广东省登革病毒的分子流行病学研究

目的 通过对广东省90年代以来流行的登革病毒分子流行病学研究,初步了解我国毒株的可能来源,方法 采用RT－PCR方法扩增广东省不同年份分离的登革病毒（DEN）1型和2型NS1部分基因片段,然后进行克隆测序,测序后的基因片段与国际上已知的多个DEN1和DEN2相应的序列进行比较,并以核苷酸的差异在6％以上作为基因亚型分型的标准。结果 ①广州1991年分离的DEN1（GD03／91）与潮洲995年分离的DEN1（GD23／95）同源性很高,为97％,属同一基因亚型,而两者与从潮洲997年分离的DEN1（GD14／97）同源性均为93％,分属不同的基因亚型。基因系统树分析提示：GD03／91和GD23／95可能来自东南亚或瑙鲁等地,GD14／97可能来自新加坡。②佛山19934昕分离的DEN2（GD06／93）和南海市1998年分离的DEN2（GD01／98）同源性为93％,分属不同的基因亚型。基因系统树分析提示：GD01／98与泰国流行株ThNH-P28/93株共享序列非常接近,核苷酸同源性为98%,氨基酸同源性为100％,因此推测GD01／98可能来源于泰国。结论 广东省90年代以来流行的登革热来源于不同的传染源。     

登革4型病毒广东流行株NS2a-NS2b基因序列分析

目的分析登革4型病毒(DV4)广东株的基因序列，比较其同源性，追查DV4的地理来源。方法RT—PCR扩增DV4 NS2a—NS2b基因片段，克隆至PGEM T载体，分析其序列。结果1990年分离的4个毒株在所分析的区段具有相同的序列，与DV4H241、814669株、1978年广东株(GD785682)和1993年广东株(GZB5)的核苷酸(氨基酸)同源性分别是97％(98％)、94％(96％)、93％(98％)和99％(98％)。GD785682株与DV4H241、814669株和1993年广东株(GZB5)的核苷酸(氨基酸)同源性分别是93％(98％)、96％(97％)和98％(93％)。结论1990年引起广东省登革热流行的毒株很可能只有1个，1990年的毒株与1978年的毒株可能来自不同的疫源地。     

广东流行的三株登革1型病毒包膜蛋白基因的序列测定与分析

目的通过对广东省不同地区、不同流行期间分离的三株登革1型病毒(DVI)的结构蛋白E基因进行序列测定及分析．了解各流行株之间的遗传差异，追踪其可能的传染来源：方法应用RT-PCR技术扩增病毒的结构蛋白E基因，克隆到PMD18-T载体．转化JM109宿主菌，挑取阳性克隆进行鉴定及序列测定，应用计算机软件与国内外参考及流行株进行同源性分析．并绘制基因系统发生树：结果3株DVI病毒E基因序列长度均为l485bp，编码495个氨基酸，核苷酸序列同源性在91％～98％之间、推测的氨基酸序列同源性在94％～99％之间：GD23／95与A88核苷酸(氨基酸)同源性为95％(98％)，与其他株的同源性相对较低，2株属同一基因型；GD14／97和GD05／99与Cambodia共享序列非常接近．3株同属另一基因型。结论广东省1997、1999和1995年流行的登革热可能来自境外不同的疫源地。     

我国南方人鼠虫媒病毒血清流行病学调查

目的 调查我国南方地区虫媒病毒的感染分布情况。方法 应用间接免疫荧光技术,对我国南方11个地区3077份人血清标本和401份鼠血清标本进行了14种虫媒病毒血清流行病学调查。结果 人血清中甲病毒（SIN,CHIK,SF,MAY,RR,SAG和GET）抗体的阳性率分别是0．64％,1．13％,0．64％,0．04％,0．94％,0．11％和0．18％;黄病毒（JE和DEN1－4）抗体的阳性率分别是2．70％和8．60％;布尼安病毒抗体（XHF和SSH）,在海南人群中的阳性率分别是2．66％和5．33％。在海南三亚、琼中和琼海3个地区的鼠中,甲病毒（SIN,CHIK,RR和SF）抗体的阳性率分别是1．80％,6．31％,4．50％和6．31％;黄病毒（JE和DEN1－4）抗体的阳性率分别是3．69％和8．11％;布尼安病毒（XHF和SSH）抗体的阳性率分别是3．10％和3．79％;结论 在我国南方一些地区生活的人群和鼠类不同程度的感染了甲病毒、黄病毒和布尼安病毒。     

