四环素调控复制缺陷性疱疹病毒载体介导LacZ基因在原代培养神经元中的表达

目的利用四环素调控复制缺陷性单纯疱疹病毒I型重组载体(QR9TO-LacZ)感染体外原代培养的大鼠皮层神经元,探讨其介导半乳糖苷酶(LacZ)基因的表达情况及基因调控效能;并检测该载体对神经元活力的影响。方法用RUL9-8细胞系扩增QR9TO-LacZ病毒株,收集后采用噬斑法测定病毒滴度;体外原代培养大鼠皮层神经元。将培养的原代神经元分为强力霉素(DOX)组和对照组。两组细胞均用QR9TO-LacZ转染,强力霉素组加入四环素衍生物强力霉素(0.5μg/ml),对照组加入等剂量空白对照液。同时根据感染复数(MOI),即MOI=3、5、10、30 PFU/cell,将两组培养细胞进一步分为亚组。病毒转染48h后行X-gal染色;光镜下观察神经元形态,随机选取10个高倍镜视野(×400),计算每高倍镜视野中平均蓝染细胞率,比较不同MOI病毒感染神经元的效率。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测感染病毒48 h(MOI同上)后神经元的活性。结果在含有DOX的培养环境中,不同MOI亚组(3、5、10、30 PFU/cell)QR9TO-LacZ感染神经元出现蓝染细胞百分比分别为5.35%±0.84%、10.64%±1.92%、19.73%±2.87%、34.41%±2.58%;在无DOX的培养环境中,各亚组均未观察到蓝染细胞。上述MOI感染的神经元细胞存活率分别为:90.24%±8.16%、88.00%±5.69%、83.95%±3.82%、78.90%±5.49%。结论 QR9TO-LacZ载体能有效地将目的基因导入原代培养神经元中并表达;目的基因表达的开启受强力霉素调控;QR9TO-LacZ对体外原代培养神经元毒性较低。     

纤维蛋白原与血管性认知功能障碍的关系研究

目的纤维蛋白原（fibrinogen,FIB）与痴呆的发生相关,可能与其作为凝血和炎性因子有关。文中拟探讨在缺血性脑血管病患者中,血浆FIB水平与血管性认知功能障碍（vascular cognitive impairment,VCI）之间的关系,为VCI的防治提供理论依据。方法从南京卒中注册系统中提取符合血管性认知障碍无痴呆型（vascular cognitive impairmentno dementia,VCIND）患者246例,测定血浆FIB水平。将患者分为高FIB组（FIB≥3.0g/L,84例）和正常组（FIB〈3.0g/L,162例）,运用简易智能状态量表（mini-mental state examination,MMSE）评估患者的认知功能,随访1年半时间,观察患者是否进展为血管性痴呆（vascular dementia,VaD）。结果随访过程中有8例患者死亡,14例患者失访,64例患者进展为VaD;认知功能下降程度与血浆FIB水平呈显著正相关（R=0.293,P〈0.001）;高FIB水平是VaD的危险因素之一（OR=2.152,95%CI=1.266～3.658）。结论血浆FIB水平与VCI患者认知功能下降程度呈显著相关,血浆高FIB水平增加VCI患者进展为痴呆的风险。     

胞磷胆碱钠联合甘露醇和依达拉奉治疗大面积脑梗死疗效观察

目的观察胞磷胆碱钠、甘露醇和依达拉奉联合治疗大面积脑梗死的临床疗效。方法 32例大面积脑梗死患者分为2组,每组16例,2组患者均给予保持呼吸道通畅、吸氧、营养支持等常规治疗,在此基础上,对照组患者给予甘露醇治疗,观察组患者给予胞磷胆碱钠、甘露醇、依达拉奉联合治疗,14 d为1个疗程。治疗1个疗程后,对2组患者的治疗效果及并发症发生率进行比较。结果对照组和观察组患者总有效率分别为68.75%和87.50%,观察组患者治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。2组患者治疗第7、14天神经功能缺损评分均显著低于治疗前(P<0.05),治疗前及治疗第7天2组患者神经功能缺损评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗第14天,观察组患者神经功能缺损评分显著低于对照组(P<0.05)。观察组和对照组患者并发症发生率分别为31.25%、68.75%,观察组患者并发症发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论胞磷胆碱钠、甘露醇和依达拉奉联合治疗可明显改善大面积脑梗死患者的临床症状和神经功能。     

