一种简单的筛选耐甲氧西林葡萄球菌方法

目的推荐美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)关于6ug／ml苯唑西林 4％NaCl盐平板(以下简称盐平板法)检测甲氧西林耐药葡萄球菌。方法使用NCCLS推荐的盐平板法检测华山医院临床分离的葡萄球菌共894株。结果(1)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)苯唑西林纸片法的检出率为84．2％(538／639)，盐平板法的检出率为86．4％(552／639)，而耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率2种方法分别为82．0(209／255)、90．6％(231／255)；(2)有14株纸片法测定为中介的金黄色葡萄球菌和22株纸片法检测为甲氧西林敏感(MS)的凝固酶阴性葡萄球菌，盐平板检测均为甲氧西林耐药(MR)，经聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因结果均为阳性，显示PCR检测与盐平板检测结果一致；(3)随机取上述纸片法和盐平板2种方法检测均为MS者9株、MR者15株，同时进行mecA基因的PCR检测，结果显示全部与盐平板法和苯唑西林纸片法检测结果符合。结论在临床微生物实验室应该采用NCCLS推荐的6ug／ml苯唑西林 4％NaCl盐平板对MRSA和MRCNS进行检测，以供临床诊断和选用抗生素。     

373株不动杆菌的药物敏感性试验

目的了解我院临床分离不动杆菌属对15种抗菌药物的耐药性,为耐药菌感染的抗菌药物选择提供依据。方法收集我院2005年7月至2006年6月所有不动杆菌临床分离株,采用琼脂稀释法测定15种抗菌药物对该菌的最低抑菌浓度。结果本研究共包括373株不动杆菌,其中鲍曼不动杆菌352株,洛菲不动杆菌21株。药敏结果显示,鲍曼不动杆菌对多黏菌素B最为敏感,细菌耐药率仅为2.6%;其次对头孢哌酮-舒巴坦、美罗培南和亚胺培南,耐药率约为15%;对左氧氟沙星、哌拉西林-三唑巴坦、头孢吡肟、氨苄西林-舒巴坦和哌拉西林的耐药率为37.5%~59.9%;对环丙沙星、阿米卡星、头孢噻肟、头孢他啶、复方磺胺甲噁唑和庆大霉素的耐药率均大于60%。与鲍曼不动杆菌相比,除多黏菌素B外,洛菲不动杆菌对上述药物的耐药率明显较低,对多数抗菌药物的耐药率在30%以下。结论不动杆菌属是医院感染的重要病原菌,耐药率高,部分菌株呈多重耐药,治疗用药应参考药敏试验结果。     

头孢美唑对产ESBLs肠杆菌科细菌的体外抗菌作用研究

目的 评价头孢美唑对产ESBLs肠杆菌科细菌的体外抗菌活性.方法 采用琼脂稀释法测定头孢美唑对临床分离大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌523株的体外抗菌作用.结果 523株细菌中产ESBLs 294株、产AmpC酶7株、同时产ESBLs和AmpC酶40株,非产ESBLs和AmpC酶182株.头孢美唑对上述4种肠杆菌科细菌中产ESBL-s菌株和非产ESBLs菌株均具有良好的抗菌作用,并较头孢西丁强2～4倍,但较头孢米诺为差.头孢美唑对ESBLLs高度稳定,但对AmpC酶稳定性差,产AmpC酶菌株对其多呈现耐药.头孢美唑对产ESBLs菌株的作用优于受试的半合成青霉素,第一、第二、第三和第四代头孢菌素,亦优于氨苄西林-舒巴坦、头孢哌酮-舒巴坦和哌拉西林-他唑巴坦,但差于亚胺培南、美罗培南和帕尼培南;较受试的氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗菌药略强或相仿.结论 头孢美唑对ESBLs稳定,对产ESBLs菌株和非产ESBLs菌株均具有良好的抗菌作用.提示该药是治疗产ESBLs肠杆菌科细菌所致感染的可选药物之一.     

40例成人牙周炎患者龈沟液分离厌氧菌分布及其对药物敏感性

目的 了解成人牙周炎患者龈沟液厌氧菌分布及其对临床常用抗菌药物的敏感性。方法 2020年12月—2021年5月收集来自复旦大学附属华山医院、上海市静安区牙病防治所和上海市嘉定区牙病防治所共计40例成人牙周炎患者的龈沟液进行厌氧菌培养和分离，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）进行菌种鉴定；琼脂稀释法测定存活细菌对阿莫西林等12种抗菌药物的体外敏感性。结果 共培养分离到厌氧菌192株，检出率前五位的细菌依次为中间普氏菌、变黑普氏菌、具核梭杆菌、黄褐二氧化碳嗜纤维菌以及黏性放线菌。96株存活厌氧菌对阿莫西林-克拉维酸及美罗培南均敏感。除普氏菌属（敏感率61.3%）外，其余分离菌对阿莫西林亦多呈敏感。普氏菌属及韦荣球菌属对甲硝唑全部敏感，而放线菌属和颗粒链球菌属则对甲硝唑近100%耐药。除了韦荣球菌属外，其他分离菌对多西环素和莫西沙星均敏感。结论 牙周炎患者龈沟液分离厌氧菌以普氏菌属、梭杆菌属和二氧化碳嗜纤维菌属多见；对阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、多西环素和甲硝唑多呈敏感。     

