富碘中药海藻对甲状腺细胞凋亡及凋亡调控基因的影响

目的:通过观察富碘中药海藻对碘缺乏机体甲状腺滤泡上皮细胞凋亡,Fas,FasL,Bcl-2蛋白表达的影响,分析富碘中药过量对甲状腺损伤的机制。方法:实验于2006-03/09在辽宁中医药大学实验中心完成。①实验干预:选用健康鼠龄4周的Wistar大鼠150只。取120只喂低碘饲料建立缺碘大鼠模型,随机分为4组,每组30只:单纯高碘组喂含碘2000μg/L的双蒸水;模型组喂等体积双蒸水;常规剂量海藻组和3倍剂量海藻组分别灌胃海藻生药量13.5g/(kg·d)和40.5g/(kg·d)。以其余30只大鼠为正常对照组:正常饮食,每日灌服等体积双蒸水。②实验评估:分别在给药0,7,28d后取材。采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导原位缺口末端标记确定甲状腺滤泡上皮细胞凋亡细胞数。采用免疫组化方法观察甲状腺滤泡上皮细胞Fas,FasL,bcl-2表达。结果:大鼠150只均进入结果分析。①凋亡细胞数:给药后7d,常规剂量海藻组和3倍剂量海藻组低于模型组,差异有非常显著性意义(P<0.01)。常规剂量海藻组和3倍剂量海藻组低于单纯高碘组,差异有显著性意义(P<0.05)。给药后28d,正常对照组甲状腺滤泡上皮细胞凋亡细胞数低于其他4组,差异有显著性或非常显著性意义(P<0.05～0.01)。常规剂量海藻组高于单纯高碘组,差异有显著性意义(P<0.05)。②Fas,FasL,Bcl-2蛋白表达:给药7d后,常规剂量海藻组和3倍剂量海藻组Fas蛋白的表达低于模型组,差异有显著性意义(P<0.05)。单纯高碘组和3倍剂量海藻组FasL表达低于模型组,差异有显著性意义(P<0.05)。常规剂量海藻组Bcl-2蛋白表达高于模型组,差异有显著性意义(P<0.05)。给药28d后,单纯高碘组和3倍剂量海藻组Fas蛋白的表达低于模型组,差异有显著性意义(P<0.05)。单纯高碘组、常规剂量海藻组和3倍剂量海藻组Bcl-2蛋白表达高于模型组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:富碘中药海藻给药28d可造成碘缺乏大鼠甲状腺细胞损伤,Fas,FasL,bcl-2可能参与诱导细胞凋亡。     

毒邪致病理论与痛风病因病机

毒邪一指病因,二指病理产物及致病因素,三指病证,四指病性,五指药物或药物的毒性或峻烈之性,病因之毒常被称为"毒邪",即"邪之甚者则为毒";包括外受毒邪、内生毒邪。痛风病因病机为外感毒邪、内生毒邪、外邪引动内伏之毒等。痛风病变之初多因先天禀赋不足,素体阳盛或后天调摄失养,脏腑功能失调,湿热浊毒内生。继则每因复感外邪侵扰而诱发内生伏毒,毒邪流注血脉、骨节、经络乃可发病。病久入络而致瘀毒,终因湿热瘀毒互致为患而脾肾亏虚。初为邪盛的实热证,继则出现气血亏虚和痰湿瘀血阻滞的本虚标实证。辨证遵循祛湿、泄热、解毒之法。认为未病先防,除节制饮食之外,对于内蕴湿毒之体,当及早干预,予以排毒通利之品,使邪去正安,脏腑和调。     