脑电图空间对称指数与单侧大脑中动脉狭窄后侧支循环状态的相关性

目的：探讨脑电图空间对称指数（spatial hemispheric brain symmetry index, sBSI）与大脑中动脉（McA）狭窄后患者侧支循环代偿之间的关系。方法：对25例单侧MCA重度狭窄或闭塞的患者（病例组）和15例健康者（对照组）进行16导联脑电图常规检查,计算出脑电图sBSI。病例均为经脑血管造影术（DsA）证实为MCA狭窄或闭塞。再将病例组分为有明显侧支循环代偿组和无明显代偿组两组,观察脑电图sBSI与MCA狭窄或闭塞后有无侧支代偿的关系。结果：lO例MCA闭塞病变患者中8例有明显侧支代偿。15例MCA重度狭窄患者中5例具有明显侧支代偿。病例组sBSI（0．078±0．025）明显大于正常对照组sBSI（0．058±0．010）,P=0．004;有侧支代偿病例组的脑电图sBSI（0．068±0．009）明显小于无侧支的病例组sBSI（0．092±0．032）,P=0．011。结论：脑电图检查作为一项无创的检查方法,其sBSI在评估MCA狭窄或闭塞后侧支代偿状态有一定的可行性。     

强化抗血小板治疗在缺血性脑卒中复发高危患者二级预防中的临床研究

目的观察强化抗血小板药物氯吡格雷在缺血性脑卒中复发高危患者二级预防中的长期疗效及安全性。方法采用艾森卒中风险评分（ESRS）量表筛选住院的急性非心源性缺血性脑卒中复发高危患者100例,随机分为氯吡格雷组和阿司匹林组,每组50例。两组均给予脑卒中常规治疗,氯吡格雷组予氯吡格雷75mg及阿司匹林100mg口服,1周后仅予氯吡格雷75mg,口服。阿司匹林组予阿司匹林200mg,口服,1周后改为100mg,口服。随访3个月和1年,观察两组缺血性脑卒中复发率及药物不良反应发生率。结果随访3个月时,脑卒中复发率：阿司匹林组为6．3％,氯吡格雷组为2．0％,差异无统计学意义（P〉0．05）;药物不良反应发生率：阿司匹林组为14％,氯吡格雷组为2％,差异有统计学意义（P〈0．05）。随访1年时,脑卒中复发率：阿司匹林组为13％,氯吡格雷组为2％,差异有统计学意义（P〈0．05）;药物不良反应发生率：阿司匹林组为38％,氯吡格雷组为6％,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论缺血性脑卒中复发高危患者二级预防中强化抗血小板治疗可降低脑卒中复发风险,长期应用获益较高,安全性好。     

伴有阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的缺血性脑血管病患者血同型半胱氨酸的变化

目的 探讨伴有阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome,OSAHS)的缺血性脑血管病患者(ischemie cerebrovascular disease,ICVD)血同型半胱氨酸(homocysteine,Hey)水平.方法 从南京脑卒中注册系统中筛选76例ICVD患者,行多导睡眠图(PSG)监测,并检测纤维蛋白原(FBG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、血浆Hcy.结果 76例患者中有57例存在呼吸暂停现象,其中53例(69.7%)诊断为OSAHS;排除4例中枢性呼吸暂停患者,将72例ICVD患者根据呼吸暂停加低通气指数(AHI)值分为4组:无呼吸暂停组19例,AHI值2.38±0.96,Hcy值(8.78±2.01)μmol/L;轻度OSAHS 21例,AHI值14.14±4.37,Hcy值(12.91±3.00)μmoL/L;中度OSAHS24例,AHI值29.62±5.81,Hcy值(14.85±4.15)μmoL/L;重度OSAHS 8例,AHI值46.75±2.82,Hey值(19.30±4.82)μmoL/L.4组间Hcy值差异有统计学意义(F=40.32,P<0.01).Hey与AHI存在显著相关性(r=0.598,P<0.01).结论 在ICVD患者中,OSAHS患病率较高,且以轻中度为主;Hcy在ICVD合并OSAHS患者时具有升高趋势,且随着阻塞程度的进展而加重.     

缺血性卒中患者血尿酸水平与颈动脉狭窄的关系

目的 研究缺血性卒中患者血尿酸（serum uric acid,SUA）与颈动脉狭窄之间的关系。方法 经脑血管造影术确诊有颈动脉狭窄的缺血性卒中患者112例,无狭窄者50例。根据造影结果,将颈动脉狭窄分轻度狭窄组45例、中度狭窄组39例和重度狭窄组28例。单侧颈动脉狭窄有62例,双侧颈动脉狭窄有50例。比较不同组别间SUA水平的差异以及SUA与颈动脉狭窄程度之间的关系。结果 颈动脉狭窄组SUA水平显著高于无狭窄组（343±111μmol/L vs 287±67μmol/L,P<0.01）;重度狭窄组SUA水平高于中度狭窄组和轻度狭窄组（408±112μmol/L vs 351±100μmol/L,P=0.025;408±112μmol/L vs 296±99μmol/L,P<0.01）;中度狭窄组SUA水平高于轻度狭窄组（P=0.017）;双侧颈动脉狭窄组SUA水平高于单侧狭窄组（378±128μmol/L vs 314±85μmol/L,P=0.003）。Logistic回归分析提示,SUA并非颈动脉狭窄与否的独立危险因素（P=0.239）;Spearman等级相关分析提示,SUA水平与颈动脉狭窄程度呈正相关（r=0.401,P<0.01）。结论 高血尿酸是颈动脉狭窄与否的重要但非独立危险因素,与颈动脉狭窄严重程度呈正相关。     