海南岛两株甲病毒基因组3′末端核苷酸序列的克隆与分析

目的　从分子水平鉴定海南省分离的两株甲病毒 (HBb17和M1病毒 )。方法　采用RT-PCR方法 ,分别扩增两株病毒基因组的 3′末端核苷酸序列 ,扩增产物经亚克隆 ,筛选重组子并测定核苷酸序列对序列进行分析。结果　HBb17和M1病毒分别扩增出约 1 6kb和 1 3kb的特异片段。序列分析表明 ,在 3′末端非翻译区HBb17病毒与罗斯河病毒 (国际标准株T48病毒 )核苷酸同源性为99 % ,M1病毒与鹭山病毒 (SAG)同源性为 98% ;两病毒结构基因的E1区序列 ,HBb17病毒与罗斯河病毒核苷酸 (氨基酸 )同源性为 99% (99% ) ,M1病毒与鹭山病毒核苷酸 (氨基酸 )同源性为 97% (99% ) ,M1病毒与盖塔病毒同源性为 94% (98% )。结论　序列分析表明 ,海南岛分离的HBb17病毒属于罗斯河病毒 ,M1病毒可能是鹭山病毒或盖塔病毒的变异株     

从海南省人血清中检出甲属虫媒病毒HYM1抗体

１９９５ 年, 从海南省立才蚊虫标本中分离到１ 株病毒, 编号为 Ｈ Ｙ Ｍ１ 。经理化、生物学性状及血清学鉴定表明 Ｈ Ｙ Ｍ１ 与 Ｍ Ａ Ｙ 病毒抗原性相近。应用间接免疫荧光法对海南省部分地区人血清标本共４２６ 份, 进行了抗体检测。其中当地人血清标本２２６ 份, 阳性１７ 份, 阳性率为７０８ ％ 。驻海南省部队人血清标本２００ 份, 阳性１ 份, 阳性率为０５ ％ 。     

3株登革病毒1型广东分离株NS 1基因序列测定

登革热 (Ｄｅｎｇｕｅｆｅｖｅｒ ,ＤＦ)是一种急性虫媒传染病 ,严重者表现为严重的登革出血热或登革休克综合征 ,后者死亡率可达 5 %。广东省自 1978年以来 ,先后有 10多次登革热暴发流行。目前认为 ,我国登革热为传入性 ,但登革热的病原登革病毒 (ＤＶ)流行株的来源还不明确。我们通过测定我国广东省ＤＦ病人血清中分离的 3株ＤＶ - 1的ＮＳ 1基因序列 ,比较其核苷酸及其编码氨基酸的差异 ,探讨 1999、1997和 1995年在广东流行的登革热的可能来源。1　材料和方法　 (1)材料 :试剂为ｐＵＣｍＴ载体、3ＳＧｅｌＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎＫｉ…     

海南省1998年虫媒病毒血清流行病学调查

应用间接免疫荧光法对海南省驻地部队和三个地区人群共６０７份人血清检测１２种虫媒病毒抗体。驻地部队（３８５份）和当地人群（２２２份）,黄病毒抗体阳性率分别为５．７％和１０．４％,甲病毒抗体阳性率分别为０．５２％和４．９％。由此可见,海南省驻地部队及当地人群存在虫媒病毒感染。在该岛的人群中,不同地区的甲病毒抗体阳性率分布不同。从病毒种类来看,以罗斯河病毒抗体阳性率最高,其抗体效价终作者单位：５１０５０７广州军事医学研究所点达１∶８０,提示海南地区可能存在罗斯河病毒自然疫源地。驻地部队黄病毒和甲病毒抗…