别孕烯醇酮对APPswe/PSEN1小鼠黑质多巴胺能神经元的影响

目的 评估别孕烯醇酮（APα）对阿尔茨海默病（AD）小鼠黑质（SN）酪氨酸羟化酶（TH）神经元数目的影响。方法 31只4月龄雄性小鼠采用免疫荧光染色观察和计算各种免疫阳性细胞的数目。结果 双转基因AD小鼠（2×TgAD）APα水平和TH神经元数目均明显减少,且出现在β 淀粉样斑块形成之前。给予APα处理可预防2×TgAD小鼠SN总神经元、TH神经元和TH/5 溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）神经元数目的下降,但对纹状体TH神经纤维吸光度下降无影响。此外,APα能增加2×TgAD小鼠新生成熟神经元的数目,但对新生胶质细胞数目无影响。结论 2×TgAD小鼠体内低水平APα与多巴胺能神经元下降相关,外源性APα能够通过增加新生TH神经元的形成来恢复2×TgAD小鼠TH神经元的下降。     

别孕烯醇酮对6-羟基多巴胺损伤的细胞系SH-SY5Y的保护作用

目的 明确别孕烯醇酮（APα）对6-羟多巴胺（6-OHDA）损伤的SH-SY5Y细胞系的保护作用，并阐明可能的分子机制。方法 向体外培养的SH-SY5Y细胞系中分别加入6-OHDA、APα、γ-氨基丁酸A受体（GABAAR）拮抗剂荷包牡丹碱（Bic）和电压门控L型Ca²⁺通道拮抗剂硝苯地平（nifedipine），采用免疫荧光细胞化学染色方法观察不同组别酪氨酸羟化酶（TH）阳性细胞的变化，Western blotting检测胞质钙调蛋白（CaM）、钙离子 钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ δ3（CaMKⅡδ3），胞核CaMKⅡδ3、脑源性神经营养因子（BDNF）和细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK1）表达的变化，采用蛋白质免疫共沉淀验证CaMKⅡδ3与CDK1/BDNF的相互作用。 结果 APα作用后，6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞TH和5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）阳性细胞数目均明显增加，而TH/BrdU双阳性细胞数目无显著变化；同时Western blotting结果表明，SH-SY5Y细胞胞质和胞核上述蛋白的表达与单纯 6-OHDA 组相比也明显上升，经Bic处理后各蛋白增加更为明显。免疫共沉淀结果表明，CaMKⅡδ3与CDK1/BDNF存在相互作用。 结论 APα对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞的保护中，GABAAR发挥负性调控作用，通过稳定细胞的内环境达到增加TH阳性神经元数量的目的，其中Ca²⁺ -CaM-CaMKⅡδ3信号通路和BDNF与CDK1发挥了关键作用。     

莪素油对慢性低氧大鼠学习与记忆和海马p—CaMKⅡ表达的影响

目的：探讨不同浓度的莪术油注射液对慢性低氧大鼠学习与记忆的影响和可能的机制。方法：将SD大鼠随机分为对照组、慢性低氧组、慢性低氧＋低、中和高浓度的莪术油组，持续饲养28d。实验结束次日，测试大鼠学习和记忆成绩的变化；测定血清和海马组织MDA和SOD的浓度；测定海马组织Ca^2＋浓度；观察磷酸化Ca^2＋／钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（p—CaMKⅡ）在海马组织染色和表达情况；应用透射电镜观察海马组织超微结构的变化。结果：慢性低氧组发现隐蔽平台的潜伏期延长；MDA含量明显增高，SOD活力明显降低；[Ca^2＋]i明显增高；p—CaMKⅡ染色较弱和表达量明显降低。中、高浓度莪术油组发现隐蔽平台的潜伏期缩短（P〈0．05）；莪术油各组MDA含量均显著降低；中、高浓度莪术油组血清SOD活力显著增加；莪术油各组[Ca^2＋]i明显降低；中、高浓度莪术油组p—CaMKⅡ免疫组化染色较强，表达量也明显增加（P〈0．05，P〈0．01）。慢性低氧组突触界限不清楚，树突棘和轴突均见水肿，突触囊泡及突触后致密物质消失；随着莪术油浓度的增加，突触和线粒体水肿逐渐减轻，突触后致密物质逐渐增多。结论：莪术油能够通过清除和对抗自由基的产生，增加突触后致密物质的表达来改善低氧大鼠学习和记忆能力，此作用呈剂量依赖效应。     

