转染试剂及幽门螺杆菌对AGS细胞形态的影响

目的:探讨不同的转染试剂对AGS细胞形态的影响,观察这些转染试剂能否像幽门螺杆菌那样引起AGS细胞蜂鸟状改变．方法:用多聚阳离子转染试剂(多聚乙酰亚胺、梭华-Sofast)和改良的脂类转染试剂 (Effectene Transfection Reagent)分别转染AGS 细胞,观察细胞形态的变化．用幽门螺杆菌 26695菌株攻击AGS细胞,观察细胞形态的变化并与经转染试剂作用的细胞进行形态比较．结果:幽门螺杆菌攻击后4 h能引起AGS细胞发生蜂鸟状改变．两种多聚阳离子转染试剂也均能引起AGS细胞发生蜂鸟状改变,与幽门螺杆菌引起的细胞形态改变相似,大部分细胞拉长,并且不受是否转染DNA的影响．此种变化在转染4 h时便出现,与试剂剂量的增加呈正相关．当PEI的剂量为10 μL时,细胞出现凋亡,15μL时凋亡加重．改良的脂类转染试剂对 AGS细胞的形态未产生影响．结论:在研究引起AGS细胞形态改变的因素时,不宜选择多聚阳离子转染试剂;多聚阳离子引起的AGS细胞形态改变与幽门螺杆菌引起的AGS细胞形态改变之间是否存在关系值得进一步研究．     

护士离职倾向及影响因素调查分析

目的 了解护士的离职倾向现状,探讨可能对离职倾向有影响的因素,为护理管理者制定激励措施和管理方案提供科学依据.方法 采取方便抽样方法抽取哈尔滨市4所医院407名护士,采用一般资料调查表、自行设计的离职倾向量表来进行调查.应用统计学方法进行分析.结果 离职倾向总分为（32.51±12.75）分,平均分为（2.51±0.98）分.不同婚姻、月均夜班数、技术职称的护士离职倾向的差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）.结论 护士没有表现出强烈的离职倾向,鼓励护士对高层次需要的追求和满足高层次需要是降低护士离职倾向的正性激励措施.本研究结果提示护理管理者应重视提高临床护士的工作满意度,从而避免离职倾向的产生.     

我国脑膜炎奈瑟菌孔蛋白PorA、PorB的多态性分析

目的以蛋白质组学研究为基础,分析2003—2005年我国流脑暴发流行期间C群脑膜炎奈瑟菌菌株特征,建立以致病性相关蛋白多态性为目标的新分型方法。方法利用双向电泳和MALDI-TOF质谱鉴定分析2003—2005年流脑流行期内分离的66株C群脑膜炎奈瑟菌菌株及2株参考菌株的蛋白表达,重点分析与致病性相关的蛋白多态性特征。结果根据孔蛋白PorA、PorB在双向电泳中的多态性,建立了12个特征菌型。安徽菌株的PorA和PorB蛋白电泳谱型显示出了高度的一致性,而其他地区的菌株则显示出高度的多态性。结论PorA和PorB蛋白2-DE电泳谱型可以作为一种新的菌株分型方法,可能在菌型变迁检测和流脑暴发预警中具有重要应用前景。     

急性心肌梗塞的远期预后——附85例随访分析

<正> 关于急性心肌梗塞的远期预后,国内外虽均有报道,但为数远不如近期资料多.本文就我院随访结果,复习有关资料,并对影响急性心肌梗塞远期预后的因素试作分析. 本组随访对象是我院1979年6月30日以前住院的急性心肌梗塞生存出院者.由于种种原因我们仅随访到已知数151例中的85例,随访率为56.3%.其中除6例为1969年底以前的患者外,余均系近十年的病例.     

细菌Ⅵ型分泌系统的研究进展

细菌的分泌系统(secretion system)像注射器一样将细菌合成的毒性蛋白转运到外界环境或是宿主细胞内,与细菌的致病性密切相关.目前已经发现了6种细菌分泌系统,按其分泌是否利用Sec转位酶可分为两大类:一类是利用Sec转位酶(translocase)和N末端信号序列进行蛋白转运的,包括Ⅱ型(T2SS)和Ⅴ型分泌系统(T5 SS);另一类则不依赖Sec转位酶,如Ⅰ型(T1SS)、Ⅲ型(T3SS)、Ⅳ型(T4SS)和Ⅵ型分泌系统(T6SS)[1].     

