生姜细胞外囊泡样纳米粒载吴茱萸碱的处方工艺及体外释药研究

  目的  采用生姜细胞外囊泡样纳米粒(EVNs)来源脂质制备载吴茱萸碱(EVO)的脂质体, 以改善其成药性。  方法  采用差速离心法分离生姜EVNs, 筛选EVNs脂质的提取溶剂。薄膜分散法制备载EVO脂质体(EVO@Lipo), 以包封率为指标, 正交试验优化处方和制备工艺。采用粒度电位分析、差示量热扫描(DSC)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)对EVO@Lipo进行表征, 并考察EVO@Lipo的体外释药行为。  结果  筛选出三氯甲烷、甲醇-三氯甲烷、乙醇-二氯甲烷作为脂质的提取溶剂, 正交试验优化确定载药脂质体的最优制备条件为采用甲醇-三氯甲烷(2∶1)提取脂质, 药脂比为1∶50, 超声条件60 W、15 min。制得的EVO@Lipo包封率为88.21%, 平均粒径194.9 nm, PDI为0.22, Zeta电位为-35.3 mV, 并证明EVO@Lipo并非药物和脂质的物理混合物。体外释放实验显示, EVO@Lipo能延缓药物的释放。  结论  EVNs来源脂质可装载疏水性药物EVO, 提高其溶解性, 并具有一定的缓释作用。      

大鼠永久性脑缺血后脑内Nestin的表达变化

目的 研究永久性脑缺血大鼠脑内巢蛋白（neuro epithelial stem cell prote,Nestin）的表达变化,探讨脑缺血后神经干细胞的增生、迁移和分化规律。方法 采用微创开颅法复制大鼠大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型,分为正常对照组、假手术组和脑缺血组;假手术组和脑缺血组又分为术后1d、2d、3d、1周、2周、3周和4周共7个亚组,抗Nestin抗体和抗Nestin/胶纸原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）抗体分别进行免疫组化单标和免疫荧光双标染色。结果 正常对照组和假手术组仅在部分血管内皮、侧脑室室管膜下区（subventricular zone,SVZ）及第三脑室周围见极少量的Nestin阳性表达,阳性细胞呈椭圆形或不规则形,体积小,突起短少。脑缺血后Nestin阳性细胞明显增多,体积变大,呈多突起的星形,且大部分阳性细胞与星形胶质细胞的标志物GFAP共表达;增生的阳性细胞从缺血侧SVZ梯度式迁往梗死灶边缘,于缺血后3d达到增生高峰,之后增生能力逐渐下降,缺血后2周,缺血侧SVZ的Nestin阳性细胞数及吸光度值已回落到正常水平;缺血4周后,梗死灶周围的阳性细胞也基本消失。结论 大鼠永久性脑缺血后激活了SVZ的Nestin阳性细胞一过性增生、迁往梗死灶周围并分化为星形胶质细胞,可能对缺血损伤后的脑组织起到修复作用。     

乙醇气味刺激食蟹猴的脑fMRI

目的 应用3.0T fMRI探讨食蟹猴经乙醇气味刺激引起的脑功能活动。方法 选取健康食蟹猴6只,麻醉后行乙醇气味刺激下的fMRI。采取"静息-刺激-静息"组块设计。刺激组块予乙醇气味刺激,静息组块无气味刺激。BOLD-fMRI扫描128 phase,整个猴脑扫描16层。采用SPM2软件随机效应模式t检验进行组分析。将统计结果覆盖于食蟹猴模板图像上。结果 乙醇气味刺激下,在额叶、颞叶、中央旁小叶、扣带回、豆状核、中央前回分别可以检测到正激活和负激活。结论 海马回钩和眶额回为嗅觉最高级中枢。fMRI可以显示额叶、颞叶的激活。气味刺激引起的中枢反应与中央旁小叶、扣带回、豆状核有密切关系。     