慢性复合性应激对大鼠学习和记忆影响及海马中CaMKⅡ CaMmRNA和CREBmRNA水平的变化

目的探讨慢性复合应激对大鼠学习与记忆的作用,以及Ca2 /钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、钙调蛋白(CaM)mRNA、环腺苷酸反应元件结合蛋白(CREB)mRNA水平的变化及其在学习和记忆中的作用。方法Wistar大鼠被随机分为慢性复合应激组(16只)和对照组(16只)。慢性复合应激组动物给予6周的慢性复合应激刺激,制备慢性复合应激模型;Morris水迷宫和Y迷宫测试大鼠空间学习和记忆的行为表现;免疫组织化学、Western blotting和RT-PCR检测大鼠海马CaMKⅡ、CaM mRNA和CREB mRNA水平的变化;观察分析CaMKⅡ在海马CA1和CA3区的分布和表达;电镜观察海马CA3区突触间隙的宽度和突触后致密物质(PSD)的厚度的变化。结果慢性复合应激6周后,应激组大鼠的学习与记忆能力均高于对照组(P<0.05,P<0.01);应激组海马CA3区突触间隙的宽度为5.0580±1.4216,PSD的厚度为20.9547±2.5693。与对照组相比,海马CA1和CA3区辐射层和始层CaMKⅡ的免疫染色明显增强,特别是始层;CaMKⅡ、CaM mRNA及CREB mRNA水平均明显增高(P<0.05,P<0.01)。结论慢性复合性应激后,大鼠的学习与记忆能力增强;海马CaMKⅡ、CaM mRNA和CREB mRNA水平增加可能是参与了慢性复合应激性学习记忆增强的机制。     

免疫球蛋白κJ区重组信号结合蛋白对CD133阳性室管膜细胞增殖与分化的影响

目的 探讨免疫球蛋白κJ区的重组信号结合蛋白(RBP-JK)对CD133阳性室管膜细胞增殖与分化的影响及可能的机制.方法 分离孕12 d的美国癌症研究所(ICR)胚胎小鼠(3只)侧脑室室管膜细胞进行原代培养,并使用 RBP-Jκ-siRNA 干扰 RBP-JK,以及选用2～3月龄体重为20～25 g 的 CD133-C...     

莪素油对慢性低氧大鼠学习与记忆和海马p-CaMKII表达的影响

目的：探讨不同浓度的莪术油注射液对慢性低氧大鼠学习与记忆的影响和可能的机制。方法:将SD大鼠随机分为对照组、慢性低氧组、慢性低氧+低、中和高浓度的莪术油组，持续饲养28 d。实验结束次日，测试大鼠学习和记忆成绩的变化；测定血清和海马组织MDA和SOD的浓度；测定海马组织Ca2+浓度；观察磷酸化Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II（p-CaMKII）在海马组织染色和表达情况；应用透射电镜观察海马组织超微结构的变化。结果:慢性低氧组发现隐蔽平台的潜伏期延长；MDA含量明显增高，SOD活力明显降低；［Ca2+］_i明显增高；p-CaMKII染色较弱和表达量明显降低。中、高浓度莪术油组发现隐蔽平台的潜伏期缩短（P<0.05）；莪术油各组MDA含量均显著降低；中、高浓度莪术油组血清SOD活力显著增加；莪术油各组［Ca2+］_i明显降低；中、高浓度莪术油组p-CaMKII免疫组化染色较强，表达量也明显增加（P<0.05，P<0.01）。慢性低氧组突触界限不清楚，树突棘和轴突均见水肿，突触囊泡及突触后致密物质消失；随着莪术油浓度的增加，突触和线粒体水肿逐渐减轻，突触后致密物质逐渐增多。结论:莪术油能够通过清除和对抗自由基的产生，增加突触后致密物质的表达来改善低氧大鼠学习和记忆能力，此作用呈剂量依赖效应。     

