异基因人骨髓间充质干细胞与外周血单个核细胞体外共培养的相互影响

目的：探讨异基因骨髓间充质干细胞（BMSC）与外周血单个核细胞（PBMC）在体外共培养的相互影响。方法将异基因成人来源的BMSC与PBMC在体外分别按1：10混合共培养,采用氚胸腺嘧啶核甙掺入方法检测PHA刺激PBMC增殖的活性,采用ELISA方法检测培养液中分泌的IL-6、IL-8和PGE2水平。结果 BMSC与PBMC共培养组的PBMC增殖率明显减少（P〈0.01）,抑制率均超过50%。加入PBMC共培养后,BMSC分泌IL-6、IL-8和PGE2显著增加（P〈0.01）。结论 BMSC可以抑制PHA刺激引起的PBMC增殖,PBMC可以促进BMSC分泌免疫活性因子,BMSC可能具有双向的免疫调控作用。     

一例重症中暑患者CRRT治疗前后炎性因子水平变化

<正>重症中暑在临床上较为少见,各种炎症因子在病程中的变化及连续性肾脏替代治疗(CRRT)对其作用未见报道。本院收治一例重症中暑病人并经CRRT成功救治,笔者在此过程中观察了几种炎性因子的动态变化,以期为临床治疗此种病例提供新的思路。1资料与方法1.1病例资料患者,男,30岁,入院前3h在高强度军事训练中突发面色苍白、体力不支、呼之不应,心率最高达180次/min,呼吸急促,当地卫生队给予吸氧、补液     

慢性乙型肝炎病毒感染者恩替卡韦抗病毒治疗前后血清高尔基体蛋白GP73的变化

目的观察慢性乙型肝炎病毒感染患者恩替卡韦（ETV）抗病毒治疗前后血清GP73浓度的变化,探讨血清GP73水平对CHB病情进展和疾病转归的影响。 方法2012年1月至2014年10月于解放军第一八〇医院就诊的慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者1 150例,其中慢性HBV携带者（HBV-C）100例,CHB 550例,HBV相关肝硬化（LC）250例、原发性肝细胞癌（HCC）250例。选择同期50名健康体检者作为对照。采用ELISA法检测血清GP73浓度。入组患者中在知情同意基础上行肝组织活检的30例CHB患者肝组织标本进行免疫组织化学染色检查,探讨血清GP73浓度与肝组织GP73表达的相关性。550例CHB患者中共200例接受ETV抗病毒治疗1年以上,观察治疗前及治疗后1个月、3个月、6个月、9个月和12个月血清GP73浓度的变化。 结果慢性HBV感染者血清GP73水平显著高于对照组（F =191.60、P = 0.000）,且随着病情的进展,血清GP73浓度在HBV-C [（47.21 ± 17.69）ng/ml]、CHB [（101.56 ± 67.18）ng/ml]、HCC [（195.01 ± 104.22）ng/ml]和LC [（225.71 ± 99.37）ng/ml]中持续升高,各组间,差异均具有统计学意义（q_{HBV-C vs CHB} = 7.82,P = 0.000;q_{CHB vs HCC} = 15.85,P = 0.000;q_{HCC vs LC} = 2.63,P = 0.009）。经过相关性分析,血清GP73含量与慢性HBV感染者病情严重程度呈正相关（r = 0.576、P = 0.000）。30例CHB肝组织标本中,肝组织GP73表达呈弱阳性、中度阳性和强阳性的分别为6例（20.00%）、16例（53.33%）和8例（26.67%）。随着肝组织GP73表达程度的加重,其血清GP73浓度亦同步升高（F = 7.285、P = 0.003）。经过相关性分析,血清GP73浓度与肝组织GP73表达程度呈正相关（r = 0.592、P = 0.001）。200例CHB患者已接受ETV抗病毒治疗1年以上,随着病情的恢复,血清GP73浓度在ETV抗病毒治疗1、3、6、9和12个月后逐渐下降,分别为（97.26 ± 42.52）ng/ml、（68.21 ± 33.65）ng/ml、（58.57 ± 29.52）ng/ml、（51.76 ± 25.39）ng/ml和（53.37 ± 21.62）ng/ml,与治疗前血清GP73浓度[（113.09 ± 48.91）ng/ml]比较,差异均具有统计学意义（t_{1月后vs治疗前} = 3.45,P = 0.001;t_{3月后vs治疗前} = 10.69,P = 0.000;t_{6月后vs治疗前} = 13.50,P = 0.000;t_{9月后vs治疗前} = 15.74,P = 0.000;t_{12月后vs治疗前} = 15.79,P = 0.000）。血清GP73浓度在ETV抗病毒治疗3个月内下降幅度最大,与病情缓解及丙氨酸氨基转移酶复常相符合。 结论血清GP73水平与慢性HBV感染者疾病进展密切相关。接受ETV抗病毒治疗后血清GP73浓度的下降,提示肝脏炎症损伤的缓解。血清GP73可用于慢性肝病的预后监测指标。     

