：Apelin-13（100 nmol/L）在N+A 组和I+A组均能增加INa幅度,I-V曲线分析显示N+A组比N组INa幅度增大32%［（-86±13）pA/pF］,I+A组比I组INa幅度增大18% ［（-52±15）pA/pF］;然而I-V曲线分析Apelin-13并未改变最大传导速度,N、N＋A、I和I+A组分别为（3.2±0.2）pS/pF、（3.1±0.3）pS/pF、（2.9±0.1）pS/pF和（2.8±0.4）pS/pF（P＞0.05）;各组的半激活电压（V1/2）分别为（-21.9±0.6）mV、（-28.7±0.3）mV、（-30.5±0.7）mV和（-36.8±0.2）mV;Boltzmann曲线各组斜率分别为5.6±0.3、 5.1±0.4、 4.3±0.3和4.9±0.6（P＞0.05）;V1/2值N+A组比N组改变（-5.9±0.8）mV,I+A组V1/2比I组改变（-7.7±1.3）mV（P＜0.05）。室性心律失常开始时间、室性心动过速持续时间、心室颤动持续时间及心律失常评分情况,N+A组与N组比较、I+A组与I组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;N+A组LVEDP低于N组,LVDP高于N组,dp/dtmax和dp/dtmin高于N组;I+A组LVEDP低于I组,LVDP高于I组,dp/dtmax和dp/dtmin高于I组;以β-肌动蛋白（β-actin）作为内参照,4组β-actin表达水平差异无统计学意义,4组Na+通道蛋白Vα亚单位的表达灰度值分别为28.8±3.6、 29.4±4.1、 30.1±2.9和31.3±3.8,组间差异无统计学意义。结论：Apelin-13可能是通过改变Na+通道门控特性增加INa峰值,使正常和缺血组心室肌细胞Na+通道更容易开放。Apelin-13对缺血相关室性心律失常无影响,对正常和缺血心肌均有正性肌力作用。     

心室快钠电流在不同模拟缺血时间的变化及阿托伐他汀的作用

目的观察不同模拟缺血时间下大鼠左室心肌细胞快钠电流(INa)的变化规律和阿托伐他汀对该过程的影响。方法 Wistar大鼠共30只,分离左室心肌细胞,分为缺血组(正常→模拟缺血)和他汀组(正常→模拟缺血+5μmol/L阿托伐他汀)。用全细胞膜片钳记录两组正常状态INa(对照),再从模拟缺血3~21 min,每2 min记录1次,检测标准化INa峰值;比较正常和模拟缺血3 min时INa的门控参数。结果①标准化INa峰值(测试电位-40mV):缺血组正常状态下为0.95±0.04,与正常状态比,缺血3 min时增至1.15±0.08(P<0.01)并达峰,9 min和11 min时分别降至0.98±0.12和0.92±0.12(均P>0.05),至21 min时减至0.56±0.13(P<0.01);他汀组在缺血3 min时和正常状态比无差别(分别为0.92±0.12和0.97±0.04,P>0.05)。②门控参数:由正常状态至缺血3min状态,缺血组半激活电压(V1/2,a)、激活曲线斜率(Ka)、半失活电压(V1/2,i)和恢复时间常数(τ)均减小(均P<0.01),失活曲线斜率(Ki)不变;组间比较,他汀组Ki值下降(P<0.05),τ值减小程度弱于缺血组(P<0.05)。结论模拟缺血对INa变化的作用呈时间依赖性;阿托伐他汀可通过改变门控特性来抑制这一达峰过程。     

射血分数保留的心力衰竭大鼠心脏锌积累和内质网应激的诱导

目的在建立射血分数保留心力衰竭(HFpEF)大鼠模型的基础上,检测HFpEF大鼠心肌锌离子浓度及锌转运体Zip14表达的改变以及证实HFpEF大鼠心肌内质网应激和炎症的存在。方法采用达尔盐敏感大鼠(DSS)高盐饮食建立HFpEF动物模型,DSS大鼠随机分为高盐饮食组(HS组)和正常饮食组(NS组)。各组动物均每两周测量一次无创血压和心率,分别在第6周、12周、19周检测两组大鼠的心脏超声指标。麻醉并处死符合HFpEF模型标准以及同时期对照组的大鼠,快速分离左心室心肌并-80℃冰箱保存。应用电感耦合等离子原子发射光谱法(ICP-OES)测定心肌组织的锌离子浓度。RT-fq-PCR和WB分别检测心肌组织锌转运体Zip14的mRNA和蛋白表达水平。研究进一步使用RT-fq-PCR法检测心肌组织内质网应激相关因子ATF6、ATF4、CHOP、Bip和xBPI的mRNA表达水平。WB法检测内质网应激相关因子CHOP、Bip和炎症相关转录因子NF-κB p65的蛋白表达水平。结果在第19周时,与正常饮食组相比,高盐饮食组DSS大鼠的SBP、LVM和LVM/W明显升高,而两组EF比较,差异无统计学意义。HFpEF组大鼠心肌组织的锌离子浓度明显高于对照组。HFpEF组大鼠心肌组织的锌转运体Zip14mRNA和蛋白表达水平明显高于对照组。与对照组相比,HFpEF组大鼠心肌组织的ATF6、ATF4、CHOP、Bip和xBPI的mRNA表达水平明显升高。与对照组相比,HFpEF组大鼠心肌组织的CHOP、Bip和NF-κB p65的蛋白表达水平明显升高。结论 HFpEF大鼠心肌的锌积累与锌转运体Zip14的表达上调、内质网应激以及炎症有一定的相关性,然而,相互之间的具体调节机制有待进一步研究。     

