大鼠椎间盘纤维环细胞的培养及鉴定

背景：目前关于椎间盘纤维环细胞的培养方面还没有形成统一的标准,导致实验的操作性和重复性存在缺陷。 目的：通过对椎间盘纤维环细胞的体外培养,观察细胞的演变,以期为组织工程研究椎间盘纤维环提供方法和体外模型。 方法：采用酶消化法分离SD大鼠椎间盘纤维环细胞,进行单层培养,实验在原代培养中使用体积分15%胎牛血清的DMEM培养基,细胞传代培养一代后可换成体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基。倒置相差显微镜观察其形态结构和生物学特性,通过甲苯胺蓝染色和免疫细胞化学染色等方法对其细胞表型进行鉴定。 结果与结论：培养的椎间盘纤维环细胞形态为圆形或梭形;原代细胞生长较慢,传代细胞生长增快;细胞具有甲苯胺蓝易染性;免疫细胞学方法检测表明纤维环细胞有Ⅰ,Ⅱ型胶原表达。结果证实,实验成功在体外培养了大鼠椎间盘纤维环细胞。     

芍药苷促椎间盘纤维环细胞增殖的作用

背景：芍药在颈椎病治疗中使用频率超过30%,其主要单体之一芍药苷具有抗炎、抗凋亡等作用,芍药苷对椎间盘纤维环细胞是否有保护作用,国内外未见报道。 目的：探讨芍药苷对椎间盘纤维环细胞的增殖和保护作用。 方法：采用酶消化法体外培养椎间盘纤维环细胞。取第3代纤维环细胞,培养过程中加入20 μg/L Fas配体诱导建立纤维环细胞凋亡模型,通过MTT法测定芍药苷干预纤维环细胞的最适宜浓度,Annexin V/FITC-PI法观察芍药苷对椎间盘纤维环细胞的保护作用。 结果与结论：芍药苷浓度20.8和2.08 μmol/L对椎间盘纤维环细胞具有明显的促增殖作用。20 μg/L Fas配体能诱导细胞凋亡,20.8 μmol/L芍药苷对Fas配体诱导椎间盘纤维环细胞有保护作用。     

电针后海穴对自闭症模型大鼠学习和记忆能力的影响

目的观察电针后海穴对自闭症模型大鼠学习和记忆能力的影响。方法采用孕鼠腹腔注射丙戊酸钠(VPA)的方法建立自闭症大鼠模型,分为模型组、非穴组、电针组,每组10只,电针组针刺模型大鼠的后海穴,连接电针仪,施以连续波,频率2 Hz,时间20 min,每日1次,连续治疗20天;非穴组选取大鼠右侧胁下固定非经非穴点;模型组在同等条件下饲养,不予任何干预;应用Morris水迷宫观察3组大鼠学习记忆能力。结果与模型组比较,电针组、非穴组的逃避潜伏期和原平台象限游泳路程/总路程有显著性差异(P<0.05);与非穴组比较,电针组的逃避潜伏期和原平台象限游泳路程/总路程有显著性差异(P<0.05)。结论电针后海穴可改善自闭症模型大鼠的学习和记忆能力。     

靳三针联合行为干预法治疗学龄前轻中度孤独症谱系障碍CSCD

目的:观察靳三针联合行为干预法对学龄前轻中度孤独症谱系障碍(ASD)患儿核心症状及焦虑障碍的临床疗效。方法:选择2018年1—12月在福建省妇幼保健儿童保健中心就诊的轻中度学龄前ASD患儿109例,采用Excel软件Rand函数分为对照组和观察组,分别54例和55例。对照组采取应用行为分析疗法结合结构化教育方式治疗,2~4 h/d,持续治疗3个月;观察组在对照组基础上接受“靳三针”针刺疗法,主穴选择四神针、智三针、颞三针、定神针,并根据ASD中医辨证分型进行配穴加减,5 d/周,1个月/疗程,共持续治疗3个月。分别于治疗前和治疗3个月后,采用孤独症行为评定量表(ABC)评估患儿孤独症行为;采用儿童孤独症评定量表(CARS)评估ASD患儿严重程度;采用社会反应量表(SRS)评估ASD患儿的社会交往能力;采用《学前儿童焦虑量表(中文版)》评估ASD患儿焦虑状况。结果:(1)ABC、CARS评分:与治疗前比较,2组治疗后ABC总分及各因子得分和CARS总分均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,观察组治疗后ABC总分、社会交往因子得分和语言因子得分均明显更低(P<0.05)。(2)SRS评分:与治疗前比较,2组治疗后SRS总分及各因子得分均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,观察组治疗后社交认知得分、社交沟通得分、社交动机得分、孤独症行为方式得分及SRS总分均明显更低(P<0.05)。(3)焦虑障碍评分:与治疗前比较,对照组治疗后躯体伤害恐惧得分、社交恐惧得分和广泛性焦虑得分均明显降低(P<0.05),观察组治疗后焦虑总分及各因子得分均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,观察治疗后组焦虑总分及各因子(除分离焦虑外)得分均明显更低(P<0.05)。结论:靳三针联合行为干预法可以减轻学龄前轻中度ASD患儿核心症状,提高其社会交往能力,改善其焦虑障碍,值得临床推广应用。     

外周躯体感觉神经元与孤独症谱系障碍关系研究进展

孤独症谱系障碍(ASD)的发病率在全球范围内呈逐年上升趋势,已成为全球性的公共卫生问题.近年来,诸多研究表明外周躯体感觉神经元功能障碍与ASD发病存在密切关系.文章总结归纳外周躯体感觉神经元与ASD关系的国内外研究现状,主要从躯体感觉神经元功能与人体生长发育的关系、ASD患者的躯体感觉障碍、ASD躯体感觉障碍的主要影响...     

