肌肉注射脂联素基因对高脂饮食大鼠氧化应激作用的影响

构建人脂联素(hAPN)基因的质粒表达载体,研究其体外转移后的表达情况.通过基因重组构建脂联素基因表达系统,电转导法导入大鼠股部肌肉,RT-PCR检测大鼠肌肉注射部位组织中mRNA水平的表达情况,同时监测外周血中SOD、MDA水平.结果表明:RT-PCR显示该基因能在肌肉组织中表达,血清中SOD水平相应升高,注射后两周达到最高水平;MDA水平降低,注射两周后达到最低水平,持续大约两周.脂联素表达系统可以在动物体内表达,增加了自由基的清除,抑制了脂质过氧化物的产生.     

Bmi-1与Ki-67在肺腺癌中的表达及其临床意义

目的明确Bmi-1与Ki-67蛋白在肺腺癌组织中的作用及二者间相关性。方法对病历资料完整的38例肺腺癌癌组织和35例癌旁组织的石蜡切片进行Bmi-1与Ki-67的免疫组织化学(S-P法)染色,检测Bmi-1与Ki-67蛋白的表达,并分析两者的表达水平与临床病理特征的关系及两者之间的相关性。结果 38例肺腺癌的癌组织中,Bmi-1和Ki-67阳性高表达率明显高于癌旁组织(Bmi-1:71.1%vs 14.3%;Ki-67:76.3%vs5.7%,P<0.05)。与临床资料的相关性分析显示:Bmi-1的表达与TNM分期和淋巴结转移相关(P<0.05);而Ki-67仅与淋巴结转移相关(P<0.05)。此外,Bmi-1和Ki-67两者之间呈正相关(P<0.05)。结论 Bmi-1在肺腺癌组织中的高表达参与了肺癌的增殖与转移,Bmi-1和Ki-67的检测可作为临床诊断肺癌、判断转移及预后的重要参考指标。     

慢性复合式应激对C57BL/6J小鼠凝血功能的影响

目的探讨慢性应激对C57BL/6J小鼠凝血功能的影响。方法将20～25g雄性C57BL/6J小鼠分成应激组及相应的对照组。应激组小鼠独笼饲养,将6个日相和6个夜相刺激及一个全天刺激随机安排到1w内,每w刺激顺序随机重新组合,连续8w。对照组动物则每5～6只小鼠合笼饲养,自由给水,整个实验过程中不接受任何刺激。两组动物均于刺激后的1、2、4、8w经内眦取血,用于空腹血糖含量,3、5、8w取血用于纤维蛋白原及凝血因子的检测。结果①与对照组相比较,应急组小鼠各时间点血糖含量均明显高于对照组(P0.01)。②纤维蛋白原含量检测显示,刺激后的3、5、8w应激组小鼠均低于对照组(P0.01);而出、凝血时间检测结果显示,刺激后各时间点应激组小鼠与对照组无显著差异。结论复合式慢性应激刺激可成功引起C57BL/6J小鼠处于应激状态,对C57BL/6J小鼠凝血功能造成一定的影响。     

原癌基因Bmi-1的研究进展

原癌基因Bmi-1属于转录抑制因子基因polycomb家族,通过抑制ink4a位点的表达及调节端粒酶的活性控制细胞的增殖和衰老。Bmi-1基因对成体干细胞及白血病干细胞的自我更新是必需的。最近发现,Bmi-1基因在血液系统恶性肿瘤及多种实体瘤中表达异常,有望成为肿瘤治疗的新靶点。     

反义Bmi-1对K562细胞增殖的抑制作用及机制探讨

目前已知Bmi-1对于正常和白血病造血干细胞的自我更新至关重要,而且在正常和白血病造血干/祖细胞增殖活性的调控中Bmi-1是一个最值得关注的基因[3,4].我们通过将反义Bmi-1表达载体用脂质体介导的基因转染法将其导入红白血病细胞系K562细胞中,观察其对K562细胞的体外增殖、细胞周期、P16蛋白及细胞凋亡的影响.探讨Bmi-1反义寡核苷酸抑制白血病细胞增殖的作用机制及在白血病基因治疗中的作用.     