锌在动脉粥样硬化中的抗炎和抗氧化应激作用研究进展

正动脉粥样硬化性心血管疾病是当今死亡的首要病因[1]。脂质代谢紊乱和炎症是动脉粥样硬化发生发展的两大重要机制。降脂治疗已成为治疗动脉粥样硬化的基石,而抗炎治疗对动脉粥样硬化是否有效,尚未达成共识,也是目前研究的热点。最新的临床研究也发现,抗炎治疗能延缓动脉粥样硬化的进展。本文中主要综述锌在动脉粥样硬化形成过程中调脂、抗炎和抗氧化应激作用的研究进展。1锌锌分布于人体的各个器官、组织和体液中,轻中度     

阿托伐他汀对大鼠模拟缺血左室心肌细胞瞬时外向钾电流的作用

目的观察在单细胞水平,阿托伐他汀对大鼠模拟缺血左室心肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的作用。方法 Wistar大鼠32只,酶解获取左室心肌细胞,随机分4组:对照组(正常Ito外液)、他汀组(正常Ito外液+5μmol/L阿托伐他汀)、缺血组(缺血Ito外液)和缺血加他汀组(缺血Ito外液+5μmol/L阿托伐他汀)。采用全细胞膜片钳记录各组正常外液中的基础Ito,灌流不同电极外液,记录灌流后5～20 min的Ito。结果①标准化Ito峰值(测试电位+50 mV):对照组灌流前后无变化;与基础水平比,灌流5 min时,他汀组、缺血组和缺血加他汀组分别减小13.60%±5.74%、17.94%±3.18%和21.87%±4.36%(均P<0.01),三组间两两比较互无差异;灌流5 min后,他汀组和缺血组继续减小;②门控参数:与基础水平比,灌流5 min时,他汀组半激活电压(V1/2,a)增加5.70%±2.43%(P=0.001),半失活电压(V1/2,i)增加16.32%±13.41%(P=0.034);缺血组和缺血加他汀组V1/2,a分别减小6.95%±3.13%和12.56%±5.75%(均P<0.01),V1/2,i分别减小31.80%±14.06%和36.66%±15.52%(均P<0.01),缺血组和缺血加他汀组之间V1/2,a和V1/2,i均无差异,而分别与他汀组比较时,V1/2,a和V1/2,i均存在差异。结论①阿托伐他汀可能有一定的Ito阻滞样作用,并呈时间依赖性减轻;②模拟缺血20 min内Ito持续减小;③5μmol/L阿托伐他汀不影响模拟缺血20 min内的Ito;④阿托伐他汀和模拟缺血对Ito的V1/2,a和V1/2,i作用方向相反。     

地尔硫䓬对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤影响的研究

目的探讨地尔硫䓬对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其机制。 方法33只大鼠随机分为3组：正常对照组（N组）、缺血再灌注组（I-R组）、地尔硫䓬＋缺血再灌注组（D/I-R组）。N组持续灌流K-H液150 min;I-R组K-H液稳定灌流30 min后,结扎前降支30 min,继以K-H液再灌注90 min;D/I-R组给予地尔硫䓬（5 μmo/L）再灌注15 min,继以K-H液再灌流75 min。记录并分析各组大鼠左心室发展压、左心室内压力最大上升/下降速率（±dp/dtmax）、再灌注心律失常评分、心肌梗死面积以及各组左心室心尖组织的线粒体乙醛脱氢酶2（ALDH2）、Bcl-2以及Bax的mRNA基因与蛋白表达水平。 结果（1）左心室发展压D/I-R组再灌注30 min与45 min比I-R组压力明显升高［（92.68±5.09）mmHg vs（75.77±5.33）mmHg;（90.39±4.29）mmHg vs（72.34±7.49）mmHg;1 mmHg=0.133 kPa］,差异均具有统计学意义（F=72.81、51.92,P均=0.001）。（2）±dp/dtmax D/I-R组再灌注30 min与45 min时均比I-R组升高［＋dp/dtmax：（2885.45±286.47）mmHg vs （2063.64±105.57）mmHg;（2712.73±236.52）mmHg vs（2053.64±92.33）mmHg;-dp/dtmax：（2214.55±104.63）mmHg vs （1710.91±217.97）mmHg;（2119.09±84.43）mmHg vs（1544.55±207.72）mmHg］,差异均具有统计学意义（F=64.22、70.55、69.77、54.64,P均=0.001）。（3）N组仅有室性期前收缩的发生,未发生心室颤动、室性心动过速;D/I-R组出现室性期前收缩的个数较N组增加,差异具有统计学意义（P=0.001）;I-R组室性心动过速发生率高于D/I-R组,心室颤动时程与室性心动过速时程均较D/I-R组增加,差异具有统计学意义（P=0.013、0.049、0.001）;再灌注心律失常评分I-R组评分［5（3,6）,57.36］高于D/I-R组［3（1,4）,34.77］,差异具有统计学意义（P=0.001）。（4）心肌梗死面积I-R组高于D/I-R组［（55.51±1.43）% vs （17.01±1.13）%］,差异具有统计学意义（P<0.01）。（5）I-R组线粒体ALDH2表达明显减少。D/I-R组线粒体ALDH2表达与I-R组比较减少,但差异无统计学意义（P=0.11）,Bcl-2、Bax的表达均增加,D/I-R组Bcl-2/Bax的比值较I-R组增大（0.44 vs 0.22）,差异具有统计学意义（P=0.001）。 结论地尔硫䓬处理后能够减少缺血再灌注损伤。其保护作用机制之一可能是通过上调Bcl-2下调Bax的基因和蛋白表达,减少心肌细胞的凋亡,但其并不是通过上调线粒体ALDH2的基因与蛋白来实现。