阴沟肠杆菌耐药性分析及NDM-1基因检测

目的 探讨阴沟肠杆菌的耐药性以及对亚胺培南耐药菌株进行新德里金属β-内酰胺酶1型(NDM-1)基因检测分析,为临床治疗阴沟肠杆菌感染合理用药提供试验依据。方法 试验菌株分离自2011年7月-2012年6月的临床标本,采用西门子Microscan Walkway 40plus全自动微生物分析系统对菌株进行鉴定及药敏检测,应用WHONET5.4对数据进行分析统计;聚合酶链反应(PCR)特异性扩增NDM-1基因,并对扩增产物进行测序和BLAST分析。结果 共分离得到35株阴沟肠杆菌,对亚胺培南敏感性最高,敏感率为91.4%,但也出现3株耐药菌株,其次为阿米卡星;对第一代头孢菌素头孢唑林及广谱青霉素的耐药率>90.0%,对其他抗菌药耐药率>40.0%;3株亚胺培南耐药菌株NDM-1检测均为阳性,且同源性为100.0%。结论 多药耐药阴沟肠杆菌及产NDM-1阴沟肠杆菌的出现,造成耐药形势日益严峻,需要加强监测力度。     

多重PCR在多重耐药鲍曼不动杆菌耐药基因检测中的应用

目的 建立能够同时检测多重耐药鲍曼不动杆菌(Multidrug-Resistant Acinetobacter Baumannii , MDRAB)多个耐药基因的多重PCR反应体系,了解MDRAB耐药基因分布情况,为临床治疗及感染控制MDRAB提供分子生物学依据。 方法 针对MDRAB 4种耐药基因blaoxa-23、blaAde-B、blaint-1及blaISCR-1分别设计4对引物,设计反应条件在同一PCR反应体系中同时检测这4种耐药基因,并采用建立的多重PCR反应体系检测临床分离MDRAB耐药基因携带情况。结果 本研究成功建立了一个可以同时检测4种MDRAB耐药基因的多重PCR反应体系,临床分离68株MDRAB耐药基因检测显示,1株同时携带有4种耐药基因,5株携带有blaAde-B、blaint-1及blaISCR-1,62株携带有blaoxa-23和blaAde-B。结论 多重PCR可以快速、高效、低成本检测MDRAB携带的耐药基因,多重PCR检测显示blaoxa-23及blaAde-B 是MDRAB携带的主要耐药基因。     

临床分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌同源性及耐药基因携带研究

摘要 目的 研究临床分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)同源性及其耐药基因携带率,为有效防控CRKP感染提供理论依据。方法 采用基因分析(PCR)技术,对某医院临床分离的CRKP菌株进行耐药基因检测与分析。结果 共分析临床分离的CRKP 47株,对该医院临床常用20种抗菌药中的16种耐药率达到90%以上。该医院分离的CRKP主要来源于患者痰液,占分离总菌株数的68%,患者主要来自重症监护病房。47株CRKP中,有41株检出blaKPC-2,33株检出blaCTX-M-1-like,6株检出blaCTX-M-9-like,3株菌检出blaNDM-1。47株CRKP同源性分析显示,A型6株、B型11株及C型19株。结论 该医院临床分离的47株CRKP携带多种耐药基因,以blaKPC-2和blaCTX-M-1-like为主,共分布在3种同源菌型,必须加强CRKP监测和抗菌药物管理。     

286株金黄色葡萄球菌临床分布及耐药性分析

目的：分析2013年住院及门诊患者送检微生物培养标本分离得到的金黄色葡萄球菌临床分布及耐药性情况。方法对2013年分离得到的金黄色葡萄球菌进行细菌培养鉴定及药敏试验,并对结果进行分析。结果共分离得到286株金黄色葡萄球菌,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率为46．85％。呼吸道标本中的金黄色葡萄球菌和MRSA检出率均为最高。金黄色葡萄球菌主要分布于ICU、神经外科、创伤骨科、呼吸内科等临床科室。金黄色葡萄球菌对青霉素和氨苄西林耐药率较高,多数抗菌药物对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（MSSA）与MRSA的耐药率存在差异。结论监测金黄色葡萄球菌耐药性,对临床合理选择抗菌药物十分重要。     

ICU鲍氏不动杆菌耐药性分析及同源性调查

目的统计分析重症监护病房(ICU)不同患者送检标本及环境中分离得到的鲍氏不动杆菌耐药性及同源性,为临床治疗及医院感染管理科感染控制提供依据,切断鲍氏不动杆菌医院感染传播途径。方法应用西门子MicroScan微生物鉴定及药敏系统对来自ICU患者及环境中的鲍氏不动杆菌进行细菌培养鉴定及药敏分析,运用肠杆菌科基因组间重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)及琼脂糖凝胶电泳进行同源性分析。结果 13株鲍氏不动杆菌中有10株为多药耐药株,其中7株对常用抗菌药物均耐药,有3株分离自ICU患者送检标本、4株分离自ICU环境;同源性分析显示,13株鲍氏不动杆菌共分为4型(A^D),其中有10株为A型。结论 ICU鲍氏不动杆菌聚集暴发由A1亚型引起,含有鲍氏不动杆菌的气溶胶可能为主要传播途径。     

