缺氧对肾癌细胞STC1、HIF-1α及线粒体膜电势稳定影响的研究

目的检测缺氧条件下肾癌细胞斯钙素蛋白l（STCl）及线粒体膜电势稳定指标的变化,结合细胞增殖和Ca2＋水平,初步探讨肾癌细胞可能的抗乏氧机制。方法分别使用50μmol／L、100μmol／L、150μmol／L的CoCl2干预细胞培养基构建化学性缺氧模型;MTT法检测细胞生长情况,荧光分光光度法检测细胞内Ca2＋水平和线粒体膜电位（△ψm）,紫外分光光度计测MPTP,RT-PCR检测STCl、HIF-1α的基因表达情况。结果与对照组相比,缺氧能显著抑制细胞增殖,促进细胞内Ca2＋水平上升（P〈0．05）;缺阜可使MPTP开放度增加、△ψm减低（P〈0．05）,且此时细包内STCl、HIF-1α的基因表这脯（P〈0．05）;以上变化均随着缺氧程度的加剧而逐渐增大。结论缺氧条件下STCl、HIF-1α对Ca2＋的负调控可能有利于肾癌细胞线粒体膜电势稳定,对肾癌细胞起保护作用。     

京尼平对激素非依赖性前列腺癌裸鼠模型的抑瘤作用研究

目的建立激素非依赖性前列腺癌裸鼠模型,评价京尼平的抗肿瘤作用,并探讨其可能的治疗机制。方法采用颈背部皮下种植肿瘤细胞的方法建立激素非依赖性前列腺癌裸鼠模型,随机分为京尼平低、中、高剂量组及对照组;分别给予20 mg/kg、40 mg/kg、80mg/kg京尼平灌胃及生理盐水灌胃;测量裸鼠体质量、肿瘤体积并计算抑瘤率,流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡情况。聚合酶链反应检测解偶联蛋白2(UCP2)的基因表达情况。结果各组裸鼠肿瘤体积在干预前比较差异均无统计学意义(P均>0.05);京尼平能显著抑制肿瘤生长,并随着给药浓度的增高,肿瘤生长抑制率、增殖抑制作用及凋亡率逐渐增高;京尼平能抑制肿瘤细胞中UCP2的表达,中、高剂量组UCP2的基因及蛋白的表达显著低于低剂量组及对照组(P均<0.05)。结论京尼平对激素非依赖性前列腺癌裸鼠模型有明显的抑瘤作用,其作用机制可能与抑制UCP2的表达有关。     

斯钙素蛋白-1和缺氧诱导因子-1α的相互作用对肾癌细胞线粒体膜电势稳定的影响

目的 研究斯钙素蛋白-1(STC-1)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)相互作用后的调钙功能对肾癌细胞线粒体膜电势稳定的影响。方法 构建高表达HIF-1α的肾癌细胞模型,采用不同浓度STC-1蛋白分别干预荷基因肾癌细胞和单纯肾癌细胞,MTT法检测细胞增殖,RT-PCR和ELISA法检测细胞内HIF-1α和STC-1的基因及蛋白表达情况,荧光探针检测细胞内Ca²⁺变化,荧光分光光度计检测线粒体膜电位(Δψm),紫外分光光度计检测线粒体通透性转换孔(mPTP)。结果 HIF-1α基因转染、STC-1干预及基因转染后再STC-1干预3种方式均可提高Δψm,降低细胞内Ca²⁺和mPTP水平,促进细胞增殖(P均＜0.05),以上结果可随着STC-1浓度的增加而逐渐增强,但细胞增殖率的升高趋势却逐渐减缓。结论 HIF-1α可能通过促进STC-1表达,下调Ca²⁺水平,从而稳定线粒体膜电势来参与肾癌细胞的恶性增殖,但此作用亦因外源性STC-1对HIF-1α的抑制而逐渐减弱。     

线粒体解偶联蛋白2在京尼平促进肾癌细胞抑制作用中的研究

目的:探讨京尼平(Genipin)对肾癌是否有治疗作用,该治疗作用是否与线粒体解偶联蛋白2(UCP2)相关?方法:将0?40?80和120 μmol/L 4种浓度的Genipin溶液分别浸染肾癌细胞48 h,MTT法和流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡情况;聚合酶链反应和ELISA方法检测UCP2的基因和蛋白表达;使用荧光探针检测细胞内钙离子和活性氧分子(ROS)含量?结果:Genipin在中?高剂量组能明显抑制肾癌细胞的增殖并促进细胞的凋亡,随着给药浓度的增加,细胞增值抑制作用及细胞凋亡率逐渐增高(P < 0.005)?Genipin能抑制肾癌细胞中UCP2的表达,在中?高剂量给药组,UCP2的基因及蛋白的表达显著抑制(P < 0.05)?Genipin能提高细胞内钙离子和ROS的含量,在中?高剂量给药组出现了显著提高(P < 0.05)?结论:Genipin能明显抑制肾癌细胞的增殖,促进其凋亡,UCP2可能参与其作用机制?     

