黄曲霉毒素B1诱发树鼩肝癌过程中的差异表达蛋白质分析及意义

目的比较黄曲霉毒素B1(AFB1)诱发的树鼩肝细胞癌生长不同阶段的蛋白质表达谱的改变,筛查在AFB1诱发的肝癌发生发展中起重要作用的关键蛋白质分子.方法用双向电泳(2-DE)及基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱法(MALDI-TOF-MS/MS)对同一动物自身的癌发生前肝组织(A45W),癌发生后的肝癌组织(ACa)及未经AFB1处理的对照组动物肝组织(E45W)进行了相互比较.结果A45W组、ACa组、E45W组分别平均检测到(1 255±43)个蛋白点(n=3)、(1 198±50)个蛋白点(n=3),和(1 252±40)个蛋白点(n=3),以其中A45W组图谱为参考胶,ACa组、E45W组分别与其匹配的平均匹配点数为(818±39)个(n=3)和(777±45)个(n=3),平均匹配率分别为66%和62%.癌与癌前比(ACa vs A45W),相差2倍以上的上调点和下调点分别为108个(包括癌特异点)和75个;癌前与未经AFB1处理的对照组比(A45W vs E45W),相差2倍以上的上调点有78个,下调点有21个.质谱可鉴定出不均一核糖核蛋白A1、不均一核糖核酸核蛋白A2/B1、peroxiredoxin 1、peroxiredoxin 2、膜联蛋白4、肌球蛋白α链等26种胶内差异蛋白质.结论在AFB1诱发的树鼩肝癌发生不同阶段有明显的差异性蛋白表达谱,为进一步对人肝癌蛋白质组的研究提供了线索.     

Peroxiredoxin Ⅱ研究进展

peroxiredoxins（prxs）蛋白是新近发现的一类过氧化物酶,属于抗氧化蛋白超家族,广泛存在于原核生物和真核生物中。该家族第1个被发现的蛋白是来源于酵母菌的25kD蛋白质,命名为巯基特异性抗氧化酶。哺乳动物的Prxs家族包括6个成员,即prxⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ。prxs家族的所有蛋白均在N-端具有保守的半胱氨基酸（cys）残基,部分蛋白在C-端也有保守的cys残基。根据各成员间的同源性和cys残基的数目,prxs家族蛋白可分为3个亚类,即2-cys Prx（prxⅠ～Ⅳ）,非典型2-Cys prx（prxV）和1-cys prx（prx Ⅵ）。     

基于MRI及IMRT下的鼻咽癌新T分期研究

目的 建立一个基于MRI并与IMRT相适应的鼻咽癌新T分期系统。方法 回顾分析2008—2010年我院基于MRI并接受IMRT的608例初治无转移鼻咽癌患者资料,按鼻咽癌第7版UICC/AJCC分期系统进行分期。Kaplan-Meier法计算相关生存率及Logrank检验,Cox法多因素分析。现行UICC/AJCC分期系统存在不足,在此基础上建立新鼻咽癌T分期系统,并对新T分期系统合理性进行评价。结果 5年随访率为94.5%,5年OS、DFS、LRFS、DMFS分别为81.5%、80.1%、86.0%、81.1%。单因素及多因素分析结果显示鼻咽、咽旁间隙、颅底解剖结构均为影响患者OS率因素(P=0.000—0.045)。根据风险差异性及生存曲线分布提出新T分期标准:T₁期:侵袭鼻咽、咽旁间隙、口咽、鼻腔、颅底、翼内肌;T₂期:侵袭翼外肌、鼻窦、眼眶、颅内、颞下窝、颅神经。推荐新T分期系统LRFS曲线及OS曲线均能很好地拉开。结论 推荐新T分期系统能较客观地预测鼻咽癌患者预后,可作为鼻咽癌临床新分期探索性的尝试。     

会阴侧切美容缝合术联合优质护理对产妇康复效果的影响

目的探讨会阴侧切美容缝合术后联合优质护理对产妇康复情况的影响。方法选取2015年8月~2018年8月在我院妇产科接受阴道分娩且行会阴侧切美容缝合术的150例产妇作为研究对象,随机分为常规护理组(对照组)和优质护理组(观察组),各75例,观察两组产妇术后切口的愈合时间、住院时间以及护理满意度。结果观察组产妇切口平均愈合时间(8.62±1.64)天,平均住院时间(3.65±0.51)天,明显低于对照组的(9.18±1.35)天和(3.87±0.62)天,差异有统计学意义(P <0.05);观察组满意度(98.67%)明显高于对照组(89.33%),差异有统计学意义(P <0.05)。结论会阴侧切美容缝合术后联合优质护理能够促进术后切口愈合,缩短住院时间,提高产妇护理满意度,值得临床推广使用。     