骨髓造血基质的电子显微镜观察

为观察骨髓造血基质结构特点,作者采用电子显微镜观察雄性Wistar大鼠的骨髓基质的结构。乙醚麻醉后,从主动脉插管至肾动脉下方连同动脉一并结扎,静脉端开放。应用林格液50毫升灌流及2.5％戊二醛固定。将大鼠的股骨切成2mm的带有骨髓的骨片。用超声波处理将骨髓块震动3分钟后再固定。按常规方法制成电子显微镜样品,先后用扫描和透射电镜观察。发现位于窦旁的一种结构为网状细胞以扁平粗短突起构成只容纳一个造血细胞的网状结构。另一种结构为位于窦间的网状细胞以丝状细长突起构成可容纳数个血细胞的大网眼结构。成熟的血细胞是穿经窦内皮细胞释放到血循环中。血管外膜细胞突起伸向骨髓腔与窦间网状细胞突起相连形成有效的造血微环境的三维网状结构。作者并发现髓腔骨内膜表面一些多角形细胞渐移向骨髓腔,并包绕着血细胞,这种细胞可能是骨髓内最早发育的网状细胞,参与其支持组织的三维结构的形成。     

参术合剂在体外对HL—60细胞作用的初步实验研究

目前，对白血病的治疗仍以联合化疗为主，但任何一种化疗药物都具有骨髓毒性及其它副作用。近年来，利用中药及其有效成分抗白血病治疗日益受到人们的重视。中药具有副作用小，注重整体，攻补兼施的优点。我们根据中医“扶正邪”的原理，以人参、莪术为主要成分，自制参...     

Bmi-1 siRNA对宫颈癌Hela细胞体外增殖能力的影响

[目的]观察siRNA沉默Bmi-1表达对Hela细胞增殖能力的影响。[方法]构建了表达Bmi-1 siRNA的重组真核表达载体,将其转染入Hela细胞,利用荧光法观察转染效率。用RT-PCR及Western blot方法检测转染后细胞Bmi-1 mRNA及Bmi-1蛋白的表达情况;用MTT比色法、台盼蓝拒染法检测Bmi-1 siRNA对Hela细胞增殖的抑制作用;用流式细胞仪分析各组细胞的细胞周期;用平板克隆形成实验检测Bmi-1 siRNA对Hela细胞的单细胞增殖能力的影响;应用免疫细胞化学(SP法)及Western blot法检测各组细胞Ki-67及CyclinD1的表达。[结果]将构建好的重组质粒成功转染进入了Hela细胞中且转染效率在90%左右;Bmi-1 siRNA转染Hela细胞Bmi-1 mRNA及Bmi-1蛋白表达沉默,Bmi-1表达沉默后抑制Hela细胞增殖并使细胞周期阻滞于G0-G1期,能明显抑制Hela细胞的单细胞增殖能力;同时Ki-67及CyclinD1的表达均明显下降。[结论]siRNA介导的Bmi-1基因的表达沉默能抑制Hela细胞的增殖能力,Bmi-1表达可能与宫颈癌的发生发展相关。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症红细胞扫描电镜下形态异常及其加硒后的变化

本文对５例阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）的红细胞形态在扫描电镜下进行了观察，结果表明ＰＮＨ患者红细胞中光滑盘形明显减少，仅占５８．９％±９．１％，与正常对照（９３．０±２．６４％）相比，Ｐ＜０．００１，异常形态红细胞明显增多，其中环形红细胞高达２５±１０．７％（Ｐ＜０．００１），单嵴盘形、球口形、盆盘形及陷窝形红细胞均增多。经１ｔμｇ／ｍｌ亚硒钠孵育４小时后，光滑盘形红细胞稍增加（６６．７±４．３２％，与孵育前比Ｐ＞０．０５），环形及其他异常形态红细胞亦有所减少。我们过去工作曾证实微量元素硒具有保护ＰＮＨ患者红细胞膜减轻过氧化损伤、促进酶活性减轻溶血的作用，本研究表明加硒后在扫描电镜下红细胞的形态异常也有一定程度的改善，但尚不够显著。     

恶性淋巴细胞增殖性疾病外周血自然杀伤细胞计数及活性变化的研究

本文对２０例正常人及３０例恶性淋巴细胞增殖性疾病（ＭＬＰＤ）病人进行ＮＫＣ计数及活性的研究，结果表明：后者的自然杀伤细胞（ＮＫＣ）活性显著低于前者而计数结果却显著高于前者，并发现完全缓解期病人的ＮＫ活性显著高于未缓解及部分缓解者，处于化疗及放疗中的病人的ＮＫ活性显著低于其它病期，对ＭＬＰＤ患者的ＮＫＣ数量及活性进行相关性分析的结果表明二者无相关性（Ｐ＞０．０５），本文就ＮＫＣ计数及活性的变化及意义进行了探讨。