京尼平特异性抑制线粒体解偶联蛋白2对肾癌细胞抑制作用的研究

目的探讨京尼平(genipin)对肾癌是否有治疗作用。方法将0μmol/L、40μmol/L、80μmol/L和120μmol/L四种浓度的genipin溶液分别浸染肾癌细胞48h,MTT法检测细胞的增殖情况;聚合酶链反应检测UCP2的基因表达。使用荧光探针检测细胞活性氧分子(ROS)含量。结果genipin在中、高剂量组能明显抑制肾癌细胞的增殖,随着给药浓度的增加,细胞增值抑制作用逐渐增高(P<0.005)。genipin能抑制肾癌细胞中UCP2的表达,在中、高剂量给药组,UCP2的基因及蛋白的表达显著抑制(P<0.05)。genipin能提高细胞内ROS的含量,在中、高剂量给药组ROS含量均显著提高(P<0.05)。结论genipin能明显抑制肾癌细胞的增殖,促进其凋亡,UCP2可能参与其作用机制。     

心理干预对参与保卫大型运动会武警官兵心理健康水平影响的观察

目的:观察心理干预对参与保卫大型运动会(参与保卫)武警官兵心理健康水平的影响。方法:采用症状自评量表(SCL-90)和状态-特质焦虑问卷(ST-AI)对参与保卫武警某部官兵118例的心理健康水平进行测评,并与中国成人常模比较。结果:参与保卫武警官兵SCL-90总分、SCL-90总平均分、强迫症状、人际关系敏感、抑郁、焦虑和恐怖因子分值均显著或非常显著低于未参与保卫武警官兵(P<0.05,P<0.01)。参与保卫武警官兵SCL-90总分、SCL-90总平均分、强迫症状、人际关系敏感、抑郁、焦虑和偏执因子分值均显著或非常显著低于中国成人常模(P<0.05,P<0.01)。状态焦虑量表(S-AI)总分和特质焦虑量表(T-AI)总分分值与中国成人常模比较,差异均不显著(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,S-AI总分与T-AI总分呈非常显著正相关(P<0.01);T-AI总分与SCL-90总平均分呈非常显著负相关(P<0.01);文化程度与年龄呈显著负相关(P<0.05);年龄与SCL-90总平均分呈非常显著正相关(P<0.01)。多元逐步回归分析结果显示,年龄和T-AI总分进入以SCL-90总平均分为因变量的回归方程。结论:参与保卫武警官兵心理健康水平受特质-焦虑和年龄因素影响,心理干预可提高参与保卫武警官兵心理健康水平。     

美沙酮、丁丙诺啡对海洛因吸食者精液质量的影响

海洛因对人体生殖功能、精子质量及形态有较大毒性,目前海洛因吸食者的戒断治疗主要为丁丙诺啡舌下含服、美沙酮口服的维持治疗。美沙酮可对男性生殖功能及精子发育产生毒副作用,丁丙诺啡对人体性腺轴产生一定影响。但目前尚未见美沙酮、丁丙诺啡对海洛因吸食者精液损害的对比分析报道。海洛因吸食者越来越年轻化,很多吸食者尚未生育。本研究分别对美沙酮、丁丙诺啡维持治疗的海洛因青年男性吸食者的精液进行检测,并与正常青年男性对比,观察二者在戒断治疗中对精液质量的影响。     

STC-1蛋白对肾癌细胞生长平衡影响机制探讨

目的：研究斯钙素1（stanniocalcin1,STC-1）与缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α）的相互作用,是否借助调节Ca2＋水平参与肾癌细胞生长调控。方法：构建高表达HIF-1α的肾癌细胞模型,使用不同浓度STC-1蛋白干预转染后的肾癌细胞（转染组）和单纯肾癌细胞（非转染组）。MTT法检测各组细胞增殖情况;RT-PCR及ELISA法检测细胞内HIF-1α、STC-1基因及蛋白表达;荧光分光光度计检测细胞内Ca2＋水平。结果：非转染组和转染组肾癌细胞HIF-1α蛋白表达分别为8.3±1.2和15.1±0.9,t=24.18,P〈0.001;STC-1蛋白表达分别为7.2±0.9和10.8±1.1,t=8.90,P=0.003;提示转染HIF-1α的肾癌细胞内HIF-1α和STC-1表达显著提高。不同浓度STC-1溶液干预非转染组肾癌细胞24h后,对照组HIF-1α蛋白表达为8.3±0.5,低剂量组为7.8±0.7,中剂量组为5.3±0.4,高剂量组为4.2±0.3,F=171.726,P〈0.001,对照组STC-1蛋白表达为7.1±0.4,低剂量组为6.8±0.3,中剂量组为4.1±0.2,高剂量组为3.3±0.4,F=257.174,P〈0.001;对照组细胞内Ca2＋含量为95.7±8.6,低剂量组为60.3±5.5,中剂量组为48.6±6.3,高剂量组为33.7±4.2,F=198.931,P〈0.001,对照组细胞增殖活性为0.226±0.021,低剂量组为0.343±0.024,中剂量组为0.293±0.018,高剂量组为0.252±0.023,F=23.615,P〈0.001;不同浓度STC-1溶液干预转染组肾癌细胞24h后,对照组HIF-1α蛋白表达为15.3±1.6,低剂量组为14.6±1.1,中剂量组为10.1±0.9,高剂量组为8.6±0.8,F=135.696,P〈0.001,对照组STC-1蛋白表达为11.2±0.4,低剂量组为10.9±0.5,中剂量组为7.4±0.7,高剂量组为5.6±0.8,F=105.101,P〈0.001;对照组细胞内Ca2＋含量为65.5±6.7,低剂量组为40.1±3.4,中剂量组为30.7±4.6,高剂量组为17.7±3.3,F=136.621,P〈0.001;对照组细胞增殖活性为0.295±0.033,低剂量组为0.446±0.025,中剂量组为0.379±0.015,高剂量组为0.313±0.022,F=45.571,P〈0.001。提示STC-1蛋白可促进单纯肾癌细胞和转染后肾癌?