云南省HIV-1 CRF01_AE毒株基因型耐药研究

目的 了解云南省HIV-1 CRF01_AE毒株的流行分布及基因型耐药情况。 方法 收集2018—2021年云南省抗病毒治疗失败的HIV/AIDS患者的人口学资料,采集患者血浆,逆转录聚合酶链反应扩增HIV-1 pol基因蛋白酶和逆转录酶区并进行序列测定,对基因型为CRF01_AE的序列进行耐药情况分析。结果 通过基因型耐药检测共获得967例亚型为CRF01_AE序列,其中男性682例（占70.5%）,耐药509例,耐药率为52.6%,异性性传播813例（占84.1%）,同性性传播95例（占9.8%）。同性性传播的耐药率最高,为65.3%;治疗时长<12个月的耐药率最低,为35.9%,36~<48个月耐药率最高,为58.1%。核苷类反转录酶抑制剂（NRTIs）耐药率为33.9%,非核苷类反转录酶抑制剂（NNRTIs）的耐药率为48.5%,蛋白酶抑制剂（PIs）的耐药率较低为1.3%。NRTIs类药物中阿巴卡韦（ABC）、恩曲他滨（FTC）和拉米夫定（3TC）耐药率较高,分别为为32.9%、32.4%和32.4%;NNRTIs类药物中奈韦拉平（NVP）和依非韦仑（EFV）耐药率较高,分别为47.6%和47.5%,均以高度耐药为主。一线治疗方案耐药率56.2%高于二线治疗方案耐药率29.5%,差异有统计学意义（P<0.001）。NRTIs耐药突变位点中,以M184V/I突变位点为主,突变率为30.0%;NNRTIs耐药突变位点中,以K103N/Q/S突变位点为主,突变率为28.1%;PIs耐药位点突变率相对较低,主要的耐药突变位点是L33F,突变率为3.7%。结论 云南省抗病毒治疗失败亚型CRF01_AE的患者耐药率有所降低,但部分地区及人群的耐药率仍较高,应加强对重点地区和人群的管理,加强耐药监测,对治疗失败的患者及时掌握耐药情况,合理调整治疗方案。     

综合疗养对老年性高血压的影响

目的 探讨综合疗养措施对老年高血压患者的临床意义。方法 观察92例采用综合疗养措施老年患者治疗前和治疗2个月后的血压和生化指标。结果 采取综合疗养措施后，患者血压明显下降（P〈0.01），尿素氮、肌酐、尿酸明显下降（P〈0.01），血糖、甘油三酯、胆固醇无明显改变（P〉0.05）。结论 综合疗养康复治疗措施可降低老年高血压患者血压，可能对肾功能有一定保护作用。     

生长分化因子15 对人肺腺癌SPCA1 细胞增殖与迁移的影响

目的：探讨靶向生长分化因子15（growth differentiation factor 15,GDF15）基因siRNA 对人肺腺癌SPCA1 细胞增殖和迁移的影响。方法：根据基因数据库（GenBank）设计并合成3 条人GDF15 基因siRNA（GDF15-siRNA161、GDF15-siRNA290 和GDF15-siRNA860）和阴性对照NC-siRNA 序列,采用qPCR法测定转染不同GDF15-siRNA 的SPCA1 细胞中GDF15 mRNA表达水平,筛选有效抑制GDF15 基因表达的siRNA。CCK-8 法和划痕实验分别检测转染有效GDF15-siRNA 和NC-siRNA 的SPCA1 细胞增殖和迁移能力。结果：3 条GDF15-siRNA 对SPCA1 细胞GDF15 mRNA表达均有明显抑制（P<0.01）,其中GDF15-siRNA161抑制最为明显。和转染NC-siRNA 的SPCA1 细胞相比,转染GDF15-siRNA161的SPCA1 细胞增殖明显减慢[ （0.46±0.03）vs（0.52±0.01）,P<0.01],转染GDF15-siRNA161的SPCA1 细胞迁移速度明显低于转染NC-siRNA的SPCA1 细胞（P<0.01）。结论：有效沉默人肺腺癌SPCA1 细胞GDF15基因表达能抑制肺腺癌细胞的增殖和迁移,GDF15 可能成为人肺腺癌基因治疗的候选靶点。     

