基于网络药理学探讨百令胶囊治疗慢性阻塞性肺疾病的作用机制

目的 采用网络药理、分子对接预测百令胶囊治疗慢性阻塞性肺疾病（COPD）的药效物质基础和核心靶点，并通过细胞实验进一步验证以探讨其作用机制。方法 通过中药系统药理分析数据库（TCMSP）和Swiss Target Prediction数据库筛选百令胶囊的主要活性成分及相关靶点。从人类基因数据库（GeneCards）、DrugBank数据库、在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）及药物靶标数据库（TTD）等数据库中检索获取COPD主要靶点。通过蛋白质相互作用平台（STRING）与Cytoscape 3.6.1软件构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络。应用生物学信息注释数据库（DAVID）进行基因本体（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析。通过AutoDock Vina进行分子对接验证。采用3-（4，5-dimethylthiazol-2-yl）-5-（3-carboxymethoxyphenyl）-2-（4-sulfophenyl）- 2H-tetrazolium（MTS法）检测细胞活性，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测靶点的mRNA水平。结果 共获得啤酒甾醇（cerevisterol）等11个百令胶囊活性成分，相关药物靶点270个，COPD靶点蛋白1 020个，二者交集74个。PPI网络图可视化分析显示，百令胶囊治疗COPD核心靶点为肿瘤蛋白P53（TP53）、连环蛋白β1（CTNNB1）、肿瘤坏死因子（TNF）、白细胞介素（IL）-6及胰岛素（INS）。KEGG通路富集分析筛选得到20条信号通路作为百令胶囊治疗COPD的主要途径，涉及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路、环磷酸腺苷（cAMP）信号通路、叉头框蛋白O（FoxO）信号通路、TNF信号通路、巨噬细胞缺氧诱导因子-1（HIF-1）信号通路等，分子对接验证表明4种活性成分与IL-6结合能最低且稳定。与空白组比较，百令胶囊组可显著降低脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7细胞IL-6 mRNA表达水平（P<0.01）。结论 该研究初步揭示了百令胶囊治疗COPD的药理机制可能为其主要有效成分通过作用于TP53、CTNNB1、TNF、IL-6等靶点，调控PI3K/Akt信号通路、cAMP信号通路等信号通路来改善炎症反应，从而缓解COPD症状，并为后续深入研究提供了实验依据，也为疾病相关临床治疗提供了诊治方向。     

活性银离子抗菌液联合通窍鼻炎颗粒治疗儿童慢性鼻窦炎的疗效

目的 探讨活性银离子抗菌液联合通窍鼻炎颗粒治疗儿童慢性鼻窦炎的效果。方法 选取2017年7月~2019年5月我院诊治的儿童慢性鼻窦炎患者214例,采用随机数字表法分为治疗组和对照组,每组107例。对照组给予活性银离子抗菌液治疗,治疗组在对照组基础上联合通窍鼻炎颗粒治疗,比较两组临床疗效、生活质量（SNOT-20）评分、血清IL-5、IL-8水平。结果 治疗组总有效率为92.52%,高于对照组的75.70%,差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗后,治疗组鼻相关症状、活力状态、社会功能及情感状态评分低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗组血清IL-5、IL-8水平低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论 活性银离子抗菌液联合通窍鼻炎颗粒治疗儿童慢性鼻窦炎效果较佳,能有效降低炎症因子水平,改善体力,提高生活质量。     

基于NLRP3通路研究青梅复方对急性痛风性关节炎的干预作用及机制

目的 明确青梅复方对急性痛风性关节炎（AGA）大鼠的治疗作用，初步阐明其作用机制。方法 将40只雄性SD大鼠按体质量随机分为空白组、模型组、秋水仙碱组（0.3 mg·kg ^-1）、青梅复方低、高剂量组（200、400 mg·kg^-1），每组8只。模型组及给药组踝关节注射50 g·L^-1尿酸钠盐（MSU）溶液制备AGA大鼠模型，分别于造模前及造模后6、24、48 h测量大鼠踝关节肿胀指数，采用苏木素-伊红（HE）染色观察AGA大鼠关节组织病理变化，免疫组化检测大鼠关节组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的表达，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠关节组织中NOD样受体蛋白3（NLRP3）通路及关键蛋白表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠踝关节肿胀指数、滑膜增生及炎性浸润程度显著升高，且踝关节IL-1β、TNF-α、NLRP3蛋白表达及胱天蛋白酶-1（Caspase-1）的剪切体和前体蛋白的比值（Caspase-1 p20/Caspase-1）显著上调（P<0.01）。与模型组比较，青梅复方能够明显降低AGA大鼠踝关节肿胀指数，尤其以青梅复方低剂量效果显著（P<0.01）；同时青梅复方不仅抑制滑膜增生及炎性浸润（P<0.01），且显著下调关节组织中IL-1β、TNF-α、NLRP3蛋白水平及Caspase-1 p20/Caspase-1（P<0.01）。结论 青梅复方能够显著缓解AGA的关节肿胀及炎症浸润，其机制可能与抑制NLRP3信号通路有关。     

