静脉血栓患者炎性因子和凝血指标的关系

目的探讨重症监护病房高危静脉血栓患者炎性指标和纤维蛋白原、D-二聚体关系及防治措施。方法对128例重症监护病房高危静脉血栓患者(实验组)和65例正常对照者(对照组)分别进行高敏-C反应蛋白和纤维蛋白原、D-二聚体检测;应用肝素(5000U,每天3次,静脉注射)或低分子量肝素(100U/kg,皮下注射),华发林(2～3mg,口服),5d前后检测上述指标变化。结果实验组的高敏C-反应蛋白、纤维蛋白原、D-二聚体高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05～0.01);应用肝素、低分子量肝素或华发林后,上述指标显著性降低(P<0.05或<0.01)。结论重症监护病房高危静脉血栓患者存在明显的高凝状态,采用抗凝尤其是低分子肝素可改善血液流变学、降低血液黏度,高敏C反应蛋白、纤维蛋白原和D-二聚体可作为抗凝的有效指标。     

宫腔声学造影在绝经后子宫出血中的诊断价值

绝经后子宫出血是妇女月经停止1年后阴道不规则流血,常见于粘膜下肌瘤、子宫内膜息肉、子宫内膜癌、内膜增生过长等疾病。宫腔声学造影（sonohysterography,SHG）已成功地用于检查宫腔内病变,通过增强内膜和宫内病变与宫腔的对比,能更清晰显示官腔内病变的部位、大小、形态、数目、回声性质,基底情况及与宫壁的关系。     

组蛋白去乙酰化酶4和血管内皮生长因子受体-1对肝癌细胞株HepG2侵袭黏附的影响

目的研究组蛋白去乙酰化酶4(histone deacetylase 4,HDAC4)和血管内皮生长因子受体-1(vascular endo-thelial growth factor receptor-1,VEGFR-1)在肝癌细胞株HepG2中的表达,观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histonedeacetylase inhibitors,HDACI)苯丁酸钠(sodium phenylbutyrate,SPB)作用于肝癌细胞株HepG2后,HDAC4、VEG-FR-1之间的变化及对肝癌细胞株HepG2侵袭、黏附作用的影响。方法体外培养肝癌细胞株HepG2,分为对照组、实验组,对照组常规培养,实验组加入苯丁酸钠。分别以免疫细胞化学及Western-blotting检测HDAC4、VEG-FR-1蛋白的表达及蛋白表达变化;应用Transwell小室观察SPB对肝癌细胞株HepG2侵袭力的影响,应用MTT方法测定SPB对HepG2黏附作用的影响。结果体外培养人肝癌细胞株HepG2,免疫细胞化学试验及Western-blot-ting显示HepG2细胞株表达HDAC4和VEGFR-1;Western-blotting显示,实验组SPB抑制HDAC4、VEGFR-1的表达,并呈现时间及剂量依赖关系;应用Transwell小室观察经SPB作用后,实验组、对照组细胞的穿膜细胞数分别为161.80±46.80、329.20±55.99,抑制率达到50.85%,有统计学意义(P<0.01);MTT方法测定黏附作用显示SPB实验组细胞的黏附率较对照组明显下降(P<0.01)。结论 HDAC4、VEGFR-1在肝癌细胞株HepG2中表达,SPB对HDAC4、VEGFR-1的表达有抑制作用;并对HepG2细胞株有抑制其侵袭及黏附的作用。     

熊去氧胆酸对大鼠肝癌发生的抑制作用及机制

目的 研究熊去氧胆酸(UDCA)对大鼠肝癌发生的抑制作用并探讨其机制.方法 利用二乙基亚硝胺(DEN)诱导大鼠肝癌模型,75只雄性Wistar大鼠随机分为5组:正常对照组、UDCA对照组、DEN组、UDCA高和低剂量组.DEN组及UDCA高低剂量组均给予DEN腹腔注射(20 mg/kg),正常对照组及UDCA对照组给予等剂量的生理盐水腹腔注射.同时UDCA对照组及UDCA高低剂量组分别按30、30、15 mg/kg给予UDCA灌胃,正常对照组及DEN组给予等量生理盐水灌胃.观察大鼠肝质量、体质量及肝脏系数的变化;并检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及甲胎蛋白(AFP)的含量;采用实时定量RT-PCR检测不同组间DNA损伤修复基因hMTH1在大鼠肝脏中的表达.结果 与正常对照组相比,DEN组大鼠的体质量明显降低,肝质量和肝脏系数明显增加,ALT、AST及AFP的含量均明显升高(P＜0.05);与DEN组相比,UDCA高低剂量组各项指标明显好转.实时定量RT-PCR显示,hMTH1在DEN组大鼠肝脏中的表达较正常对照组明显升高(P＜0.05);UDCA高低剂量组大鼠肝脏中hMTH1的表达较DEN组明显降低(P＜0.05);且hMTH1在UDCA高剂量组中的表达也较UDCA低剂量组明显降低(P＜0.05).UDCA对照组与正常对照组相比,各项指标无统计学差异.结论 UDCA对大鼠肝癌发生有抑制作用,并能够抑制DNA损伤修复基因hMTH1的表达,其效果和剂量呈正相关,提示UDCA对肝癌的抑制作用可能与抑制氧化应激有关.     