奥硝唑氯化钠注射液与阿昔洛韦配伍的稳定性考察

目的 对奥硝唑氯化钠注射液与阿昔洛韦配伍的稳定性进行考察。方法 采用紫外分光光度法，考察不同时间配伍液中2种药物的含量变化，并观察配伍液外观和pH值的变化。结果 奥硝唑氯化钠和阿昔洛韦在室温（25℃）和37℃恒温下配伍后，8h内外观、pH值及含量均无明显变化。结论 奥硝唑氯化钠注射液与阿昔洛韦配伍在8h内是稳定的。     

Experimental Study of Effect of Corticosterone on Primary Cultured Hippocampal Neurons and Their Ca^2＋／CaMK Ⅱ Expression

Summary: To explore the effect of different concentrations of corticosterone (CORT) on primary cultured hippocampal neurons and their Ca^2 /CaMK Ⅱ expression and possible mechanism, the changes of hippocampal neurons were observed in terms of morphology, activity of cells, cell death.concentrations of cytosolic free calcium, and the expression of CaMK Ⅱ by using MTT assay, flow cytometry, fluorescent labeling of Fura-2/AM and Western hlotting after 10^-7. 10^-8 and 10^-5 mol/L of CORT was added to culture medium. The evident effect of 10^-6 and 10^-5 mol/L of CORT on the morphology of hippocampal neuron was found. Compared with control neurons, the activity of the cells was markedly decreased and [Ca^2 ], increased in the neurons treated with 10^-6 and 10^-7mol/L of CORT. but no change was observed in the neuron treated with 10^-7 mol/L of CORT.The death was either by way of apoptosisor necrosis in the cells treated with 10^-4 and 10^-5mol/L of CORT respectively. The correlation analysis showed that a reverse correlation existed between [Ca^2 ];and the expression of CaMKⅡ. Either apoptosis or necrosis occurs in the hippocampal neurons treated with CORT. The increased hippocampal [Ca^2 ], is both the result of CORT impairing the hippocampal neurons and the cause of the apoptosis of hippocampal neurons and the decreased CaMKⅡ expression.     

慢性复合应激性学习记忆增强大鼠海马神经细胞增殖和突触后酪氨酸激酶表达的变化

目的探讨慢性复合应激性学习记忆增强大鼠海马结构各亚区神经细胞数量变化,以及突触后致密物酪氨酸激酶（Fvn）在海马内表达的变化及其意义。方法39只大鼠随机分为复合应激组、单一应激对照组和正常对照组。复合应激组动物进行6周的垂直旋转、睡眠剥夺、捆绑（6h／d）和夜间光照等慢性复合性应激实验;单一应激对照组进行6周的单一捆绑对照,6h／d。实验结束后,所有动物分别进行3d的Morris水迷宫测试,记录其学习和记忆成绩：并运用尼氏染色方法观察海马各区神经细胞数量的变化;同时采用免疫组织化学、RT-PCR方法检测Fvn在海马CA3区的表达变化以及海马Fyn mRNA水平的变化。结果单一应激对照组动物学习记忆成绩受损（P〈0．05）;复合应激组的学习与记忆成绩优于对照组（P〈0．05）;与对照组相比,复合应激组和单一应激组动物海马各区神经细胞数量明显增多（P〈0．05）;Fyn在复合应激组海马CA3区辐射层阳性表达比对照组明显增强（P〈0．05）,但单一应激对照组的则减弱（P〈0．05）;同时复合应激组动物的Fyn mRNA水平明显上调（P〈0．05）,而单一应激对照组的则明显下调（P〈0．05）。大鼠的学习记忆成绩与Fvn的表达呈正相关。结论6周慢性复合性应激使大鼠的学习与记忆能力加强;海马各区神经元数量增多;Fyn在海马中的表达和FynmRNA转录水平均增加。提示Fyn参与了慢性复合性应激增强大鼠学习记忆能力的过程。     

以实验课为特色的留学生解剖教学的初步研究

分析了温医解剖教研室的基本状况，为培养适应国际化竞争需求的高水平医学留学生，对留学生教学改革提出建议。