缺血后处理改善微循环、减轻骨骼肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的:观察缺血后处理(I-postC)对大鼠后肢骨骼肌微循环和缺血再灌注(I/R)损伤的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠24只,随机分为3个实验组,即I/R组、I-postC组和预处理(IPC)组(n均=8),左后肢作为自身对照。无创动脉夹夹闭右侧股动脉4h,松夹再灌注2h建立大鼠后肢I/R模型。于再灌注结束时分别检测大鼠胫前肌血氧饱和度(StO2)、微循环、血流动力学变化以及骨骼肌湿、干重比值(W/D)和骨骼肌组织丙二醛(MDA)含量。结果:(1)再灌注I-postC减轻I/R对心功能的抑制,I-postC组+dp/dtmax和-dp/dtmax较I/R组分别增高18.5%和21.3%(P<0.05),I-postC组W/D较I/R组降低4.9%(P<0.05);I-postC组MDA较I/R组降低40.9%(P<0.05)。(2)再灌注I-postC组实验侧细静脉血流速度较I/R组增加8.3%(P<0.05),细动、静脉收缩减轻(细动、静脉内径较I/R组分别增加14.8%和29.1%,P<0.05),与IPC的保护效果接近(P>0.05)。结论:I-postC显著减轻骨骼肌I/R损伤,其保护机制与改善微循环有关。     

细胞内的氧化还原感受器蛋白与氧化还原信号转导

正1背景氧化还原反应是哺乳动物细胞存活所必需的,在细胞内的生化反应及代谢过程中氧化与还原占据着重要的位置。细胞内环境中氧化还原状态的轻微改变可能对细胞的生物活性产生重大影响。理论上,细胞内氧化还原状态的改变必须通过测定不同氧化还原电子对的还原电位来定量~([1-2])。但在实际的生物学研究当中,人们所说的氧化还原状态通常     

缺血再灌注诱导大鼠骨骼肌组织蛋白质组变化的初步研究

目的：研究缺血再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)对大鼠骨骼肌组织蛋白质表达谱的影响。方法：健康雄性Wistar大鼠12只随机分为2组(n=6)：假手术组和I/R组，无创动脉夹夹闭右侧股动脉4 h，松夹再灌注24 h建立I/R模型；实验结束时提取骨骼肌组织蛋白质，双向电泳技术分离骨骼肌组织蛋白质，分析差异显示的蛋白质并选取7个差异显著的蛋白点进行质谱分析。结果：双向电泳可分离(354±13)个蛋白质，点匹配率为(78.7±1.4)%，I/R诱导骨骼肌组织10种蛋白质出现明显差异表达，其中6种表达上调，3种表达下调，1种在I/R组为2个点。质谱鉴定出5个蛋白质为：线粒体醛脱氢酶(mitochondrial aldehyde dehydrogenase，ALDH)前体、热休克蛋白27(heat shock 27 kD protein，HSP27) 和一未命名蛋白（I/R组表达升高）、α-肌动蛋白(α- actin，I/R组表达下降）、核转移因子2 (nuclear transport factor 2，NTF - 2) 在I/R组发生突变。结论：I/R损伤引起大鼠骨骼肌蛋白质表达发生改变，其中α-肌动蛋白、ALDH和HSP27表达及NTF-2突变可能与I/R损伤有关。     

非酮症性高渗性糖尿病昏迷的救治体会

非酮症高渗性糖尿病昏迷（NHDC）是内科的急危重症之一，临床上因其常继发于各种严重疾病，故极易误诊和漏诊，不能得到及时有效的治疗。病死率高达40～70％．本文报告我院自1992年3月后治疗成功NHDC患者7例的临床体会。1临床资料7名患者中男性5例，女性2例。年龄57～73岁，平均为62．5岁。其中5例为非胰岛素依赖型糖尿病轻型，2例无糖尿病史。7例中，嗜题3例，钱昏迷毛例。诱因中感染4例（上呼吸道感染3例，肺部感染1例），脑梗塞3例。2实验室检查血糖33．3～63．SMmol／L，平均为38．7Mmol／L；血钢132～187Mmol／L，平均为154．ZM…     

苯丁酸钠体外对人肝癌细胞分化、抑癌基因表达的调控

目的探讨苯丁酸钠(SPB)诱导人肝癌细胞Bel-7402生长抑制、分化和细胞周期阻滞,以及对抑癌基因P21WAF1/CIP1、P27表达的影响。方法培养Bel-7402,应用溴化四唑蓝比色法观察SPB对Bel-7402的生长抑制作用,倒置相差显微镜观察细胞形态改变,流式细胞术分析细胞周期,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Bel-7402细胞中P21WAF1/CIP1、P27mRNA表达水平。结果SPB处理后Bel-7402的生长缓慢,处理后的细胞成纤维母细胞样改变,细胞阻滞于G1期(78.8±3.6,50.6±4.0;P<0.05),P21WAF1/CIP1基因表达水平增强(0.08±0.13,0.72±0.14;P<0.05),P27mRNA的表达明显增强(0.09±0.11,0.61±0.12;P<0.05)。结论SPB抑制人肝癌细胞株Bel-7402的生长,诱导人肝癌细胞分化,使细胞阻滞于G1期,SPB诱导抑癌基因P21WAF1/CIP1、P27表达。     