局部晚期鼻咽癌EGFR单抗诱导治疗疗效与EGFR表达的相关性

目的:通过对照研究，探讨局部晚期鼻咽癌患者的EGFR表达水平与联合EGFR单抗诱导治疗疗效的相关性。方法:118例来自“尼妥珠单抗、顺铂、5-氟尿嘧啶诱导化疗后顺铂同期调强放射治疗局部晚期鼻咽癌多中心前瞻性随机对照研究”的病例，通过免疫组化检测EGFR表达水平。其中，尼妥珠单抗联合顺铂、5-氟尿嘧啶方案诱导治疗组（NPF组）58例，多西他赛、顺铂、5-氟尿嘧啶方案诱导化疗组（TPF组）60例。比较两组EGFR表达情况与诱导治疗疗效相关性。结果:全组EGFR表达率为94.9%；EGFR表达与性别、临床分期等临床特征无显著相关（P>0.05）。EGFR表达水平与TPF诱导化疗的疗效无显著相关（P=0.090），但显著影响联合尼妥珠单抗的诱导治疗疗效(P=0.015)；与TPF化疗比较，EGFR高表达水平患者接受联合EGFR单抗的诱导治疗有更好的治疗反应（P=0.033）。结论:在局部晚期鼻咽癌中，EGFR的表达水平与联合EGFR单抗诱导治疗的疗效密切相关；对于EGFR高水平表达的患者，增加EGFR单抗可能提高诱导治疗的临床获益。     

黄曲霉毒素B1诱发大鼠肝癌过程中β连环蛋白的变化

许多研究表明,黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）与HCC密切相关,而β连环蛋白是近年肿瘤研究的一个热点,其基因突变和表达异常与HCC等肿瘤密切相关。研究人HCC往往只能对癌及癌旁组织（或加上正常组织）进行比较,无法知道基因在哪个阶段开始出现异常,而且患者往往在发病前接触过很多致癌因素,很难明确是哪些引起β连环蛋白表达量增高。本研究仅用AFB1处理大鼠诱发HCC,于不同时段进行肝活组织检查,[第一段]     

Peroxiredoxin Ⅱ基因在Hep3B细胞中的生物学功能和作用机制

目的 探讨peroxiredoxin Ⅱ (Prx Ⅱ)基因在肝癌发生发展中的作用及其机制.方法 化学合成两对针对Prx Ⅱ基因的小干扰RNA,即Prx Ⅱ-1和Prx Ⅱ-2,分别用脂质体LipofectamineTM 2000介导转入人肝癌细胞系Hep3B.通过实时荧光定量PCR和Western blot检测确定Prx Ⅱ在转染细胞中mRNA和蛋白表达水平受到明显抑制后,对Prx Ⅱ基因沉默的Hep3B细胞分别进行细胞生长、细胞凋亡、细胞集落形成等检测,观察Prx Ⅱ对Hep3B细胞生物学功能的影响;通过二氯荧光素双乙酸和硫代巴比妥酸试验,检测细胞内过氧化代谢产物活性氧类和丙二醛的水平,探讨Prx Ⅱ的作用机制.结果 与阴性对照组和空白对照组相比,Prx Ⅱ基因沉默的Hep3B细胞生长受到抑制,生长抑制率在转染96h后达40%以上;细胞凋亡增加;细胞形成集落的能力降低,Prx Ⅱ-1组和PrxⅡ-2组的细胞集落形成数分别为42.0±2.8和40.5±0.7,明显低于阴性对照组和空白对照组的121.5±2.1和130.0±1.4 (P<0.05).Prx Ⅱ基因沉默的Hep3B细胞内活性氧和丙二醛水平明显增加(P<0.05).结论 Prx Ⅱ具有促进Hep3B细胞生长的生物学功能,其机制可能与通过抗氧化作用形成有利于肿瘤细胞生长的微环境有关.     