中药治疗弥漫性毒性甲状腺肿随机对照试验临床疗效的系统评价

目的系统地评价中药治疗弥漫性毒性甲状腺肿(Graves)病的临床疗效及其安全性。方法两名研究者独立进行计算及检索并进行系统地整理,检索年限为自建库年至2018年11月。检索语种为中英文,中文数据库有中国学术文献总库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、万方数字化期刊库和维普中文科技期刊数据库(VIP)。英文数据库为The Cochrane Library数据库、Pub Med电子期刊数据库、Note Express数据库和Springer电子期刊数据库,运用Review Manager 5. 3软件对数据进行统计学管理和处理。结果本研究共纳入10篇RCT文献,合计658例Graves病患者。两组治疗前后综合疗效Meta分析结果显示:OR=5. 0,95%CI为(2. 42,10. 36),P <0. 00001,表明试验组的综合疗效优于对照组;两组治疗前后中医证候积分Meta分析结果显示:OR=-3. 36,95%CI(-5. 34,-1. 39),P=0. 0008,表明试验组在改善Graves病患者中医证候积分方面优于对照组;两组治疗前后FT3、FT4、TSH、TRAb、TPOAb和TGAb的Meta分析结果显示分别为P <0. 00001、P <0. 00001、P <0. 0001、P=0. 04、P=0. 34、P <0. 0001,表明试验组在改善FT3、FT4、TSH、TRAb和TGAb等指标的疗效优于对照组,在改善TPOAb这一指标方面与对照组无统计学差异。两组治疗前后心率Meta分析结果显示:MD=-1. 98,95%CI(-3. 81,-0. 15),P=0. 03 <0. 05,表明试验组在改善Graves病患者心率方面优于对照组;两组治疗前后体重Meta分析结果显示:P=0. 14> 0. 05,表明试验组在改善Graves病患者体重方面与对照组无统计学差异。结论单纯中药或中西医结合治疗Graves病的临床疗效优于单纯西药治疗,尤其在改善中医证候积分、FT3、FT4、TSH、TRAb、TGAb以及改善心率等方面具有明确的疗效,并且具有较高的安全性。     

基于miRNA测序技术探讨补中益气汤治疗自身免疫性甲状腺炎的潜在机制

目的 探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎（AIT）小鼠甲状腺组织miRNA表达的影响。方法 选择NOD.H-2^h4小鼠共30只，随机分为正常组、模型组、补中益气汤组（BG组），每组各10只。根据分组给予小鼠含0.05%碘化钠水8周构建小鼠AIT模型后，灌胃给药8周取材。观察每组小鼠甲状腺组织病理改变情况，并对每组小鼠甲状腺组织差异miRNA进行实验验证及生物信息学分析。结果 与正常组比较，模型组甲状腺组织炎性细胞浸润明显，血清甲状腺球蛋白抗体（TgAb）水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，BG组甲状腺组织炎症程度减轻，血清TgAb水平显著降低（P<0.01）。与正常组比较，模型组小鼠白细胞介素（IL）-6、IL-17表达显著增高（P<0.01），IL-1β表达明显降低（P<0.05）；与模型组比较，BG组IL-1β、IL-6、IL-17表达明显降低（P<0.05）。与正常组比较，模型组得到154个差异表达miRNA；与模型组比较，BG组得到112个差异表达miRNA。实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）结果表明miR-326-3p、miR-128-3p、miR-223-5p、miR-141-3p、miR-871-3p、miR-204-3p表达与测序结果趋势一致。基因本体（GO）功能富集于T细胞活化调节、氧化应激、miRNA结合等方面；京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集于磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路、环磷酸腺苷（cAMP）信号通路等途径。差异miRNA预测得到3个关键基因，果蝇母源抗皮肤生长因子蛋白（Smad3）、Janus相关激酶2（JAK2）、信号转导和转录激活因子3（STAT3）。结论 补中益气汤可能通过调节6种miRNA干预自身免疫性甲状腺炎。     

蜂产品对糖尿病患者血糖的影响

蜂产品(蜂胶、蜂王浆、蜂蜜)常作为古代中医治疗消渴方中的佐剂。蜂产品(蜂胶、蜂王浆、蜂蜜)具有多样的生物活性和药理作用,现广泛应用于药品、保健食品中。蜂胶具有抗高血糖作用,能够降低糖尿病患者的血糖水平。蜂王浆及蜂蜜对血糖调节作用尚未完全确定。     