蓉黄颗粒对非透析CKD-MBD肾虚湿热证患者血清FGF23、FGFRs、Klotho蛋白的影响

目的观察非透析慢性肾脏病矿物质和骨代谢异常（CKD-MBD）肾虚湿热证患者血清成纤维细胞生长因子23（FGF23）、 成纤维细胞生长因子受体（FGFRs）、Klotho 蛋白水平的变化及蓉黄颗粒的干预作用。方法将符合纳入标准的70 例非透析 CKD-MBD肾虚湿热证患者,随机分为治疗组和对照组各35例,最终实际完成65例,对照组33例,治疗组32例,并设正常组20 例。两组患者均给予常规治疗并结合中药保留灌肠,治疗组在此基础上加用蓉黄颗粒,温水冲服,3次/d,1袋/次。疗程均为12 周。观察并记录两组患者中医证候变化,并检测两组患者治疗前后血清钙（Ca）、磷（P）、甲状旁腺激素（iPTH）、FGF23、FGFRs及 Klotho蛋白,同时检测正常组血清FGF23、FGFRs、Klotho蛋白水平。结果治疗组治疗后CKD-MBD疗效显著优于对照组（P<0.05）。 治疗组各时间节点中医证候积分值分别与治疗前比较均显著降低（P<0.05或P<0.01）;对照组仅治疗12周末的中医证候积分值 较治疗前降低（P<0.05）;治疗组均显著优于对照组（P<0.01）。治疗组治疗后各时间节点血清Ca、P、iPTH均较治疗前改善（P< 0.05 或P<0.01）。对照组仅在治疗12 周末,血清Ca 升高,血清P、iPTH 降低（P<0.05）。治疗前,对照组、治疗组血清FGF23、 FGFRs、Klotho蛋白水平与正常组比较,差异均有统计学意义（P<0.01）。治疗后,治疗组血清FGF23、FGFRs、Klotho蛋白水平均较治 疗前明显改善（P<0.05）;对照组血清FGF23、FGFRs、Klotho蛋白水平与治疗前比较均无明显差异（P>0.05）;治疗组均优于对照 组（P<0.05）。结论蓉黄颗粒可显著改善非透析CKD-MBD肾虚湿热证患者的临床症状,纠正非透析CKD-MBD肾虚湿热证患 者钙磷代谢紊乱,抑制继发性甲状旁腺功能亢进,从而有效防治CKD-MBD,其主要作用机制可能与其显著改善患者血清 FGF23、FGFRs、Klotho蛋白水平密切相关。     

烫伤创面愈合后的瘢痕形成与神经支配

背景：既往研究表明神经因素在创面愈合中具有重要调控作用,但有关神经调节与创面愈合后瘢痕形成之间的关系鲜有报道。目的：观察烧伤创面愈合过程中神经支配与创面愈合质量之间的关系。方法：将30只大鼠右侧T9～L1阶段脊神经根切断,制作失神经支配皮肤模型;然后在大鼠背部右侧失神经支配皮肤区域制作直径4cm的深II度烫伤创面,设为模型组,左侧对称正常皮肤制作同样的创面,设为对照组,伤后连续观察创面变化,于7,14,21d采用免疫组织化学法观察I和III胶原分泌情况,并计算I/III型胶原比例的变化,探讨创面愈合速度及愈合质量。结果与结论：模型组l,III型胶原分泌和I／HI型胶原比值于伤后各时间点均显著低于对照组（P〈0.O5）。模型组I型胶原分泌与伤后7,14,21d逐渐增3JH（P〈0.05）,III型胶原于伤后21d时分泌明显增高（P〈O.05）,I/III型胶原比值与伤后21d时明显降低（P〈0.05）。结果证实,创面早期神经支配可以促进创面愈合,创面重塑期减轻神经支配可能会改善创面重塑质量。     