24种抗菌药对临床分离葡萄球菌的体外抗菌活性

目的 :比较 2 4种抗菌药对临床分离葡萄球菌的体外抗菌活性。方法 :受试药物为 2 4种抗菌药 ,受试菌为临床分离的2 71株金葡菌和 135株凝固酶阴性葡萄球菌。琼脂稀释法测定抗菌药对细菌的最低抑菌浓度。结果 :万古霉素、替考拉宁和利福平对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌 (MRSA)具有高度抗菌活性 ,抑菌率分别为 10 0 %、99.2 %和 95 .4% ;其他抗菌药的抑菌率低于 5 0 %。甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌 (MSSA)对青霉素的敏感率仅 17.1% ,对四环素、克林霉素以及红霉素的敏感率为 70 %左右 ,对大多数 β内酰胺类抗生素的敏感率 >90 %。耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌 (MRCNS)对万古霉素、替考拉宁和利福平的敏感率分别为 10 0 %、99.2 %和 94.9%。甲氧西林敏感的凝固酶阴性葡萄球菌 (MSCNS)对绝大多数受试药物的敏感率 >90 % ,青霉素的抑菌率低于 5 0 %。结论 :万古霉素等糖肽类抗生素为甲氧西林耐药葡萄球菌 (MRS)感染的可靠选用药物 ,重症感染者尚应联合利福平、磷霉素等抗菌药 ,不宜选用 β内酰胺类抗生素 ;由MSS所致感染则可根据药敏选用糖肽类以外的各类抗菌药。     

头孢米诺的体外抗菌作用研究

目的评价头孢米诺对近期临床分离的肠杆菌科细菌、不发酵糖革兰阴性杆菌和厌氧菌的体外抗菌作用。方法采用琼脂稀释法测定头孢米诺对884株临床分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和厌氧菌等的体外抗菌作用。结果 316株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中不产酶株96株(30.4%),单产ESBLs菌173株(54.7%),单产AmpC酶菌6株(1.9%)和产ESBLs+AmpC酶菌41株(13.0%)。头孢米诺对上述大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中不产酶和单产ESBLs菌株,以及变形杆菌属和摩根菌属细菌均具有良好的抗菌活性,MIC50和MIC90值大多≤2 mg/L;抗菌活性优于头孢美唑和头孢西丁;头孢米诺对不产酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的抗菌活性亦优于测试的头孢硫脒、头孢呋辛、头孢哌酮-舒巴坦和哌拉西林-他唑巴坦2种酶抑制剂复方,但抗菌活性均不及亚胺培南和美罗培南。头孢米诺对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产AmpC酶菌株的抗菌活性和肠杆菌属、沙雷菌属、枸橼酸杆菌属细菌和铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌等不发酵糖革兰阴性杆菌的抗菌活性差;但头孢米诺对梭杆菌属细菌有高度抗菌活性,MIC50和MIC90分别为≤0.06 mg/L和1 mg/L,对其他受试的厌氧菌亦具有良好的抗菌活性。结论头孢米诺对不产酶和单产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,以及变形杆菌属细菌、摩根摩根菌和厌氧菌等均具有良好的抗菌活性。提示头孢米诺可用于上述敏感菌以及厌氧菌所致感染的治疗。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因(mecA基因法)为标准，评价头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌的灵敏度和特异性。方法PCR扩增葡萄球菌的特异性mecA基因片段，头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌，药敏试验方法按标准K—B(Kirby-Bauer)法进行。结果在190株临床分离的葡萄球菌中金黄色葡萄球菌(金葡菌)138株，表皮葡萄球菌30株，溶血葡萄球菌22株，经。PCR法检测mecA基因，金葡菌中耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为81.2％(112／138)、96．1％(50／52)。头孢西丁纸片扩散法检测金葡菌中MRSA和CNS中MRCNS的发生率分别为81.2％(112／138)、94．2％(49／52)，与mecA基因法结果相比较，头孢西丁纸片扩散法检测葡萄球菌中MRS的灵敏度和特异度分别为99．4％(161／162)、100．0％(28／28)，两者符合率为99．5％(189／190)。2种方法所获得的结果经统计学处理，两者差异无显著性。结论头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌具有很高的灵敏度和特异度，适合在临床微生物实验室中进行推广。     