DCE-MRI减影技术及DWI序列在原发性肝癌局部介入术后评估的应用研究

目的探讨磁共振动态增强减影技术及DWI序列在原发性肝癌经局部介入治疗术后疗效评估中的应用价值。方法收集56例经临床或病理证实为原发性肝癌的患者,同时满足1)接受过射频消融、微波消融、动脉内碘油栓塞等局部介入治疗术后≥6个月;2)治疗后病灶MRI表现为平扫T1高信号,且病灶直径≥1cm。共纳入符合标准的74个病灶,根据mRECIST标准,将所有病灶分为完全坏死组(42个病灶)和复发残留组(32个病灶)。由两位腹部影像诊断医师对MRI常规动态增强、动态增强减影及DWI(联合ADC)图像分别进行肉眼分析并对疗效判断的信心度进行评分,采用方差分析比较三种技术医师信心度水平差异;分别计算病灶在MRI常规动态增强与增强减影后动脉期、静脉期图像上的对比信噪比(CNR),采用t检验比较减影前后差异;测量所有病灶ADC值并对比完全坏死组与复发残留组之间差异。P<0.05为差异有统计学意义。结果完全坏死组1)诊断医师对常规动态增强、动态增强减影、DWI(联合ADC)三种技术肉眼判断肿瘤完全性坏死的信心度评分无显著差异;2)MRI动态增强动脉期减影前、后病灶CNR值无显著差异;静脉期减影后病灶CNR值明显大于减影前。复发残留组1)三种技术判断病灶内仍有活性肿瘤组织残留或复发的医师信心度评分由高到低为动态增强减影>常规动态增强>DWI(联合ADC);2)MRI动态增强动脉期、静脉期减影后病灶CNR值均显著大于减影前。复发残留组病灶平均ADC值明显低于完全性坏死组。结论与常规动态增强相比,减影技术结合DWI及ADC图像的定量分析,可以更加准确评估原发性肝癌局部治疗疗效。     

大型团体心理干预模式对乳腺癌患者应对方式的影响

目的：探讨大型团体心理干预模式对乳腺癌患者应对方式的影响。方法对参加大型团体心理干预“汝康沙龙”的乳腺癌患者420例,分别于干预前后采用简易应对方式问卷进行调查。结果与干预前比较,乳腺癌患者应对方式得分明显提高(P<0.01)。结论大型团体心理干预对乳腺癌患者的应对方式具有积极作用,干预后患者能更多运用积极应对方式,减少消极应对方式。     

基于静息态fMRI技术观察经颅直流电刺激对脑梗死后图命名障碍患者语言相关脑区功能连接的影响

目的 采用静息态功能磁共振成像(rs-fMRI)技术观察经颅直流电刺激（tDCS）对不同病程脑梗死后图命名障碍患者语言相关脑区功能连接(FC)的影响，从影像学角度探讨图命名功能的损伤及恢复机制。 方法 选取28例脑梗死后图命名障碍患者纳入患者组，根据其病程又进一步分为急性期组（共16例）和恢复期组（共12例），同时选取18例中老年志愿者纳入正常对照组。采用tDCS阳极刺激患者左侧外侧裂后部周围区（PPR），每周治疗5 d，治疗2周为1个疗程。于治疗前、治疗1个疗程后行rs-fMRI检查及汉语失语症心理语言评价（PACA)图命名量表评分，观察患者语言相关脑区的FC变化。 结果 治疗后急性期组及恢复期组患者PACA图命名评分均较治疗前明显改善（P<0.05）。与正常受试者比较，患者组双侧大脑半球均存在多个脑区与Wernicke区的FC减低，且以优势半球的改变更显著。经tDCS治疗后，发现急性期组及恢复期组患者双侧额颞叶与Wernicke区的FC均显著增强。进一步比较还发现，治疗后急性期组双侧颞枕叶FC均较治疗前明显增强；而恢复期组治疗前FC增强的左侧颞叶在治疗后FC则明显减低。 结论 fMRI技术可对脑梗死后图命名障碍患者语言相关脑区的FC变化进行精准、无创评估；tDCS可能通过增强双侧脑半球语言相关脑区（集中于额颞叶部位）与Wernicke区的FC以改善脑梗死患者的图命名功能。     