至宝三鞭丸基于Nrf2/HO-1通路的抗疲劳作用机制研究

目的 通过观察至宝三鞭丸(Zhibao Sanbian Pills)对Nrf2/HO-1信号通路的影响,研究其对小鼠的抗疲劳作用及机制。方法 将ICR小鼠随机分为正常对照组、至宝三鞭丸低剂量(0.958 g·kg^-1)组、至宝三鞭丸中剂量(4.79 g·kg^-1)组、至宝三鞭丸高剂量(9.58 g·kg^-1)组,每组25只,连续给药35 d,记录体质量。采用负重游泳实验评价至宝三鞭丸的抗疲劳作用;比色法检测各组小鼠血清中的尿素氮(Urea nitrogen,UN)和乳酸(Lactic acid)水平;比色法检测各组小鼠肝组织中的糖原(Liver glycogen)含量;Western Blot检测各组小鼠肝组织中核因子红细胞2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、核孔糖蛋白62(Sequestosome 1,P62/SQSTM1)、血红素加氧酶1(Heme oxygenase-1,HO-1)和醌氧化还原酶1(Quinone oxidoreducta...     

祛风骨痛巴布膏对肌筋膜疼痛综合征模型大鼠的干预作用及机制研究北大核心CSCD

旨在研究祛风骨痛巴布膏对肌筋膜疼痛综合征(myofascial pain syndrome,MPS)大鼠的干预作用,并从改善肌肉炎症疼痛角度初步探索作用机制。将SD雄性大鼠分成6组,为正常组、模型组、阳性药活血止痛膏组以及祛风骨痛巴布膏低、中、高剂量组(75、150、300 mg·d-1)。通过打击结合离心运动法建立MPS动物模型,造模期间,外用贴敷祛风骨痛巴布膏进行干预,同时以活血止痛膏进行同种方式给药对照。标准VonFrey纤维评价机械痛阈值;丙酮检测冷痛阈值;检测触发点肌肉电生理活动,并进行触发点肌肉电分析;CatWalk步态分析仪检测疼痛诱导的步态适应性变化;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠触发点肌肉和给药处皮肤组织病理变化;免疫组化法检测触发点肌肉组织中辣椒素受体1(TRPV1)以及皮肤组织中白细胞介素(IL)-33的表达;蛋白质免疫印迹检测触发点肌肉组织中TRPV1、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白表达水平。结果发现,与模型组相比,祛风骨痛巴布膏外贴后,各组大鼠机械痛敏阈值和冷痛阈值升高;模型组出现自发肌电活动,而祛风骨痛巴布膏能剂量依赖地减弱自发肌电活动;步态分析显示祛风骨痛巴布膏各组对站立持续时间、平均强度、摆动速度、最大接触点、最大接触面积、爪印长度、爪印宽度、爪印面积都有明显提升;病理分析显示祛风骨痛巴布膏治疗后触发点处肌肉排列紊乱程度下降,肌纤维黏连及萎缩减少,炎性细胞浸润现象有所缓解;此外,祛风骨痛巴布膏和活血止痛膏均在一定程度上抑制MPS大鼠触发点肌肉组织中TRPV1、PI3K、Akt、p-Akt、IL-1β和TNF-α等相关蛋白表达,而给药皮肤位置病理结构及IL-33表达较正常组相比无显著差异。相关研究结果证实祛风骨痛巴布膏能通过抑制MPS模型大鼠肌肉触发点中TRPV1/PI3K/Akt信号通路进而抑制炎性因子释放,最终减弱局部肌肉的萎缩黏连及炎性浸润,缓解MPS大鼠肌肉疼痛,且局部给药无皮肤刺激作用。     

基于生物信息学分析整合组方规律发掘白脉软膏治疗白脉病的作用机制及其功效组配伍特点

目的 基于系统理论思想从网络视角探索白脉软膏治疗白脉病的作用机制及其功效组配伍特点,为指导临床合理用药提供生物学依据。方法 利用中医药百科全书数据库（ETCM）和中医药整合药理学研究平台（TCMIP）获得白脉软膏的化学成分及对应的候选靶标谱,根据白脉病的临床病理学特征,以神经病理性疼痛、炎性疼痛、慢性疼痛和腰椎间盘突出根性神经痛4种疾病/症状为关注点,在人类表型本体（HPO）,DisGeNET等数据库收集白脉病相关的疾病基因集,构建“白脉软膏活性成分靶标-白脉病相关基因集”相互作用网络,在此基础上筛选其核心网络节点并进行富集分析,探讨白脉软膏组方中活血通络组（姜黄、麝香、碱花）,行气止痛组（肉豆蔻、甘松、藏菖蒲）,温经散寒通络组（干姜、花椒、藏茴香）和健脾温肾强骨组（阳起石、甘草）4个功效组配伍治疗白脉病的作用机制。结果 白脉软膏所含4个功效组富集的通路主要分布于神经系统功能、炎症-免疫系统调节和机体能量代谢3个模块,各模块间通过共有靶标基因关联又各有侧重。其中,活血通络组和行气止痛组对神经系统功能的调节作用可概括为活血补气和醒神开窍;行气止痛组和健脾温肾强骨组主要用于推动机体气机运行,促进血液化生,增强机体免疫,维持炎症-免疫系统的调节;健脾温肾强骨组和温经散寒通络组主要通过补脾益气及温热药性来调节机体能量代谢;全方分析侧重挖掘白脉软膏从多维度、多层次干预白脉病的作用机制,各功效组强调其在神经系统功能、炎症-免疫调节、机体能量代谢中各有侧重的作用特点,2种网络分析模式相互补充、相互印证。结论 白脉软膏主要通过调节神经系统功能、维持机体炎症-免疫系统平衡及干预机体能量代谢的整合效应来发挥其对白脉病的治疗作用,相关研究可为白脉软膏作用机制的深入阐释提供参考,并有助于指导其临床合理用药。     