伴有阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的脑梗死患者血同型半胱氨酸的变化

目的 探讨脑梗死伴随阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSA)患者的血同型半胱氨酸(Hcy)的水平变化.方法 从南京卒中注册系统中筛选2009年3-12月男性急性脑梗死患者,共92例,根据呼吸暂停加低通气指数(AHI)值将病例为无OSA组(AHI＜5/h)与伴OSA组(AHI≥5/h)两组,在脑梗死发病后第(14±2)天检查多导睡眠图与血Hey等生化指标.结果 脑梗死伴OSA组患者的血Hcy水平为(17±5)μmol/L,显著高于无OSA组(11±3)μmol/L(P＜0 01).根据AHI值,将所有病例分为无OSA组(AHI 5～14/h)、轻度OSA组(AHI 5～14/h)、中度OSA组(AHI 15～30/h)和重度OSA(AHI＞30/h),四组的血Hcy分别为(11±3)μmol/L、(14±3)μmol/L、(17±5)μmol/L和(21±5)μmol/L,差异有统计学意义(P＜0.01),进一步组问两两比较,无OSA组均显著低于其他三组(P＜0 05).将血Hcy与AHI作Pearson相关分析,显示Hcy与AHI呈现正相关(r=0 482,P＜0 01).多元线性回归模型校正其他因素后,仍显示AHI(β=0 671,P=0.001)是血Hcy 水平的独立预测因子(R2=0.539,P＜0.01).结论 在脑梗死患者合并OSA时Hcy具有升高趋势,且随着阻塞程度的进展而加重.

Abstract：

Objective To investigate the association of plasma homocysteine and OSA (obstructive sleep apnea) syndrome in ischemic stroke (IS) . Methods A total of 92 male IS patients were classified by apnea hypopnea index (AHI) into 2 groups: non-OSA group (AHI＜5/h) and OSA group (AHI≥5). All patients were tested for plasma homocysteine when polysomnography was finished at (14±2) d after the onset of IS. Results The mean level of homocysteine was significantly higher in the OSA group than that in the non-OSA group (17±5 vs 11±3μmol/L, P＜0.01). Pearson correlation analysis revealed a positive correlation between the homocysteine level and the severity of AHI (r=0.482, P＜0.01). Further multiple linear regression analysis showed that AHI and folate were independent predictors of homocysteine level (R2=0.553, P＜0.01, β for AHI=0.671, β for folate=-0.256). Conclusion The severity of OSA is significantly associated with an elevated level of homocysteine in IS patients. And this association is independent of other causative factors of an elevated level of homocysteine.     

伴有阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的缺血性脑血管病患者血同型半胱氨酸的变化

Objective To investigate the relationship between obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome(OSAHS)and plasma homocysteine(Hcy)levels in patients with ischemie cerebrovascular disease(ICVD).Methods Seventy-six patients with ICVD were monitored with polysomnography(PSG) for 7-8 hours during sleeping.The levels of fibrinogen(FBG),high density lipoprotein cholesterol(HDLC),low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C),triglyceride(TG)and plasma Hey were assessed.Results Of the 76 ICVD patients,57 showed apnea symptom during sleeping,of which 53(69.7%)were diagnosed with OSAHS and 4 with central sleep apnea,According to the mean apnea-hypopnea index (AHI),the severity of apnea was classified as no apnea symptom(19 cases with mean AHI of 2.38±0.96 and Hey level of(8.78 ±2.01)μmol/L),mild apnea(21 cages with mean AHI of 14.14 ±4.37 and Hcy level of(12.91 ±3.00)μmol/L),moderate apnea(24 cases with mean AHI of 29.62±5.81 and Hcy level of(14.85 ±4.15)μmol/L)and severe apnea(8 cases with mean AHI of 46.75±2.82 and Hcy level of(19.30±4.82)μmol/L).The level of Hcy was statistical significant among these 4 groups(F=40.32,P<0.01)and correlated with the mean AHI(r=0.598,P<0.01).Conclusion Patients with ICVD have a high morbidity of OSAHS,mainly suffering from mild to moderate apnea;The plasma Hcy level elevates in the ICVD patients with OSAHS and is correlated with the severity of apnea.