利奈唑胺的体外抗菌作用研究

目的评价抗菌新药利奈唑胺的体外抗菌作用。方法采用琼脂对倍稀释法测定利奈唑胺对579株临床分离菌的体外抗菌活性，并与有关抗菌药进行比较；测定利奈唑胺的杀菌浓度和杀菌曲线；培养条件对利奈唑胺抗菌活性的影响。结果利奈唑胺对葡萄球菌属、肺炎链球菌等链球菌属、肠球菌属临床分离菌均具高度抗菌活性，包括对其中的甲氧西林耐药葡萄球菌、青霉素中介肺炎链球菌亦具良好的抗菌作用。对流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌的抗菌活性较低。对脆弱拟杆菌等厌氧菌具较高抗菌活性。利奈唑胺对耐药的革兰阳性球菌的抗菌作用与万古霉素和替考拉宁相仿或略强。最低杀菌浓度（MBC）测定及杀菌曲线试验结果显示利奈唑胺对肺炎链球菌、溶血性链球菌具有很强的杀菌作用，对大部分葡萄球菌属具杀菌作用，对肠球菌仅具抑菌作用。培养基pH值的改变、细菌接种量的改变对利奈唑胺抗菌活性有一定影响，人血清含量改变对该药抗菌活性无明显影响。结论利奈唑胺对需氧革兰阳性球菌，包括多重耐药菌具有高度抗菌活性，且与其他抗菌药问无交叉耐药。提示利奈唑胺对革兰阳性球菌，尤其是多重耐药株所致感染的控制将具有重要作用。     

加替沙星体外抗菌作用研究

目的：评价加替沙星的体外抗菌作用。方法：以琼脂稀释法测定加替沙星对临床分离菌的最低抑菌浓度(MIC)，并与有关抗菌药进行比较。测定加替沙星的杀菌作用，以及各种培养条件对加替沙星抗菌活性的影响。结果：加替沙星对临床分离菌1192株MIC测定结果显示该药具广谱抗菌作用。对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)、肺炎链球菌、溶血性链球菌、流感嗜血杆菌具高度抗菌活性，MIC90≤0．25mg／L。但对甲氧西林耐药葡萄球菌(MRS)和肠球菌属的作用差。对肠杆菌科细菌的大多数菌株具良好抗菌作用，其中对肺炎克雷伯菌、沙雷菌属、普通变形杆菌、沙门菌属、志贺菌属的MIC90≤2mg／L。但大肠埃希菌的敏感性较差。该药对铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌亦具良好抗菌作用，不动杆菌属对其敏感性较差。加替沙星对脆弱拟杆菌、消化链球菌等厌氧菌亦具高度抗菌活性。与受试的其他氟喹诺酮类药物相比，加替沙星对MSSA、肺炎链球菌、溶血性链球菌、脆弱拟杆菌的作用明显优于环丙沙星和氧氟沙星，对肠杆菌科细菌和非发酵革兰阴性菌作用较环丙沙星略优或相仿。杀菌试验结果显示加替沙星具快速杀菌作用。除培养基的pH值改变对其抗菌活性略有影响外，细菌接种量及血清含量无明显影响。结论：加替沙星为一广谱抗菌药，抗菌作用强，对社区获得呼吸道感染病原菌抗菌活性尤高，提示该药治疗敏感菌所致感染可望有良好应用前景。     

上海地区细菌耐药性监测

目的：了解上海地区临床分离菌的耐药情况。方法：2000年4月至2001年3月上海11家医院临床分离菌用Kirbybauer法进行药敏试验。结果：18533株细菌中革兰阳性菌占34％，革兰阴性菌占66％。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）分别占金黄色葡萄球菌（金葡菌）和凝固酶阴性葡萄球菌的63％与77％，无万古霉素耐药株。粪肠球菌耐万古霉素株6．9％，屎肠球菌中为3．3％。肺炎球菌儿童分离株中耐青霉素株占30．9％，其中3株高耐株。青霉素中度敏感株（PISP）与耐青霉素株（PRSP）对万古霉素和碳青霉烯类均高度敏感。肠杆菌属、枸橼酸杆菌属，克雷伯菌属和普鲁威登菌属对头孢噻肟，头孢曲松和头孢他啶的耐药率分别达34％－47％，34％－56％和21％－41％。各医院分离的大肠埃希菌中产超广谱β内酰胺酶（ESBLs)株占15.5%-21.3%，克雷伯菌属中24．3％－54．9％。产ESBLs菌株对19种抗菌药和5种酶抑制剂复方的耐药率（除碳青霉烯类外）均显高于不产ESBLs株。结论：细菌耐药性仍是目前临床上的严重问题，需要各有关部门共同商讨有效对策。