内毒素诱导小鼠葡萄膜炎视网膜中补体系统的变化

目的研究内毒素诱导葡萄膜炎（EIU）视网膜中补体系统的活化情况。方法将Balb/c小鼠随机分为对照组和实验组,通
过玻璃体腔注射内毒素建立EIU小鼠模型。建模24 h后,分离对照组和实验组小鼠的视网膜,分别提取总蛋白和总mRNA。采
用实时荧光定量PCR检测视网膜中补体经典途径（C1qb、C4b）、血凝素途径（MASP1、MASP2）和替代途径（CFB、C3）、末端通路
（C5）中关键因子mRNA 的表达水平。采用Western blotting检测视网膜中补体系统经典途径和替代途径中的关键因子（C1q、
C4、C3）蛋白的表达情况。结果正常小鼠视网膜细胞可表达大部分补体系统成分的基因。同对照组相比,实验组小鼠视网膜
中C1qb、C4b、CFB、C3的mRNA表达水平升高;MASP1、MASP2在视网膜上表达量很低,实验组与对照组无统计学差异。同时
实验组C1q、C4、C3的蛋白水平比对照组也明显升高。结论EIU小鼠在炎症高峰期补体系统尤其经典途径和替代途径被激活,
激活的补体系统可能在EIU的病理过程中起作用。
     

盐酸氨溴索联合通窍鼻炎颗粒治疗幼儿分泌性中耳炎的临床效果

目的 观察盐酸氨溴索联合通窍鼻炎颗粒治疗幼儿分泌性中耳炎的临床效果。方法 选取2015年3月~2017年9月我院诊治的分泌性中耳炎患者120例（170耳）,按照随机数字表法分为治疗组60例（90耳）与对照组60例（80耳）。对照组口服盐酸氨溴索,治疗组在对照组基础上加用通窍鼻炎颗粒,比较两组治疗前后咽鼓管功能正常占比、临床疗效及不良反应率。结果治疗后,治疗组咽鼓管功能正常占比为72.22%,高于对照组53.75%,差异具有统计学意义（P＜0.05）;治疗组总有效率为81.11%,高于对照组的62.50%,差异具有统计学意义（P＜0.05）;治疗组不良反应总发生率为8.33%,高于对照组的6.67%,但差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 盐酸氨溴索联合通窍鼻炎颗粒治疗幼儿分泌性中耳炎,可促进咽鼓管功能恢复正常,临床疗效确切,且无明显不良反应发生,安全有效。     

泪道探通术联合留置探针应用加替沙星凝胶治疗6月龄以上婴幼儿复杂性鼻泪管阻塞的研究

目的 探讨泪道探通术联合留置探针应用加替沙星凝胶治疗6月龄以上婴幼儿复杂性鼻泪管阻塞的短期临床疗效及其相关影响因素。 方法 回顾性分析2014年6月—2017年12月于重庆市妇幼保健院眼科就诊的123例(123只眼)6月龄以上复杂性鼻泪管阻塞婴幼儿的临床资料，采用泪道探通术联合留置探针应用加替沙星凝胶治疗患眼。随访患儿短期疗效及治疗并发症情况，依据患儿就诊时年龄、鼻泪管阻塞部位及阻塞性质分组，比较不同组间患眼治愈率情况。 结果 经短期随访，123只眼中共115只眼达到治愈标准，总体患眼治愈率为93.4%。术后12例患儿患侧眼睑发生轻度水肿，观察后自行好转，无严重术中、术后并发症发生。不同年龄组间[6~12个月组(96.8%) vs. 12~24个月组(91.1%) vs. ＞24个月组(86.7%)]患眼治愈率差异无统计学意义(P=0.165)；不同阻塞部位组间[上段组(92.1%) vs.中段组(85.7%) vs.下段组(97.5%) vs.阻塞≥2个部位组(95.8%)]患眼治愈率差异无统计学意义(P=0.292)，不同阻塞性质组间[骨性组(95.8%) vs.膜性组(85.7%)]患眼治愈率差异无统计学意义(P=0.143)。 结论 泪道探通术联合留置探针应用加替沙星凝胶是治疗6月龄以上婴幼儿复杂性鼻泪管阻塞的一种简便有效的新方法，适用于不同年龄段、不同阻塞部位以及不同阻塞性质的多种临床分型患儿，且无严重操作相关并发症发生。