宫颈癌细胞辐射敏感性与IER5基因的关系

摘 要：［目的］ 通过RNA干扰技术致基因沉默和基因过表达的方法研究IER5基因与宫颈癌SiHa细胞系辐射敏感性的相关性,探讨IER5基因不同表达的细胞系对辐射敏感性的差异。［方法］ 构建IER5沉默及过表达的真核表达载体,转染细胞并筛选出稳定表达的细胞系,经Western Blot和Real-time PCR鉴定成功。观察IER5基因不同表达的3种细胞系的形态;对细胞系进行4Gy的辐射后使用CCK-8检测细胞生长曲线;对细胞系进行10Gy的辐射后使用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;对细胞系进行4Gy的辐射后使用流式细胞仪检测不同时间点细胞周期的情况。［结果］ IER5基因沉默使SiHa细胞略有增大,照射后的细胞增殖速度加快;而其过表达可使SiHa细胞缩小呈圆形,并且细胞增殖速度有所减慢。IER5沉默导致辐射诱导的SiHa细胞凋亡率降低,过表达可促进辐射诱导的SiHa细胞凋亡,其凋亡在照射后48h最为显著。照射后细胞周期的G2-M期阻滞效应随IER5表达含量的降低而升高,IER5基因沉默促进细胞的增殖分裂。［结论］ IER5基因与宫颈癌SiHa细胞的增殖、凋亡和细胞周期的变化及对辐射的反应有明显相关性,IER5基因可能可提高宫颈癌细胞对放射的敏感性。     

清肺养阴汤治疗急性放射性肺炎

笔者采用中西结合治疗急性放射性肺炎,疗效比较满意,现报道如下.     

激素替代治疗对绝经后Ⅱ型糖尿病和高血压患者肾脏微血管病变的影响

目的 :探讨激素替代治疗对绝经后Ⅱ型糖尿病和高血压患者肾脏微血管病变的影响。方法 :36例患有Ⅱ型糖尿病和高血压的绝经后妇女随机分为治疗组和安慰剂组各 18例 ,采用双盲法予口服克龄蒙或安慰剂 1片 /日 ,共 4 5个周期 ,测量用药前后各参数值并进行比较及线性相关分析。结果 :治疗组用药前后 2 4小时尿蛋白定量由 ( 0 4 45± 0 0 36 )g降到 ( 0 36 1± 0 0 32 ) g(P <0 0 1) ,内生肌酐清除率由 ( 92 0± 5 2 )ml/min增到 ( 99 1± 4 8)ml/min (P <0 0 5) ,空腹血糖由 ( 7 0 2± 0 4 3)mmol/L降到 ( 6 55± 0 31)mmol/L(P <0 0 5) ,血清总胆固醇由 ( 6 6 6±0 2 8)mmol/L降到 ( 5 71± 0 71)mmol/L(P <0 0 1) ,血压无明显改变。 2 4小时尿蛋白定量和内生肌酐清除率与其他参数间无显著相关性。安慰剂组用药前后各项指标无明显改变。结论 :激素替代治疗对绝经后Ⅱ型糖尿病和高血压患者肾脏微血管病变有改善作用     

乳腺癌内分泌治疗及其对女性生殖器官的影响

现有研究表明,乳腺癌大多为激素依赖性肿瘤.因此,内分泌治疗就成为乳腺癌系统综合治疗的重要组成部分. 三苯氧按(Tamoxifen,TAM)竞争性地与体内雌激素受体(ER)结合,拮抗雌激素作用,用于激素受体依赖型乳腺癌的内分泌治疗已经有20余年的历史.     

子宫内膜癌158例临床病理分析

目的 探讨子宫内膜癌的临床、病理特点、诊治方法及预后因素。方法 对我院1991－1995年收治的158例子宫内膜癌患者进行临床病理分析，并全部随访。结果 158例平均发病年龄53.14岁，平均绝经年龄48.83岁，绝经后患者占52.53%，主要表现为绝经后阴道出血。绝经前组主要表现为阴道不规则出血。手术－病理分期Ⅰ期占77.22%，5年生存率为96.04%；Ⅱ期占13.29%，5年生存率为93.75%；Ⅲ期占8.23%，3年生存率为69.23%；Ⅳ期占1.27%，3年生存率为0。结论 重视子宫内膜癌发病相关因素及临床症状，争取早期诊断，严格手术病理分期，采用手术加放疗等方法提高疗效。     

PBL结合CBL教学法在住院医师临床思维能力培养中的应用

为了促进住院医师尽快实现从医学生向临床医生的转变,在住院医师培训中,尝试应用以问题为基础的教学法(PBL)和案例教学法(CBL)相结合的教学模式。实践证明可以激发住院医师学习的主动性和积极性,提高住院医师分析问题和解决问题的能力,培养住院医师的临床思维能力,在实际教学中收到了良好的效果。     

HMGB2沉默对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡及侵袭迁移的影响

目的 探讨HMGB2沉默对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡及侵袭迁移的影响。方法 采用将靶向HMGB2的寡核苷酸克隆至pLKO.1 puro载体质粒构建靶向沉默HMGB2表达的慢病毒shRNA。将MDA-MB-231细胞分为对照组、空转染组及HMGB2干扰组,其中空转染组及HMGB2干扰组分别转染包含随机序列shRNA和靶向HMGB2 shRNA的病毒液,对照组仅行常规培养而不行任何转染。采用Western blotting检测各组转染48 h后的HMGB2蛋白水平以评价转染效率,采用MTT法计算各组细胞的存活率,流式细胞术检测转染48 h后的细胞凋亡率,Transwell法检测转染48 h后的细胞侵袭和转移水平。结果 HMGB2干扰组的HMGB2蛋白水平低于对照组和空转染组,差异有统计学意义（P＜0.05）,提示构建的载体沉默HMGB2的效果显著。与对照组和空转染组比较,HMGB2干扰组的细胞存活率降低,且随着转染时间的延长而呈降低趋势,差异均有统计学意义（P＜0.05）;HMGB2干扰组细胞的早期、晚期及总凋亡率均高于其余两组,且侵袭细胞数目和迁移细胞数目均低于其余两组,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 shRNA靶向沉默MDA-MB-231细胞中HMGB2表达效果显著,可抑制细胞增殖及侵袭迁移并诱导细胞凋亡,为乳腺癌靶向治疗提供一定参考。     