组蛋白去乙酰化酶4在人肝癌细胞Bel7402中的表达及其意义

目的：研究组蛋白去乙酰化酶4（histone deacetyase4，HDAC4）在人肝癌细胞株Bel-7402中的表达，及其对Bel-7402细胞增殖和分化的调控作用。方法：培养Bel-7402细胞，以组蛋白去乙酰化酶抑制剂苯丁酸钠（sodium phenylbutyrate，SPB）作用于Bel-7402，RT—PCR检测用药前后HDAC4 mRNA的表达水平，倒置相差显微镜观察细胞形态改变，MTT比色法观察SPB对Bel-7402生长的抑制作用，流式细胞术分析细胞周期，免疫组化法观察Bel-7402细胞P27蛋白的表达水平。结果：SPB处理后Bel-7402中HDAC4mRNA的表达水平降低（0．88±0．13，0．12±0．04，P〈0．05）；SPB处理后Bel-7402细胞生长受到明显抑制，且与SPB剂量和作用时间相关；同时细胞形态出现成纤维细胞样改变；细胞周期阻滞于G。期[（50．6±4．0）％，（78．8±3．6）％，P〈0．05）]；P27蛋白表达水平增强（23±11，61±7，P〈0．05）。结论：SPB降低HDAC4在人肝癌细胞中的表达，从而诱导部分人肝癌细胞分化，该作用与P27蛋白水平变化有关。     

2β(3羟丙氧基)骨化三醇对人肝癌细胞周期阻滞及P~(27kip1)蛋白的诱导表达

目的探讨2β(3羟丙氧基)骨化三醇(ED-71)诱导人肝癌细胞HepG2生长抑制和细胞周期G1阻滞,及对抑癌基因P27kip1表达的影响。方法培养HepG2,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察ED-71对HepG2的生长抑制作用,流式细胞术分析细胞周期,以Western-blot检测HepG2细胞中P27kip1蛋白的表达水平。结果ED-71处理后HepG2的生长缓慢,细胞生长受到明显抑制。细胞阻滞于G1期(80.6±2.6,48.7±3.0,P<0.05),P27kip1蛋白表达水平增强(0.11±0.06,0.67±0.08,P<0.05)。结论ED-71抑制人肝癌细胞株HepG2的生长,诱导人肝癌细胞分化,使细胞阻滞于G1期,可能与ED-71诱导人肝癌细胞中抑癌基因P27kip1蛋白的表达有关。     

脂多糖诱导血管平滑肌细胞分泌白细胞介素-6及p38丝裂素活化蛋白激酶的调控作用

目的 探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在脂多糖(LPS)作用下血管平滑肌细胞(VSMC)分泌白细胞介素-6(IL-6)中的调节作用.方法 将体外培养的大鼠胸主动脉VSMC分为LPS刺激组、p38MAPK抑制剂SB203580干预组、SB203580对照组和溶液对照组.LPS组以终浓度100μg/L的LPS与VSMC共同孵育;干预组VSMC以p38MAPK抑制剂SB203580 10μmol/L预处理2 h,再加入终浓度100 9g/L的LPS共同孵育;对照组仅以SB203580 10 μmol/L预处理2 h;溶液组仅加入去血清培养液培养.各组于培养0、3、6、12、24 h后采用实时聚合酶链反应(real-time PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测细胞IL-6 mRNA和上清液中IL-6蛋白表达.结果 LPS刺激3 h,VSMC中IL-6 mRNA和蛋白表达即出现明显增高CmRNA(21.3±3.2)×104,蛋白(296.2±19.6)ng/L],12 h达高峰CmRNA(131.4±11.2)×104,蛋白(897.7±34.0)ng/L],24 h有所降低[mRNA(15.3±4.7)×104,蛋白(194.3±24.0)ng/L],但仍显著高于溶液组(mRNA(9.4±1.9)×104,蛋白(29.4±4.4)ng/L,均P<0.05].干预组3、6、12 h可明显抑制LPS诱导VSMC中IL-6的分泌[mRNA(15.4±3.6)×104、(43.2±6.6)X 104、(56.2±5.5)×104,蛋白(180.3±23.6)、(432.2±56.8)、(546.2±57.9)ng/L,均P<0.05].结论 LPS诱导VSMC可明显增加IL-6的mRNA和蛋白表达,p38MAPK抑制剂SB203580可显著抑制IL-6转录和蛋白合成,表明p38MAPK信号转导通路可能通过直接或间接作用参与了IL-6的分泌调节作用.