胰岛素对神经细胞神经型一氧化氮合酶表达及活性的影响

一氧化氮合酶主要有三种同工酶:内皮细胞型一氧化氮合酶(eNOS),神经型一氧化氮合酶(nNOS)和可诱导型一氧化氮合酶(iNOS).前两者又称为构成型,它们在生理情况下催化生成少量的一氧化氮执行细胞间信息传递功能.近年来的研究发现胰岛素可上调eNOS的表达及活性,从而执行舒张血管的作用.那么,胰岛素对另一种构成型一氧化氮合酶,即nNOS,是否也有调节作用?尚未见直接的实验证据.为了进一步探索胰岛素在神经系统中的调控作用,本实验以体外培养的大鼠神经细胞为实验对象,应用流式细胞术、原位杂交、电子自旋共振等技术方法研究胰岛素对神经细胞中nNOS的调节作用.     

腹主动脉狭窄致大鼠心肌肥大后心肌组织蛋白质组变化的研究

目的探讨腹主动脉狭窄诱导大鼠心肌肥大后心肌组织蛋白质表达谱的变化。方法健康雄性Wistar大鼠12只,随机分为模型组和对照组（均n=6）。模型组行腹主动脉缩窄术,对照组仅分离腹主动脉不行缩窄术。术后4周结束实验并提取左心室组织蛋白质,双向电泳分离心肌组织蛋白质,分析差异显示的蛋白质并选取9个差异显著的蛋白点进行胶内酶切和质谱分析。结果双向电泳可分离（454±13）个蛋白质,点匹配率为（78．7±1．4）％,心肌组织13种蛋白质出现明显差异表达,与对照组比较,模型组4种蛋白质表达上调,9种蛋白质表达下调。质谱分析鉴定出7个蛋白质为：与能量代谢相关的丙酮酸脱氢酶E1和β-烯醇酶、与细胞收缩功能相关的α-肌球蛋白重链和心脏α-肌动蛋白前体、与甲状腺激素代谢相关的甲状腺素结合蛋白等5种蛋白质在模型组表达下调,肌球蛋白轻链和与细胞内源性保护相关的热休克蛋白B6等2种蛋白质在模型组表达上调。结论腹主动脉缩窄致大鼠心肌肥大后,心肌组织蛋白质组变化显著,这些变化涉及与心肌细胞能量代谢、细胞骨架以及心肌收缩等有关的几组蛋白质,提示上述蛋白质组改变可能参与了心肌肥大过程。     

神经元型一氧化氮合酶的核转位现象

目的：研究神经元型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase,nNOS）的亚细胞分布。方法：以体外培养的大鼠星形胶质细胞以及神经细胞株PC12、R2为研究对象,应用共聚焦激光扫描显微镜及Western Blotting技术检测nNOS的亚细胞分布。结果：次传代后的前6天,nNOS主要分布于星形胶质细胞的细胞质内，细胞核内几乎没有分布。在次传代后的第7天,nNOS主要分布于细胞核内,且持续时间近10 h。此后,nNOS又主要分布于细胞质内。然而，在神经细胞株PC12、R2没有发生nNOS核转位.结论：在一定的体外培养时间,星形胶质细胞发生nNOS核转位,并且nNOS核转位是原代培养神经细胞特有的一种生物学行为。     

苯丁酸钠对两种人肝癌细胞抑癌基因表达的影响

乙酰化是一种重要的基因表达调控方式,各种肿瘤的发生往往存在乙酰化的紊乱.去乙酰化酶抑制剂苯丁酸钠(sodium phenylbutyrate,SPB)体外可诱导白血病细胞系和实体肿瘤细胞系发生分化[1～3],但有关SPB对人肝癌细胞的诱导作用以及抑癌基因表达调节的研究国内未见报道.本实验我们对此进行了探讨.     

常压氧疗对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障损伤的作用及机制

目的 研究常压氧疗对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障损伤的作用及机制。方法 采用大鼠大脑中动脉线栓法制备脑缺血再灌注模型。随机将30只SD雄性大鼠,分为模型对照组和常压氧疗治疗组各15只,缺血90min后再灌注24h。采用TTC染色、伊文思蓝法和明胶酶谱技术,分别检测脑梗死体积、血脑屏障通透性及缺血脑组织基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的活性,并进行神经功能评分。结果 与对照组比较,常压氧疗治疗组大鼠的脑梗死体积、缺血脑组织伊文思蓝外渗率及MMP-9的活性显著降低(P﹤0.01),神经功能缺陷也得到显著改善。结论 缺血期内的常压氧疗对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障的损伤具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制MMP-9的活性来实现的。