吉兰-巴雷综合征相关空肠弯曲菌的蛋白质谱特征分析

目的 分析吉兰-巴雷综合征(GBS)相关空肠弯曲菌(Cj)与非GBS相关Cj的蛋白质谱特征。方法 利用双向电泳对这两类Cj各8株菌的全菌蛋白进行分离,比较蛋白质谱之间的差异,并对差异蛋白进行基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF)分析。结果 比较发现20个差异蛋白,质谱分析鉴定出17个蛋白质,包括wlaX蛋白,参与能量代谢的苹果酸脱氢酶、磷酸丙糖异构酶、镍-铁还原酶小亚单位、半胱氨酸合成酶及支链氨基酸氨基转移酶,参与细胞加工处理过程的热休克蛋白、铁吸收ABC转运系统周质铁结合蛋白、烷基过氧化氢还原酶以及与细胞表面结构有关的鞭毛蛋白、UDP-N-乙酰烯醇式丙酮酸葡萄糖胺还原酶等。结论 wlaX蛋白可能与致GBS相关脂多糖的独特结构合成或细菌的毒力有关,wlaX蛋白及鞭毛蛋白有可能为GBS相关Cj的特征蛋白。     

pTn5GFP转座质粒用于耐药鲍曼不动杆菌生物被膜相关基因的研究

【立论依据】 鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,AB)是一种革兰氏阴性球杆菌,是引起院内感染的主要菌种之一,多重耐药和泛耐药AB菌株感染更是给临床治疗带来极大的困难。生物被膜形成能力与AB耐药以及致病性密切相关。寻找AB生物被膜形成的关键基因对于AB相关疾病的预防和控制具有重要意义。转座子是一段特殊的DNA片段,在转座酶的作用下,可随机插入细菌基因组,使插入基因失活,改变相关表型。应用转座子随机突变策略可以找出特定表型对应的基因,但是以传统的抗生素抗性基因作为报告基因显然不能满足对多重耐药菌株的研究。 【设计思路】 绿色荧光蛋白(GFP)因为不需要单独加入底物并且易于观察而被广泛用来标记生物分子或细胞。已有研究表明,GFP基因插入细菌的染色体上后,可以有效地对细菌进行标记。基于转座质粒以及GFP的特点,本研究拟构建具有Tn5转座子和GFP基因的pTn5GFP转座质粒,利用GFP作为报告基因,构建临床分离的多重耐药AB突变文库,进而筛选出AB生物被膜形成的关键基因,并对其功能进行研究。 【实验内容】 以pGFPmut3.1质粒为模板,扩增GFP基因,将其连接入含有Tn5转座子的pRL27质粒,构建pTn5GFP转座质粒。利用该质粒对多重耐药AB菌株进行转座子突变,构造突变文库。对突变株的生物被膜情况进行分析,确定转座子插入位点,找出生物被膜形成的关键基因,并对其功能进行研究。 【材料】 临床多重耐药AB两株,R005和R036,自北京大学人民医院获得。常用工具菌E.coli CC118λπ和E.coli DH5α。pRL27和pGFPmut3.1质粒由原实验室毕业研究生提供。 【可行性】 已成功构建了pTn5GFP转座质粒,该质粒在容纳菌株E.coli CC118λπ具有绿色荧光表型,并已通过预实验初步确定了两株多重耐药AB生物被膜形成能力和最适实验条件。 【创新性】 本研究将GFP报告基因的便捷性以及转座质粒的转座性结合起来,有效解决了因耐药性而无法对泛耐药菌株构建突变文库的问题,结果直观,易于筛选,可行性高。     

2004～2009年大安市碘盐监测结果分析

碘是人体必需的微量元素之一，人体每天碘的生理需要量约为150（g，碘摄入量过低或过高都会导致甲状腺疾病的发生，同时在不同的生理阶段缺碘还可引起包括甲状腺肿大、克汀病、亚克汀病等在内碘缺乏病。目前经济安全有效的补碘方式是食用加碘食盐，按照国家标准GB5461—2000生产的食盐中碘含量达（35±15）mg／kg。但碘盐往往受生产、运输、销售、储存和使用过程中诸多因素的影响，造成碘含量下降。此外，不良的贮存方法、烹饪方式和食物种类等因素对食盐中碘的稳定性也有一定的影响。     

电极法和离子色谱法测定饮用水中氟化物的信度比较

氟化物广泛存在于自然界中。当摄入量处于生理范围内时，对骨骼和牙齿发育以及防龋齿有良好作用；长期摄入，氟在体内蓄积可致中毒：水中含氟1．6mg／L时，90％以上人发生氟斑牙；当水氟超过3．0mg／L时，人群中开始出现氟骨症；如氟的摄入量超过6mg开始出现毒作用，为1025mg时连续摄入720年可发生致残性氟骨症。     

空肠弯曲菌的双向电泳系统可重复性评价

目的:对空肠弯曲菌(Cj)的双向电泳(2DE)系统可重复性和稳定性进行评价,为空肠弯曲菌的蛋白质组学研究奠定基础。方法:选取一株空肠弯曲菌,培养48小时后制备全菌蛋白,进行双向电泳。比较不同上样量和不同批次对实验结果的影响。结果:不同批次和不同上样量的胶进行比较,蛋白质的匹配率均可达到90.89%;未匹配蛋白主要是一些低丰度蛋白;增加上样量可增加低丰度蛋白的检出,但可产生蛋白质的共迁移,因此选择合适的上样量很重要;不同批次蛋白质点在等电点方向的位置偏移为0.62±0.37mm,在SDS-PAGE方向的位置偏差为0.72±0.51mm,相对含量的相关系数为0.973。结论:表明空肠弯曲菌2DE的系统具有很好的稳定性及很高的可重复性,符合蛋白质组学的要求,实验结果具有可比性。