人骨髓间充质干细胞的分离培养和向神经细胞分化的研究

目的　分离骨髓后培养人骨髓间充质干细胞 (hMSCs) ,进行体外传代扩增 ,并探索体外诱导分化为神经元样细胞的方法。方法　抽取人骨髓血 ,percoll paque液 (1 0 73g/ml)分离 ,DMEM/2 0 %FCS培养传代 ,至第 3～ 5代时加入巯基乙醇 (BME) ,观察hMSCs分化为神经元样细胞的形态学变化。结果　hMSCs在体外可以实现数目扩增 ,在特定诱导剂的作用下向神经元样细胞分化。结论　采用少量骨髓样本 ,经培养获得充足的细胞量 ,满足定向诱导和细胞移植的需要。     

Nemo-like kinase（NLK）在胶质瘤细胞U87MG凋亡中作用的研究

目的 探讨Nemo-like kinase（NLK）在胶质瘤细胞U87MG凋亡中的作用.方法 建立NLK的过表达和小干扰质粒干扰NLK在胶质瘤细胞株U87MG中的表达.CCK-8和细胞免疫印迹的方法检测NLK和胶质瘤细胞U87MG凋亡指标caspase-3的关系.结果 构建的过表达和小干扰质粒能明显地影响NLK的表达.CCK-8和细胞免疫印迹的结果显示NLK能够诱导胶质瘤细胞U87MG的凋亡.结论 NLK能够通过激活经典的凋亡途径而诱导胶质瘤细胞U87MG的凋亡.     

丁苯酞动员内皮祖细胞治疗脑缺血再灌注大鼠实验研究

目的观察丁苯酞治疗对脑缺血再灌注大鼠的影响。方法选取健康雄性SD大鼠60只,随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组[12mg/(kg·d)]和低剂量组[丁苯酞60mg/(kg·d)]和高剂量组[丁苯酞120mg/(kg·d)],线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型。各组灌胃治疗5d,每天行神经功能缺损评分;流式细胞仪检测缺血2h和治疗5d后循环内皮祖细胞(EPC)水平;行CD31及血管性假血友病因子(vWF)免疫组织化学染色,观察大鼠脑缺血区血管新生情况。结果治疗第2天起,尼莫地平组及高、低剂量组神经功能评分均显著低于模型组(P<0.05),第3天时高剂量组神经功能缺损评分低于低剂量组[(0.40±0.52)分vs(1.10±0.32)分,P<0.05]。假手术组大鼠缺血2h循环EPC水平低于其他4组(P<0.05)。治疗第5天,高剂量组EPC增加的水平明显高于模型组、尼莫地平组和低剂量组(P<0.05)。尼莫地平组及低剂量组和高剂量组脑缺血区CD31阳性及vWF阳性细胞数多于模型组。结论丁苯酞可动员循环EPC,促进缺血区血管新生,改善神经功能,呈剂量依赖性。     

脊髓内-脊髓外神经鞘瘤1例

脊髓内-脊髓外神经鞘廇极为罕见,现报告1例如下。病例报告患者,女,52岁,农民。3年前自觉左下肢麻木,尔后右下肢麻木,1年后有尿频尿急现象。近1年来,下肢麻木向上肢发展,亦先左侧后右     

脐带血间充质干细胞体外分离、纯化及培养

目的　研究脐带血 (HUCB)中含有的间充质干细胞 (MSCs)体外分离、纯化及培养条件 ,探究其作为种子细胞应用于实验和临床的可行性。方法　无菌条件下取正常足月剖腹产的脐带血 ,经肝素抗凝 ,用淋巴细胞分离液分离脐血的单个核细胞 ,以偏酸性的MesencultTM作为培养基进行培养和纯化获得贴壁细胞层 ,用流式细胞仪检测MSCs表面抗原。结果　来源于脐血的单个核细胞经体外培养贴壁后出现破骨样及间充质样的细胞 ,间充质细胞为成纤维样的细胞形态 ,并表达MSCs相关的抗原 (CD2 9、CD4 4、CD1 6 6 ) ,但不表达造血细胞抗原 (CD34 、CD4 5) ,这与源于骨髓的MSCs一致。结论　脐带血来源的MSCs能在体外培养、扩增 ,而用于满足实验和临床的需要     