血清肝纤维化指标与肝纤维化病理改变的相关性研究

目的：研究血清中透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、三型前胶原N端肽（PⅢNP）及Ⅳ型胶原（CⅣ）等肝纤维化指标的水平与肝纤维化分期的相关性,探讨其在乙型肝炎患者肝纤维化非创伤性诊断中的临床应用价值。方法采用放射免疫分析法检测172例乙型病毒性肝炎患者血清中HA、LN、PⅢNP和CⅣ的含量,以肝组织活检作为“金标准”,评价肝纤维化指标与肝纤维化分期的相关性及其用于鉴别明显肝纤维化的诊断价值。结果血清中肝纤维化指标的含量与肝纤维化分期呈正相关,相关系数由高至低分别为HA（r =0.687）、PⅢNP（r =0.490）、CⅣ（r =0.406）和LN（r =0.392）;自S2期开始,以上4项指标的水平均显著升高,与S0、S1期比较差异具有统计学意义（P ＜0.05）;轻度肝纤维化（S0～S1）和明显肝纤维化（S2～S4）两组间4项指标的差异均有统计学意义（P ＜0.05）;ROC曲线显示：单项指标预测明显肝纤维化时,AUC由高至低分别为HA（0.846）、PⅢNP（0.786）、CⅣ（0.747）和LN（0.638）;敏感性分别为LN（Se =80.57%）、HA（Se =75.16%）、CⅣ（Se =73.38%）和PⅢNP（Se =69.54%）,特异性分别为HA（Spe =90.25%）、PⅢNP（Spe =81.89%）、CⅣ（Spe =71.51%）和LN（Spe =65.50%）,准确性分别为HA（83.18%）、PⅢNP（75.74%）、LN（68.46%）和CⅣ（62.53%）。4项指标联合检查,诊断的敏感性降低（Se =68.85%）,特异性提高（Spe =92.96%）,诊断准确率提高至86.44%。结论单个指标检查中,HA是诊断肝纤维化最有价值的一项,4项指标联合检查可提高诊断的特异性和准确度。     

血清“肝纤四项”联合检测诊断模型的建立

目的构建以"肝纤四项"为变量的诊断模型,并探讨该诊断模型对明显肝纤维化的诊断效能。方法选取485例乙型病毒性肝炎患者,随机分为建模组324例和验证组161例,采用放射免疫分析法检测建模组和验证组患者血清中HA、LN、PⅢNP、CⅣ的含量;采用二元Logistic回归分析法,以肝组织活检作为"金标准",构建以"肝纤四项"为变量的诊断模型;采用受试者工作特征(ROC)曲线,评价该诊断模型的诊断效能;用独立的验证组检验该模型的诊断效率。结果在二元Logistic回归分析中,确定了3项与研究终点相关的独立预测指标(HA、PⅢNP和CIV),由这3个指标建立了诊断模型FSM,FSM=1.56 ln(HA)+0.92 ln(PⅢNP)+1.90 ln(CⅣ)-8.18。FSM用于预测明显肝纤维化具有较高的诊断价值,ROC曲线下面积(AUC)为0.85。该模型应用于验证组,其诊断明显肝纤维化的AUC同样为0.85。根据ROC曲线,用于预测明显肝纤维化时,FSM取10.8为排除界值,敏感性和阴性预测值分别为88.31%和69%;取12.6为诊断界值,特异性和阳性预测值分别为93.55%和95.3%。比较FSM模型与HA的诊断效能,FSM模型的约登指数、阳性似然比、敏感性、特异性和准确率均高于HA,两者的AUC差异有统计学意义(Z=2.06,P0.05)。结论本研究所建立的"肝纤四项"联合检测FSM模型,一定程度上提高了诊断效能。将该模型应用于预测明显肝纤维化,可使65%~70%无或轻度肝纤维化乙型肝炎患者避免"肝组织活检"。作为一种非创伤性检查手段,该模型可用于动态监测乙型肝炎患者肝纤维化进程。     

血清高尔基体蛋白73诊断肝细胞癌价值探讨

目的评价血清高尔基体蛋白73（GP73）在肝细胞癌（HCC）诊断中的价值。方法选择400例HCC、100例肝硬化（LC）、100例慢性乙型肝炎（CHB）患者和200例健康对照者（HC）,分别采用ELISA和电化学发光法检测血清GP73和甲胎蛋白（AFP）水平;采用受试者工作特征曲线下面积（ AUROC）评估两者对HCC的诊断效能。结果 HCC、CHB和LC患者血清GP73水平分别为243.6±163.1ng/ml、85.6±35.3ng/ml和81.9±36.4ng/ml,均显著高于健康对照组（78.2±33.9ng/ml,P〈0.05）,但在CHB和LC组及HC三组间无统计学差异;GP73和AFP的最佳诊断临界值分别为150.7ng/ml和19.7ng/ml,GP73的AUROC为0.846,灵敏性为69.2%,特异度为90.5%,均显著优于AFP（AUROC为0.828,灵敏性为57.6%,特异度为88.1%,P〈0.05）;GP73与AFP两者联合检测可以进一步提高对HCC的诊断准确性（AUROC为0.887,灵敏性为73.5%,特异度为88.0%）;在AFP阴性与阳性的两组HCC患者中,GP73灵敏性和特异度无显著性差异。结论血清GP73对HCC的诊断效能高于AFP,两者联合检测可以进一步提高诊断效能。     

慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞的成熟度研究

目的：研究慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血树突状细胞（DC）的成熟度及其占单核细胞的比例,探讨CHB患者DC免疫治疗的机制。方法选取20例CHB患者和10例健康人,分别采集外周抗凝全血2 mL,流式细胞仪检测DC表面CD80、CD86、CD83的表达量及单核细胞表面CD14的表达。结果两组DC表面CD80、CD86、CD83分子表达无差异（P＞0．05）;CHB组较健康对照组单核细胞表面分子 CD14表达明显增多,具显著统计学差异（P＜0．05）;CHB组CD80、CD86、CD83三者表达之和占CD14的比例明显高于CHB组,两者有显著统计学意义（P＜0．05）。结论CHB患者外周血存在单核细胞增多、成熟DC减少现象,恢复DC功能是治疗CHB的手段之一。