脐带血间充质干细胞体外分离、纯化及培养

目的　研究脐带血 (HUCB)中含有的间充质干细胞 (MSCs)体外分离、纯化及培养条件 ,探究其作为种子细胞应用于实验和临床的可行性。方法　无菌条件下取正常足月剖腹产的脐带血 ,经肝素抗凝 ,用淋巴细胞分离液分离脐血的单个核细胞 ,以偏酸性的MesencultTM作为培养基进行培养和纯化获得贴壁细胞层 ,用流式细胞仪检测MSCs表面抗原。结果　来源于脐血的单个核细胞经体外培养贴壁后出现破骨样及间充质样的细胞 ,间充质细胞为成纤维样的细胞形态 ,并表达MSCs相关的抗原 (CD2 9、CD4 4、CD1 6 6 ) ,但不表达造血细胞抗原 (CD34 、CD4 5) ,这与源于骨髓的MSCs一致。结论　脐带血来源的MSCs能在体外培养、扩增 ,而用于满足实验和临床的需要     

严重的颅底骨折伴发的口鼻腔大出血的救治及分析

作者回顾性分析本院2006年11月～2008年4月收治的8例严重颅底骨折伴发口鼻腔大出血的病例，探讨其救治方案或策略。     

严重的颅底骨折伴发的口鼻腔大出血的救治及分析

作者回顾性分析本院2006年11月~2008年4月收治的8例严重颅底骨折伴发口鼻腔大出血的病例,探讨其救治方案或策略。1资料与方法本组男性5例、女性3例,GCS评分4~10分。其中车祸6例、坠落伤2例;合并额颞叶脑挫裂伤伴发脑内血肿3例、硬膜外血肿1例、硬膜下血肿伴发脑挫裂伤、外耳道流血面听神经损伤2例、颌面部骨折伴视神经损伤2例,创伤性湿肺、肋骨骨折1例。所有患者全胸片及胸腹腔B超均排除胸腹部实质性脏器损伤和活动性出血等,其中2例行开颅手术。本组所有患者除行头高30°、止血和预防感染等治疗措施外,首先均行急诊经口气管插管,保持呼吸道通畅,气囊充气,防止血液返流误吸,输血、补液扩容维持生命体征平稳,必要时使用多巴胺等血管活性药物,维持血压基本达到正常水平,保证脑灌注,并以凡士林纱布或碘仿纱布填塞鼻腔或后鼻道,4例出血减少。2例有脑疝征象或出现迟发性颅内血肿者,血肿占位效应明显(头颅CT证实),纠正休克的同时积极行开颅血肿清除加去骨瓣减压术,术中处理出血点+颅底重建。有2例经鼻咽道填塞后,止血不满意,并伴有外耳道出血,积极纠正休克同时急诊行血管内介入治疗;采用Seldinger技术行颈外系统脑血管造影术,对明显...     

前交通动脉瘤的解剖特点及其显微外科治疗

前交通动脉瘤占颅内动脉瘤总数的30％左右．是颅内动脉瘤中较难处理的一类动脉瘤,前交通动脉（ACoA）复合体具有结构和血流动力学复杂,解剖学变异大,位于大脑半球深部,穿支动脉丰富。损伤易引起神经功能障碍等特点。     

移植人羊膜细胞对大鼠创伤性脑损伤的实验研究

目的 探究大鼠TBI后脑内移植人羊膜细胞（HACs）对大鼠运动功能的影响。方法 HACs经分离、Hoechst33342标记后重悬调整细胞浓度为10^5/μl；采用改进的Feeney自由落体法打击大鼠脑皮层后肢运动区域，损伤后24h经微量注射器和立体定向仪将Hoechst33342标记的HACs 10μl分别移植于挫伤灶中心和挫伤灶边缘；在TBI后的28d内采用钉板平衡木行走测试大鼠运动功能变化，运动功能检测结束后取出脑组织行组织学检测。结果 治疗组滑落脚步数明显少于对照组（P〈0．05）；移植的HACs呈蓝色荧光；部分移植HACs可见MAP-2阳性表达。结论 移植HACs使大鼠TBI后运动功能明显改善。     