南京市低龄儿童龋相关危险因素初步研究

目的:研究南京市低龄儿童龋相关危险因素。方法:调查南京市某幼儿园共342例3~5岁儿童口腔健康状况,通过问卷调查收集基线资料,采用横断面研究方法探讨各因素的影响。结果:205例诊断为低龄儿童龋,患龋率为60.0%,其中119例诊断为重度低龄儿童龋,患病率为34.8%。简化软垢指数、菌斑指数、菌斑产酸能力、深点隙裂沟、母亲进食含糖食品频率和兄弟姐妹龋齿数是低龄儿童龋的危险因素。结论:南京市3~5岁儿童患龋率较高,应加强口腔卫生宣教。     

基于Wnt/β-catenin通路探讨加味黄芪甘草汤对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移及上皮间质转化的影响

目的 探究加味黄芪甘草汤冻干粉对人非小细胞肺癌细胞A549、PC9增殖、凋亡、侵袭、迁移及上皮间质转化的影响及可能的机制。方法 采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测1.0,2.0,4.0,8.0,12.0 g·L^-1加味黄芪甘草汤冻干粉对非小细胞肺癌细胞增殖的影响;将A549、PC9细胞分为空白组和加味黄芪甘草汤低、中、高组（2.0,4.0,8.0 g·L^-1）;平板克隆检测加味黄芪甘草汤对细胞克隆能力的影响;Hoechst 33342染色检测加味黄芪甘草汤对细胞凋亡的影响;划痕实验和Transwell小室实验分别检测其迁移与侵袭能力;微球体形成实验观察加味黄芪甘草汤对肿瘤细胞成球能力的影响,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测多能干细胞维持基因八聚体转录因子（Oct-4）、人性别决定区y框蛋白2（Sox2）、同源盒转录因子（Nanog）的mRNA表达水平,评估肿瘤干细胞活性;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2关联死亡启动子重组蛋白（Bad）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）,活化与非活化的胱天蛋白酶-3（cleaved Caspase-3、Caspase-3）,E-钙黏连蛋白（E-cadherin）,N型钙黏蛋白（N-cadherin）,波形蛋白（Vimentin）,基质金属蛋白酶-2（MMP-2）,β-连环蛋白（β-catenin）,c-核蛋白类基因（c-Myc）,细胞周期蛋白D₁（Cyclin D₁）,锌指转录因子（Slug）蛋白表达水平。结果 与空白组比较,A549、PC9细胞经1.0,2.0,4.0,8.0,12.0 g·L^-1加味黄芪甘草汤冻干粉处理24 、48 h,细胞增殖能力均被明显抑制,并呈浓度与时间依赖性（P<0.05,P<0.01）;加味黄芪甘草汤低、中、高组均能抑制A549、PC9细胞的克隆能力（P<0.05,P<0.01）;加味黄芪甘草汤高组均能诱导A549、PC9细胞凋亡（P<0.01）;加味黄芪甘草汤低、中、高组均能抑制A549、PC9细胞侵袭、迁移能力（P<0.05,P<0.01）;经加味黄芪甘草汤低、中、高组处理后,A549细胞的微球体体积明显缩小,A549、PC9细胞Oct-4、Sox2和Nanog mRNA表达量均降低（P<0.05,P<0.01）;加味黄芪甘草汤中、高组均能下调A549、PC9细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达（P<0.05,P<0.01）,上调促凋亡蛋白Bad、Bax及cleaved Caspase-3/Caspase-3的表达（P<0.05,P<0.01）;加味黄芪甘草汤中、高组均能下调A549、PC9细胞MMP-2、N-cadherin及Vimentin的表达（P<0.05,P< 0.01）,上调E-cadherin的表达（P<0.05,P<0.01）;加味黄芪甘草汤中、高组均能下调A549、PC9细胞β-catenin、c-Myc、Cyclin D₁及Slug表达（P<0.01）。结论 加味黄芪甘草汤可抑制人非小细胞肺癌A549、PC9细胞的增殖、侵袭、迁移、肿瘤干细胞活性及上皮间质转化,并能诱导凋亡,作用机制可能与Wnt/β-catenin信号通路有关。     

外伤性颅内血肿术后继发大面积脑梗死36例

2001年3月-2004年9月，我们共收治外伤性颅内血肿术后继发大面积脑梗死36例，现报告如下。