MicroRNA-129-2靶向调控SOX4抑制食管癌细胞增殖与侵袭转移的研究

目的 探讨MicroRNA-129-2(miR-129-2)在体内外抑制食管癌细胞增殖和侵袭转移的作用及可能机制,为食管癌的预后评估及靶向治疗提供新的思路.方法 将miR-129-2 mimics及miR-129-2 mimics NC基因序列分别转染到食管癌NMC109细胞中,并设为miR-129-2 mimics高表达组和miR-129-2 mimics阴性对照组(miR-129-2 mimics NC组),将非转染的NMC109细胞设为空白对照组.体外实验:运用MTT法检测3组细胞的增殖能力、Transwell法检测细胞侵袭能力、蛋白印迹法检测SOX4蛋白表达.采用裸鼠体内移植瘤形成实验检测3组细胞在体内环境下的增殖能力.结果 miR-129-2 mimics组的食管癌细胞增殖活性及侵袭能力较miR-129-2 mimics NC组及空白对照组明显减弱(P<0.001),而空白对照组与miR-129-2 mimics NC组食管癌细胞增殖性及侵袭性无明显差异(P>0.05);miR-129-2 mimics组的食管癌细胞中,SOX4的表达下调(P<0.001);miR-129-2 mimics组裸鼠移植瘤体积及重量明显减小(P<0.001),而miR-129-2mimics NC组及空白对照组无明显差异(P>0.05).结论 miR-129-2具有抑制食管癌细胞NMC109增殖和侵袭转移的作用,其作用机制可能与靶向下调SOX4基因表达有关.     

肿节风在小型猪放射性肺损伤过程中对TGF-β1/Smads表达水平的影响

目的 研究肿节风在小型猪放射性肺损伤过程中对TGF-β1/Smads信号通路上各信号转导分子表达水平的影响。方法 75头小型猪按随机数字表法均分为健康对照组(不照射,给予生理盐水)、单纯照射组(右肺单次15 Gy γ射线+生理盐水)及药物+照射组(右肺单次15 Gy γ射线+肿节风)。分别于照射后2、4、8、12及24周取出右肺。应用HE染色观察肺组织病理改变,Real-time PCR及Western blot分别检测上述各时间点小型猪肺组织内TGF-β1、Smad2、Smad3和Smad7 mRNA及蛋白表达情况。结果 肿节风能显著减轻小型猪放射性肺损伤的炎症表现及纤维化程度。与健康对照组比较,单纯照射组TGF-β1和Smad3的表达水平从照射后第2周起、Smad2和Smad7的表达水平分别从照射后第8周和第12周起显著升高(P<0.05)。与单纯照射组比较,药物+照射组TGF-β1和Smad2的表达水平分别从照射后第4周和第8周起明显下降(P<0.05),Smad3的表达水平无明显变化,而Smad7的表达水平则从照射后第2周起显著升高(P<0.05)。结论 在放射性肺损伤的发病过程中,肿节风通过调节TGF-β1/Smads信号通路中主要信号转导分子TGF-β1、Smad2和Smad7的表达水平而发挥放射防护作用。     

肿节风对小型猪放射性肺损伤后上皮间质转化的抑制作用

目的：本研究主要探讨了肿节风对小型猪经右胸单次照射后上皮间质转化（EMT）的抑制作用及其分子机制。方法：雄性小型猪随机分为对照组、单照组和药照组,单照组和药照组行右胸单次15 Gy照射,对照组不予照射。药照组于照射前一周予肿节风配方颗粒溶液,对照组和单照组予等量生理盐水。照射后不同时间点分别从三组随机取5头小型猪采集右肺组织,行免疫印迹检测肺表面活性蛋白A（SP-A）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、vimentin和E-cadherin的蛋白表达;免疫荧光双染观察α-SMA 和SP-A的共表达。结果：在照射后不同时间点,单照组中α-SMA和vimentin蛋白表达较对照组明显升高;而SP-A和E-cadherin蛋白表达却呈下降趋势,药照组中,上述4个观察指标的蛋白表达则介于二者之间,且4个不同时间点,三组之间两两比较,差异均具有统计学意义。单照组和药照组在激光共聚焦显微镜下均观察到了肺泡II型上皮细胞出现α-SMA和SP-A共染,对照组则没有此现象。结论：肿节风可能通过抑制肺泡II型上皮细胞发生EMT来减少胶原纤维的产生,进而减慢放射性肺纤维化的进展。