轻、中度碘过量对碘缺乏大鼠甲状腺功能和形态的影响

目的探讨轻、中度碘过量对碘缺乏Wistar大鼠甲状腺功能和形态影响。方法碘缺乏大鼠以饮用1%过氯酸钾溶液制备,分成0μg/L、840μg/L和1680μg/L碘组。双蒸水(DDW)组饲以DDW和普通饲料。固相免疫放射法(IRMA)测定血清TSH,放射免疫法(RIA)测定血清TT3、TT4、rT3和甲状腺组织TT4。光镜、电镜下观察甲状腺形态学变化。图像分析系统测量大鼠滤泡上皮细胞高度和滤泡腔的面积。结果补碘90天时,碘过量组血清TSH明显低于低碘对照组(均P<0.05),但与DDW组相比差异无显著性。1680μg/L碘组血清TT3值明显低于低碘对照组和DDW(均P<0.05),碘过量组血清TT4值明显高于低碘对照组和DDW组(均P<0.001),血清rT3高于低碘对照组和DDW组,但是差异无显著性,碘过量组甲状腺组织TT4含量明显高于低碘对照组和DDW组(均P<0.001)。甲状腺的相对重量均明显高于DDW组和低碘对照组(P<0.001和P<0.05)。碘过量组随着时间延长,滤泡上皮变扁,滤泡周围毛细血管逐渐减少,巨滤泡形成,同时有部分滤泡增生。碘过量组非增生滤泡上皮细胞高度明显小于DDW组和低碘对照组(均P<0.001),1680μg/L碘组泡腔面积明显大于DDW组和低碘对照组(均P<0.001)。结论轻、中度过量碘(尿碘中位数,MUI为300和600μg/L)处理90天,使碘缺乏大鼠甲状腺功能亢进,低碘致甲状腺肿不能完全恢复,甲状腺滤泡异质性增加。     

Effect of iodine intake on serum thyroglobulin——A five-year prospective epidemiological study

Objective To clarify the effect of iodine intake on serum thyroglobulin (Tg). Methods A 5-year prospective study was conducted in the 3 different iodine intake areas in China [Panshan (miht deficiency) ,Zhangwu (more than adequate) and Huanghua (excess)]. A total of 3 099 people with normal serum levels of Tg in 1999 were followed and 2 448 of these participants were feasible to be observed in 2004 and included in the present study. The serum levels of Tg, thyraglobulin antibody(TgAb), thyroid peroxidase antibody(TPOAb) and TSH, thyroid volume, family and personal histories of thyroid diseases were measured and inquried. The general linear model (GLM) was used to explore the determinants of Tg. Results Among the study population at baseline, serum Tg were significantly different in three areas [7.5 (4.4-13. 1) μg/L at Panshan, 6.8 (3.6-11.2)μg/L at Huanghua, 5.9 (3.2-10.7) μg/L at Zhangwu, P<0.01]. They were associated with age, sex and the rate of positive TgAb, abnormal thyroid volume, abnormal TSH and positive personal history of thyroid diseases, in order to control the effects of confounding factors, the data from 1856 subjects with thyroid-related indexes all in normal range and without personal history of thyroid diseases were analyzed to clarify the effect of iodine intake on Tg. The serum Tg among three areas were significantly different in both 1999 and 2004, they were all increased in 5 years with significant augment (△ Tg) among the three areas[3.1 (-0.2-8.0) μg/L at Panshan, 3.5 (0.5-9.0)μg/L at Huanghua vs 2. 5(0.3-6.1) μg/L at Zhangwu,P<0.01]. The GLM analysis revealed that age, Tg and TSH levels at baseline were the determinants of △Tg in addition to iodine intake. Conclusion Iodine intake is a dominant determinant of serum Tg. Age and TSH should also be considered while indicating iodine intake by serum Tg.     

高糖诱导人脐静脉内皮细胞衰老过程中活性氧与二甲基精氨酸二甲胺水解酶-非对称性二甲基精氨酸系统的变化

目的 观察高糖加速内皮细胞衰老过程中细胞内活性氧(ROS)水平与二甲基精氨酸二甲胺水解酶-非对称性二甲基精氨酸(DDAH-ADMA)系统的变化.方法 正常糖浓度培养液(5.5 mmol/L)和高糖培养液(11.0、22.0、33.0 mmol/L)作用于人脐静脉内皮细胞48 h后,用β-半乳糖苷酶染色鉴定衰老细胞,聚合酶链反应-酶联免疫吸附法(PCR-ELISA)检测端粒酶活性,流式细胞仪检测细胞内ROS水平,液质联用仪检测细胞上清液中ADMA含量及DDAH活性.结果 与正常糖浓度组相比,11.0、22.0、33.0 mmol/L高糖浓度组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞率明显增高[(7.00±1.73)%、(12.67±2.03)%、(16.00±2.26)%比(4.00±1.33)%,P＞0.05、P＜0.05、P＜0.05],端粒酶活性显著下降[(91.32±4.01)%、(78.44±3.78)%、(56.04±3.35)%比100%,均P＜0.05];随细胞衰老程度加重,细胞内ROS水平(mfi)显著升高(159.84±27.52、188.99±18.77、244.56±20.96比117.11±18.76,P＜0.05或P＜0.01),ADMA水平(μmol/L)显著升高(0.78±0.14、0.88±0.18、1.08±0.15比0.70±0.12,P＞0.05、P＜0.05、P＜0.05),DDAH活性显著下降[(91.32±4.01)%、(78.44±3.78)%、(56.04±3.35)%比100%,均P＜0.05].结论 高糖可加速内皮细胞衰老进程,其机制可能与氧化应激水平增强、抑制DDAH活性使ADMA含量增加有关.