某院2011～2015年鲍曼不动杆菌感染分布及耐药性变迁

目的：回顾分析某院2011～2015年分离鲍曼不动杆菌感染临床分布及耐药性变迁,为临床经验治疗鲍曼不动杆菌感染提供数据支持。方法使用Microscan Walkaway 40 plus型全自动微生物鉴定及药敏分析仪对临床分离株进行鉴定及抗菌药物最低抑菌浓度检测,采用WHONET5．6版软件对数据进行统计分析。结果2011～2015年分别分离到鲍曼不动杆菌190株、269株、350株、336株、427株,分别检出碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌159株、222株、294株、281株、356株。鲍曼不动杆菌主要来源于IC U （559株,35．6％）、神经外科（276株,17．6％）、呼吸内科（271株,17．2％）等科室,主要分离自痰液（1201株,76．4％）、伤口切口分泌物（124株,7．9％）、尿液（81株,5．2％）等标本。鲍曼不动杆菌对青霉素类、青霉素类／β内酰胺酶抑制剂复合物、头孢菌素类、碳青霉烯类、氨基糖苷类、喹诺酮类、四环素类耐药率均超过了80％。碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌对检测的所有抗菌药物耐药率高于总耐药率,对青霉素类、青霉素类／β内酰胺酶抑制剂复合物、头孢菌素类、碳青霉烯类、氨基糖苷类、喹诺酮类、四环素类耐药率均超过了95％。结论鲍曼不动杆菌耐药形势严峻,临床科室应根据微生物培养报告合理选择抗菌药物,同时应加强院内感染控制工作,避免碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌暴发流行。     

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌碳青霉烯及头孢菌素类抗生素耐药机制

目的研究碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)对碳青霉烯及头孢菌素类抗生素耐药机制,为临床治疗CRE感染及医院感染的控制提供分子流行病学依据。方法收集2014—2015年临床送检各类标本分离的细菌,使用Microscan Walkaway 40 plus进行细菌鉴定和药敏试验,对分离的CRE进行常见碳青霉烯酶的编码基因(bla_(NDM-1)及bla_(KPC-2))和超广谱β-内酰胺酶编码基因(bla_(TEM)、bla_(SHV)、bla_(CTX-M-1)-like、bla_(CTX-M-2)-like、bla_(CTX-M-8)-like及bla_(CTX-M-9)-like)的检测,同时检测细菌多重耐药相关的Ⅰ类整合子编码基因bla_(inT-1)。结果 2014—2015年共分离7株CRE,检出率为0.30%,1~6号菌株为肺炎克雷伯菌,7号菌株为弗劳地柠檬酸杆菌,7株菌株对β-内酰胺酶抑制剂复合制剂、头孢菌素类、头霉素类、碳青霉烯类抗生素均耐药,3株菌对阿米卡星及四环素敏感,2株菌对复方磺胺甲口恶唑敏感。3株菌检出bla_(NDM-1),2株检出bla_(KPC-2),5株检出bla_(TEM),7株均可检出bla_(SHV),1株检出bla_(CTX-M-1)-like,4株检出bla_(CTX-M-9)-like,5株检出bla_(inT-1),未检出基因bla_(CTX-M-2)-like及bla_(CTX-M-8)-like。结论 bla_(NDM-1)及bla_(KPC-2)是导致7株CRE对碳青霉烯类抗生素耐药的重要机制,bla_(TEM)、bla_(SHV)及bla_(CTX-M-9)-like是导致对头孢菌素类抗生素耐药的主要原因,bla_(inT-1)在CRE多重耐药及耐药基因传播中发挥着巨大的作用。     

3株导管相关血流感染鲍曼不动杆菌同源性分析

目的对分离自同一患者不同血流部位的3株鲍曼不动杆菌进行同源性分析,在基因水平上明确中心静脉导管相关血流感染的实验室诊断,为临床防治提供依据。方法采用西门子Microscan Walkaway 40Plus微生物鉴定及药敏系统对分离的3株鲍曼不动杆菌进行细菌鉴定及药敏分析,应用肠杆菌科基因组间重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)及琼脂糖凝胶电泳进行同源性分析。结果 3株鲍曼不动杆菌ERIC-PCR均扩增出阳性产物,3株细菌均电泳出13条位置相同的条带。结论 3株鲍曼不动杆菌属于相同的基因型,ERIC-PCR可用于鲍曼不动杆菌的同源性分析。     

肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药机制的研究

摘要:目的　研究肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗菌药物耐药机制,为临床治疗耐碳青霉烯类抗菌药物肺炎克雷伯菌感染及院内感染控制提供分子生物学依据。方法　采用西门子Microscan Walkaway 40 plus全自动微生物鉴定及药敏分析仪对肺炎克雷伯菌进行鉴定及药敏试验。采用PCR及琼脂糖凝胶电泳对耐药基因进行初筛及确证,将PCR扩增产物进行测序并使用Basic Local Alignment Search Tool（BLAST）分析,判断细菌耐药基因是否发生变异。结果　分离到的2株肺炎克雷伯菌对临床常用抗菌药物敏感性较差。PCR结果显示碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌耐药基因新德里金属β-内酰胺酶1（New Delhi Metallo-β-lactamase 1,NDM-1）均为阳性,测序未发现NDM-1耐药基因发生突变。BLAST比对显示本次试验中检出的NDM-1耐药基因与Genebank公布的NDM-1耐药基因NC_023914.1同源性为100%。结论　分离到的2株碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌均为产NDM-1病原菌,NDM-1基因序列测序未发现突变位点。