Treatment of inflammatory bowel disease with Chinese drugs administered by both oral intake and retention enema

Objective：To study the clinical effect of Chinese drugs administered by both oral intake and retention enema on inflammatory bowel diseases（IBD）.Methods：Adopting a randomized controlled design,78 patients were assigned to three groups：26 patients in group A treated with Chinese drugs given by both oral intake and retention enema,27 in group B with Chinese drugs given by retention enema only,and 25 in group C with given Western medicine.The changes before and after a 30-day treatment of the patients＇ symptoms （including diarrhea,abdominal pain,mucous or pus-bloody stool）,colonoscopic examination scores and histopathology of the colonic membrane were observed.Results：Group A showed the best outcomes in all the aspects of clinical comprehensive effectiveness.Improvements in the main symptoms,colonoscopic scores and histopathology of the colonic membrane were significantly different from those in groups B and C,respectively （P〈0.05）.Meanwhile comparisons between groups B and C showed insignificant differences（P〉0.05）; group B was better in ameliorating tenesmus（P〈0.05）.Conclusion：Through the use of Chinese drugs administered by both oral intake and retention enema to treat IBD,which combined external-internal therapies for both overall regulation and local managment,it was confirmed that the Chinese medicine could embody the therapeutic principle of attending to both disease-diagnosis and syndrome-differentiation.     

大鼠椎间盘纤维环细胞的培养及鉴定

背景:目前关于椎间盘纤维环细胞的培养方面还没有形成统一的标准,导致实验的操作性和重复性存在缺陷。目的:通过对椎间盘纤维环细胞的体外培养,观察细胞的演变,以期为组织工程研究椎间盘纤维环提供方法和体外模型。方法:采用酶消化法分离SD大鼠椎间盘纤维环细胞,进行单层培养,实验在原代培养中使用体积分15%胎牛血清的DMEM培养基,细胞传代培养一代后可换成体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基。倒置相差显微镜观察其形态结构和生物学特性,通过甲苯胺蓝染色和免疫细胞化学染色等方法对其细胞表型进行鉴定。结果与结论:培养的椎间盘纤维环细胞形态为圆形或梭形;原代细胞生长较慢,传代细胞生长增快;细胞具有甲苯胺蓝易染性;免疫细胞学方法检测表明纤维环细胞有Ⅰ,Ⅱ型胶原表达。结果证实,实验成功在体外培养了大鼠椎间盘纤维环细胞。     

芍药苷促椎间盘纤维环细胞增殖的作用

背景:芍药在颈椎病治疗中使用频率超过30%,其主要单体之一芍药苷具有抗炎、抗凋亡等作用,芍药苷对椎间盘纤维环细胞是否有保护作用,国内外未见报道。目的:探讨芍药苷对椎间盘纤维环细胞的增殖和保护作用。方法:采用酶消化法体外培养椎间盘纤维环细胞。取第3代纤维环细胞,培养过程中加入20μg/LFas配体诱导建立纤维环细胞凋亡模型,通过MTT法测定芍药苷干预纤维环细胞的最适宜浓度,AnnexinV/FITC-PI法观察芍药苷对椎间盘纤维环细胞的保护作用。结果与结论:芍药苷浓度20.8和2.08μmol/L对椎间盘纤维环细胞具有明显的促增殖作用。20μg/LFas配体能诱导细胞凋亡,20.8μmol/L芍药苷对Fas配体诱导椎间盘纤维环细胞有保护作用。     

Survivin反义核酸诱导肝癌细胞凋亡及降低化疗药物耐药的研究

目的构建Survivin反义核酸真核表达载体(anti-pcDNA3-svv),探讨其对肝癌细胞的凋亡诱导作用及降低化疗耐药的机制。方法采用Survivin反义核酸瞬时电转染法转染肝癌细胞系Skov3,筛选出阳性细胞株。以Western-blot检测生存素蛋白的表达,用流式细胞仪检测其对Skov3的凋亡诱导作用,并检测实验组细胞(Skov3-SVVanti)MDR-1mRNA的表达。结果稳定表达an-ti-pcDNA3-svv的Skov3-SVVanti其生存素蛋白表达比未转染者明显降低,Skov3-SVVanti组细胞流式细胞仪检测显示其凋亡率为19%。Skov3-SVVanti组MDR-1mRNA表达较Skov3组明显减少(P0.01)。结论 Survivin反义核酸可诱导肝癌细胞凋亡,并通过降低MDR-1mRNA表达,降低化疗药物耐药性。     

粒细胞集落刺激因子促进自体骨髓单个核细胞向急性肝损伤小鼠肝脏迁移的实验研究

目的 探索粒细胞集落刺激因子促进自体骨髓单个核细胞向急性肝损伤小鼠肝脏迁移的作用.方法 以红色荧光染料PKH26标记从小鼠骨髓中分离出的骨髓单个核细胞,从小鼠的尾静脉注入同种异体的CCL4-AAF造成肝损伤的小鼠体内,移植2周后取肝组织.通过荧光显微镜观察实验组及对照组小鼠骨髓干细胞向肝脏迁移的情况.结果 两组小鼠的肝小叶中央静脉及汇管区均可见新牛的肝细胞,PKH26标记阳性的细胞在实验组20倍镜下每张切片平均为(102.76±37.304)个,在对照组平均(53.84±29.987)个(P＜0.05).结论 重组粒细胞集落刺激凶子可以促进骨髓单个核细胞向急性肝损伤小鼠的肝脏迁移.