Abstract：

Objective To investigate the changes in reactive oxygen species (ROS) and dimethylarginine dimethylaminohydrolase-asymmetric dimethylarginine (DDAH-ADMA) system in the process of endothelial cell senescence after exposure to high glucose. Methods The human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were cultured with different concentrations of glucose, e.g. 5. 5 mmol/L (normal level),and high levels as 11. 0, 22. 0 and 33. 0 mmol/L. for 48 hours, respectively. Subsequently, SA-β-gal staining was used to evaluate senescence of cells. Telomerase activity was detected by polymerase chain reactionenzyme linked immunosorbent assay (PCR-ELISA). The intracellular ROS level was measured by flow cytometry. The ADMA concentration and DDAH activity were determined with high-performance liquid chromatography. Results Compared with normal glucose concentration group, after the endothelial cells were treated with high glucose concentration (11. 0 - 33. 0 mmol/L) for 48 hours, the number of SA-β-gal positive cells was increased significantly [(7.00±1. 73)%, (12. 67±2. 03)%, (16. 00±2. 26)% vs. (4. 00±1.33)%, P＞0.05, P＜0.05, P＜0.05] and the telomerase activity was inhibited dramatically [(91. 32±4.01)%, (78. 44±3. 78)%, (56. 04±3. 35)% vs. 100%, all P＜0. 05]. The ROS level (mfi) was increased in all high glucose groups (159. 84±27. 52, 188. 99±18. 77, 244. 56±20. 96 vs. 117.11±18. 76, P＜0. 05 or P＜0. 01). At the same time, the ADMA (μmol/L) production was increased (0. 78±0. 14, 0. 88±0.18,1. 08±0.15 vs. 0. 70±0. 12, P＞0. 05, P＜0. 05, P＜0. 05), and DDAH activity was decreased [(91. 32±4.01)%, (78.44±3.78)%, (56. 04± 3. 35)% vs. 100%, all P＜0.05]. Conclusion High glucose can accelerate endothelial cells senescence in dose-dependent manner and the underlying mechanism may be related to an increased oxidative stress and change in DDAH-ADMA system.     

新诊断2型糖尿病患者证候分析

目的:探讨新诊断2型糖尿病中医证候分布及变化规律。方法:对345例新诊断2型糖尿病患者的证候分布进行流行病学调查和统计分析。结果:因新诊断2型糖尿病病人症状不典型或无明显症状,有25.22%的病历无法按所选标准确定征候;入选病历中实证和虚症出现频数基本相等;在单证中实证出现的比例大于虚症;证候为三种及三种以下者占69.86%;在组合证候中无纯虚症组合。结论:燥热、胃热、气虚、阴虚是新诊断2型糖尿病的重要表现。实证在糖尿病的发病中起了重要作用。     

新诊断2型糖尿病湿热困脾证与血清促甲状腺激素的关系研究

目的:分析新诊断2型糖尿病患者湿热困脾证与血清促甲状腺激素水平的相关性。方法:将新诊断2型糖尿病患者根据首次就诊时的症状及舌脉进行辨证分型,取湿热困脾组、气阴两虚组、健康对照组为研究对象,对所有受检者计算体重指数(BMI)和腰臀比(WHR),并检测其血清促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺激素4(FT4)。结果:①湿热困脾组的BMI明显高于气阴两虚组及对照组(P<0.05),而气阴两虚组及湿热困脾组的WHR分别高于对照组(P<0.05),两个实验组之间相比(P>0.05)。②湿热困脾组的血清TSH明显高于气阴两虚组及对照组(两组比较P值均<0.01)。③湿热困脾组中,血清TSH≥4.5μIU/mL的患者的BMI及WHR明显高于血清TSH在2.5～4.5μIU/mL的患者(P<0.05),而血清TSH在2.5～4.5μIU/mL的患者的BMI及WHR明显高于血清TSH在1.0～2.5μIU/mL的患者(P<0.05)。结论:伴超重的2型糖尿病患者血清TSH偏高可能作为湿热困脾证诊断的参考指标之一。