大鼠重型颅脑创伤后急性期下丘脑-垂体-肾上腺轴损害和功能改变的意义

目的 探讨大鼠重型颅脑创伤(traumatic brain injury,TBI)后急性期下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)轴损害和功能改变的意义.方法 成年健康封闭群雄性SD大鼠60只,随机(随机数字法)分为假手术组、模型组和治疗组,每组20只.采用Feeney法建立大鼠重型TBI模型.治疗组于伤后10 min、24 h和48 h腹腔注射地塞米松0.6mg/kg,假手术组和模型组给予等容量生理盐水替代.各组大鼠腹腔注射1μg促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)作刺激试验,分别于伤后第3、12、24、72小时4个时间点进行观察.应用化学发光法测定血清皮质酮(corticosterone,CORT)和ACTH含量.第72小时取大鼠下丘脑、垂体和肾上腺,采用免疫组织化学方法观察白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)表达情况.所得数据采用SPSS 17.0统计软件包进行单因素方差分析和SNK-q检验.结果 ①模型组大鼠伤后第3小时外周血CORT和ACTH达高峰,明显高于假手术组,随后逐渐降低;各时间点ACTH刺激试验后CORT上升的幅度(△max)均低于假手术组(P＜0.05或P＜0.01).治疗组大鼠伤后所有时间点CORT均高于模型组,ACTH仅伤后第24小时高于模型组;ACTH刺激后CORT的△max值均较模型明显升高(P＜0.05或P＜0.01).②模型组大鼠伤后第72小时下丘脑与垂体IL-6、TNF-α阳性细胞数较假手术组明显升高(P＜0.01);治疗组则较模型组明显降低(P＜0.01);肾上腺皮质仅IL-6阳性细胞数差异显著(P＜0.01).结论 重型TBI大鼠早期即可存在肾上腺皮质功能改变,随着时间推移,对ACTH反应程度降低.小剂量短疗程地塞米松可减轻HPA轴炎症反应程度,增强肾上腺皮质对ACTH的敏感性.     

兔基底动、静脉与其它血管PGI_2、TXA_2代谢的比较

本文首次报道了用放射免疫方法研究家兔不同部位的血管PGI_2、TXA_2代谢的情况。基底动、静脉的PGI_2生成能力明显高于肾动、静脉;髂外动、静脉;腹主动脉与下腔静脉。而TXA_2生成量各个血管没有明显差异。本文提示PGI_2在维持正常脑血管张力与脑血流量上具有重要作用。     

Meckel腔及其相关结构显微解剖学研究

目的　研究Meckel腔 (三叉神经腔 )及其相邻结构的显微外科解剖 ,为临床相关疾病的显微手术提供形态学依据。方法　国人成年尸体头颅标本 38例 ,其中 30例标本经双侧椎动脉灌注红色乳胶 ,采用手术显微镜 (8～ 40倍 )观察和测量Meckel腔及其相邻结构。结果　Meckel腔是包绕三叉神经根和三叉神经节的硬脑膜和蛛网膜套 ,打开硬膜间隙 ,可清晰显露Meckel腔及三叉神经节分支 ;其上腔深度 14 11± 1 45mm ,下腔深度 15 78± 1 5 6mm ,宽 12 15± 1 34mm ,厚度 5 6 1±0 5 5mm ;下颌神经颅内段长 4 5 5± 1 76mm ,宽 5 77± 1 6 7mm ,厚度 1 49± 0 33mm。同时对毗邻的海绵窦外侧壁内外层、岩浅大神经、岩上窦及颈内动脉岩骨段水平部等结构的关系进行了显微解剖。结论　Meckel腔及相邻结构的显微解剖学研究 ,对中颅凹硬膜外入路的显微外科手术、侵入Meckel腔的后颅凹肿瘤显微外科手术 ,三叉神经痛治疗和影像学的检查等有临床指导价值。     

神经干细胞与脑肿瘤基因治疗

基因治疗是脑肿瘤治疗的重要辅助手段,但由于肿瘤细胞常常浸润到周围正常脑组织,使得脑肿瘤治疗难以彻底。随着对神经干细胞的深入研究,发现神经干细胞能够迁移追踪肿瘤细胞,并具有多潜能分化、免疫原性低等诸多优点。此外,在动物实验中发现,神经干细胞能整合于宿主细胞,长期、稳定表达外源性基因。因此,神经干细胞是脑肿瘤基因治疗的理想载体。