思维导图法在病原生物学教学中的尝试与体会

摘要：病原生物学知识点多,内容复杂,不易记忆,且课时有限。本研究试图以教师绘制的思维导图作为学生预习的提纲、课堂笔记的蓝本及课后的复习资料,以提高课堂教学效率,提升学生自主学习及创新能力。     

穴位埋线治疗胃热湿阻型单纯性肥胖:随机对照研究

目的:观察穴位埋线治疗胃热湿阻型单纯性肥胖的疗效与安全性。方法:将144例胃热湿阻型单纯性肥胖患者随机分为穴位埋线组(72例,脱落3例,剔除1例)和假埋线组(72例,脱落6例,剔除3例)。两组在生活方式干预的前提下,穴位埋线组于天枢、中脘、肝俞、水道等穴采用PGLA线进行埋线;假埋线组,取穴及操作同穴位埋线组,但不埋入线体。两组均2周1次,连续治疗12周,并于治疗后3个月随访。治疗前后和随访时,观察两组患者肥胖程度指标[体质量指数(BMI)、腰围(WC)、腰臀比(WHR)和脂肪百分率(F%)];治疗前后,观察两组患者血糖和胰岛素指标[空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]、脂肪细胞因子指标[脂联素、瘦素(LP)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)]、炎性因子指标[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)],并比较两组疗效及安全性。结果:治疗后和随访时,除假埋线组WC、WHR外,两组BMI、WC、WHR和F%均较治疗前降低(P<0.01,P<0.05),且穴位埋线组均低于假埋线组(P<0.01)。治疗后,除假埋线组FBG、LP和Vaspin外,两组FBG、FINS、HOMA-IR、LP和Vaspin均较治疗前降低(P<0.01,P<0.05),脂联素较治疗前升高(P<0.01,P<0.05),且穴位埋线组以上指标均优于假埋线组(P<0.01)。治疗后,穴位埋线组血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平较治疗前及假埋线组降低(P<0.01)。穴位埋线组总有效率为89.7%(61/68),高于假埋线组的19.0%(12/63,P<0.01)。两组均无严重不良反应发生。结论:PGLA线穴位埋线治疗胃热湿阻型单纯性肥胖可减轻患者肥胖程度,调节糖代谢和脂肪细胞因子,改善胰岛素抵抗,抑制促炎性因子表达,具有较好的安全性。     

依达拉奉干预永久性脑缺血大鼠神经干细胞增殖及分化

目的 探讨依达拉奉对永久性脑缺血大鼠脑内内源性神经干细胞的影响。 方法 采用电凝法建立大鼠永久性脑缺血模型。将30只SD大鼠随机分为假手术组、脑损伤组与依达拉奉组,每组10只,模型制作成功后6 h,1.5 g/L依达拉奉组腹腔注射依达拉奉（10 ml/kg）,每天1次,假手术组与脑缺血组腹腔注射等体积的生理盐水,连续注射7 d。末次给药后24 h,免疫荧光染色观察损伤侧脑室下区与缺血周围脑皮质区BrdU标记阳性细胞、Nestin/BrdU标记阳性细胞、神经元Ⅲ型β-微管蛋白（Tuj1）/BrdU标记阳性细胞与胶质纤维酸性蛋白（GFAP）/BrdU标记阳性细胞,Western blotting 检测缺血周围脑皮质区Tuj1与GFAP蛋白表达。 结果 与脑缺血组比较,依达拉奉组损伤侧脑室下区与缺血周围脑皮质区的BrdU标记阳性细胞、Nestin/BrdU标记阳性细胞、Tuj1/BrdU标记阳性细胞与GFAP/BrdU标记阳性细胞明显增加(P<0.05)。与脑缺血组比较,依达拉奉组缺血周围脑皮质区的Tuj1与GFAP蛋白表达量增加(P<0.05)。 结论 依达拉奉可促进缺血损伤侧脑室下区与缺血周围脑皮质内源性神经干细胞与星形胶质细胞的增殖,促进内源性神经干细胞分化为神经元。