人羊膜细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的实验研究

人羊膜细胞（HEACs）源自于受精卵第八天时成羊膜细胞，具有细胞来源充足，不表达HLA抗原，移植不引发免疫排斥的优点。另外羊膜细胞具有表达神经细胞和神经胶质细胞标志物的细胞以及其能分泌神经递质和营养因子的特性更利于神经移植。因此作者采用移植人羊膜细胞来治疗大鼠脊髓损伤，观察其是否对改善功能确实有益。     

人羊膜细胞与创伤性脑组织提取液共培养的实验研究

目的 探究将人羊膜细胞(HACs)置于创伤性脑组织提取液的条件培养基中,模拟HACs在创伤性脑损伤微环境下的分化和增殖情况,为HACs脑内移植提供基础研究.方法 取无并发症剖官产羊膜,用0.25%胰酶反复消化3次提取HACs,接种后48h去除未贴壁的HACs.采用改进的Feeney法制作大鼠创伤性脑损伤(TBI)模型,TBI 24 h后制备创伤性脑组织提取液.将HACs分别接种于RPMI 1640培养基(1640)、RPMI 1640培养基与正常脑组织提取液(1640 NB)、RPMI 1640培养基与创伤件脑组织提取液(1640 TBI)3组.共培养7 d后HE染色显微镜下检测各组细胞形态.培养前后分别行Nestin和MAP-2单抗免疫组化检测.将HACs以104/ml密度分别接种上述3种培养基,培养后1、4和7 d经酶联免疫检测仪行四氮唑盐(MTT)比色法检测各组HACs活性.结果 1640组HACs呈圆形或椭圆形,核大居中;1640 TBI组部分HACs形态出现锥形、三角形等神经元样改变.HACs培养前可见Nestin阳性细胞,培养后1640 TBI组可见MAP-2阳性表达.各组HACs增殖性均不佳.结论 HACs与创伤性脑组织提取液共培养后可转化为神经元样细胞.HACs增殖性不佳.     

颅内前循环动脉瘤手术的临床分析

分析手术治疗 39例颅内前循环动脉瘤 ,其中前交通动脉瘤 17例 ,颈内一后交通动脉瘤 15例 ,大脑中动脉瘤 5例 ,大脑前动脉瘤 2例 ,均采用翼点入路和显微手术。结果疗效优 36例 ,良 1例 ,差 2例 ,无手术死亡。认为手术治疗颅内前循环动脉瘤关键是选择恰当的时机 ,采用显微技术 ,充分的术中降压和脑回缩 ,以及有效地防治脑血管痉挛     

应用临床护理路径对内镜治疗胰胆疾病患者健康教育

临床护理路径（CNP）于20世纪80年代起源于美国,并已在英国、澳大利亚等发达国家广泛应用。作者采应用临床护理路径对内镜介入治疗胰胆管疾病患者实施健康教育,使诊疗、护理有序,护理质量提高,患者对护理工作的满意度上升,取得良好的临床效果,现报告如下。     

人脐血血清对人骨髓基质细胞增殖的实验研究

目的　探究人脐血血清对人骨髓基质细胞增殖的作用。方法　无菌条件下抽取新鲜脐血 ,经肝素抗凝、离心分离血清、灭活补体、微孔滤膜过滤制备人脐血血清 ,细胞按照一定浓度接种于DMEM / 2 0 %人脐血血清培养基 ,定期观察细胞生长并更换培养基。结果　细胞接种 2 4h后有少量梭形细胞贴壁 ,2周时细胞基本长满瓶底 ,细胞呈漩涡状排列。结论　在体外人骨髓基质细胞可在含人脐血血清的DMEM中增殖