尿路上皮癌相关1基因通过竞争性抑制miR-18a增强乳腺癌细胞的他莫昔芬治疗耐药

目的：探讨尿路上皮癌相关1（urothelial carcinoma-associated 1,UCA1）基因及miR-18a在雌激素受体（estrogen receptor, ER）阳性的乳腺癌细胞他莫昔芬耐药中的作用和调控机制。方法： 通过反转录实时定量PCR测定乳腺癌细胞中UCA1和miR-18a的表达,用双荧光素酶报告实验验证miR-18a和UCA1 3′UTR区域结合。在他莫昔芬敏感的MCF-7细胞中过表达UCA1或敲减miR-18a,在他莫昔芬耐药的LCC9和BT474细胞中敲减UCA1或过表达miR-18a,CCK-8方法测定细胞活力,软琼脂克隆形成实验测定细胞克隆形成能力,流式细胞术测定细胞周期。结果： 他莫昔芬耐药的LCC2、LCC9和BT474细胞中,UCA1表达量显著高于他莫昔芬敏感的MCF-7细胞。MCF-7细胞在0.1 μmol/L 他莫昔芬处理后,UCA1的表达水平显著升高。UCA1过表达提高了MCF-7细胞在他莫昔芬处理后的活力,而UCA1 siRNA则显著降低了LCC9和BT474细胞在他莫昔芬处理后的活力。在MCF-7细胞中,相对于质粒对照+他莫昔芬组,UCA1+他莫昔芬组的克隆数目多19.0%,克隆平均大小增加29.0%,G1期细胞比例减少7.3%,S期细胞增加6.7%。在BT474细胞中,相对于siRNA对照+他莫昔芬组,si-UCA1+他莫昔芬组的克隆数目少54.0%,克隆平均大小减少42.0%,G1期细胞比例增加9.0%,S期细胞减少6.2%。UCA1有一个miR-18a结合位点,敲减miR-18a提高了MCF-7细胞在他莫昔芬处理后的活力,过表达miR-18a则显著降低了BT474细胞在他莫昔芬处理后的活力。在MCF-7细胞中,相对于对照+他莫昔芬组,miR-18a抑制+他莫昔芬组的克隆数目多15.0%,克隆平均大小增加33.0%,G1期细胞比例减少8.8%,S期细胞增加5.3%。在BT474细胞中,相对于对照+他莫昔芬组,miR-18a过表达+他莫昔芬组的克隆数目少47.0%,克隆平均大小减少25.0%,G1期细胞比例增加13.3%,S期细胞减少7.9%。结论： UCA1可以通过竞争性抑制miR-18a增强乳腺癌细胞的他莫昔芬治疗耐药。     

鹿鳖汤治疗乳腺囊性增生症56例临床观察

目的:观察鹿鳖汤治疗乳腺囊性增生症的疗效.方法:以鹿鳖汤治疗乳腺囊性增生症56例,观察疗效.结果:治疗总有效率96.4%.结论:乳腺囊性增生症的中医本质是气滞痰疑血瘀,鹿鳖汤疏肝理气,活血化瘀,化痰散结,治疗乳腺囊性增生症具有良好疗效.     

超微粉碎对虎杖膏透皮吸收和流变性的影响

目的研究超微粉碎对虎杖膏透皮吸收和流变性的影响。方法采用普通粉碎和超微粉碎工艺制备虎杖普通粉和虎杖超微粉,再分别制成虎杖膏和超微虎杖膏;以离体小鼠皮肤为屏障,采用改良Franz扩散池法进行透皮吸收实验,以虎杖苷、白藜芦醇、大黄素为考察指标比较虎杖膏和超微虎杖膏体外经皮渗透性的差异;以表观黏度、屈服应力为指标,采用旋转流变仪测定,比较虎杖膏和超微虎杖膏流变性的差异。结果虎杖普通粉和超微粉的d_(0.9)分别为(210.011±3.468)、(63.496±2.570)μm,径距分别为5.412±0.055、2.913±0.117。虎杖膏中虎杖苷、白藜芦醇和大黄素的累积透过量分别为(2.100 3±0.154 5)、(2.114 5±0.341 6)、(6.210 4±0.750 0)μg/cm~2,透皮速率分别为(0.175 3±0.022 6)、(0.234 0±0.020 2)、(0.337 4±0.051 6)μg/(cm~2·h);超微虎杖膏中虎杖苷、白藜芦醇和大黄素的累积透过量分别为(14.247 9±4.875 0)、(4.399 3±0.628 7)、(6.768 6±0.728 6)μg/cm~2,分别比虎杖膏提高6.8、2.1、1.1倍,透皮速率分别为(0.815 9±0.277 1)、(0.313 2±0.043 0)、(0.393 7±0.042 6)μg/(cm~2·h),分别比虎杖膏提高4.7、1.3、1.2倍。虎杖膏和超微虎杖膏的表观黏度分别为34.940、8.865 Pa·s,屈服应力分别为41.211、7.381 Pa。结论超微虎杖膏与虎杖膏相比透皮吸收效果更优,且膏体细腻,黏稠度和屈服应力更小,涂展性更好。