TRAIL及其受体在多发性肌炎/皮肌炎患者外周血CD3~+T淋巴细胞中的表达

目的:通过检测多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)患者外周血CD3+T淋巴细胞表面肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体DR4、DR5的表达,探讨TRAIL及其受体在PM/DM患者T淋巴细胞凋亡中的作用。方法:采用流式细胞术对44例PM/DM患者和20例健康人的外周血CD3+T淋巴细胞表面TRAIL及其受体DR4、DR5的表达进行检测。用流式细胞术检测外周血单个核细胞的凋亡率。结果:PM/DM组的m TRAIL、DR4、DR5的阳性表达率均显著高于健康对照组(均P<0.05)。不同浓度TRAIL(0,5,10,50,100ng/ml)刺激淋巴细胞24h后,检测其凋亡率,PM/DM组淋巴细胞凋亡率(%)分别为25.63±8.79,33.04±12.31,42.42±10.72,80.74±14.52,69.9±16.99,均显著高于对照组的凋亡率(%):18.72±12.48,23.23±17.00,24.69±9.15,26.64±13.28,20.32±11.07。结论:TRAIL及其受体DR4、DR5在多发性肌炎/皮肌炎患者外周血CD3+T淋巴细胞表面的表达阳性率增高,提示TRAIL介导的细胞凋亡可能在多发性肌炎/皮肌炎的发病机制中发挥一定的作用。     

加强炎性肌病的规范化临床评估

迄今为止,如何判断特发性炎性肌病(主要指多发性肌炎和皮肌炎)临床疾病的活动度及病情的严重程度仍无理想的方法.当前,临床医师主要是依据患者主观症状以及血清肌酶谱水平的变化来评估肌病的活动性和药物疗效等,但这并不能准确反映疾病变化的全貌.     

多发性肌炎/皮肌炎患血清肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的测定及其临床意义

目的：检测多发性肌炎/皮肌炎（PM/DM）患者血清肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（sTRAIL）的水平及其在多发性肌炎/皮肌炎中的临床意义.方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测2012年10月～2013年8月中日友好医院风湿免疫科40例PM/DM患者,20例健康人血清中sTRAIL的水平.分析sTRAIL水平与PM/DM各临床特点的关系.结果：PM/DM患者组血清sTRAIL水平为1380.71±126.49ng/L,显著高于健康对照组493.89±33.32ng/L（P＜0.05）.吞咽困难的PM/DM患者血清sTRAIL水平（1775.76±321.95ng/L）显著高于无吞咽困难者（958.24±155.66ng/L,P＜0.05）.是否合并肺间质病变,其血清sTRAIL水平无显著性差异（P＞0.05）.Jo-1阳性的患者组血清sTRAIL水平为562.36±52.99ng/L,显著低于Jo-1阴性的患者组1334.57±181.21ng/L（P＜0.05）.PM/DM患者血清sTRAIL水平与乳酸脱氢酶（LDH）显著负相关（r=-4.03,P＜0.05）.结论：TRAIL在多发性肌炎/皮肌炎的发病机制中起作用,其异常表达与患者的临床特征密切相关.     

两种疾病活动评分在老年女性类风湿关节炎评估中作用的比较北大核心CSCD

目的评价基于C反应蛋白（CRP）和红细胞沉降率（ESR）的两种28个关节疾病活动评分（diseaseactivityscore,DAS28）评估老年女性类风湿关节炎（RA）患者疾病活动度的差异。方法采用回顾性研究方法入选158例老年女性RA住院治疗的患者,记录患者的年龄、病史、身高、体重、疼痛关节数、肿胀关节数、视觉模拟评分（VAS）以及实验室检查相关指标,分别计算DAS28-ESR和DAS28-CRP两种DAS28评分,比较两种评分在老年女性RA患者中的分布差异,并采用相同标准评价两种活动度评分对于疾病分层的差异,比较两种评分为疾病中度活动的患者相关临床指标的差异。结果DAS28-ESR与DAS28-CRP评分的线性相关关系有统计学意义,回归方程表述为Y=1．052X4-1．000（t=38．01,P〈0．01）;158例RA患者DAS28-CRP评分均值（4．44±1．49）分,低于DAS28-ESR评分（5．69±1．65）分（t=29．79,P〈0．01）。DAS28-CRP评分为疾病中度活动的人群评分为（4．08±0．57）分,低于DAS28-ESR评分为疾病中度活动的人群评分（4．30±0．52）分;类风湿因子（RF）水平DAS28-CRP评分为疾病中度活动的人群低于DAS28-ESR评分人群,而CRP、疼痛关节数和肿胀关节数DAS28-CRP评分为疾病中度活动的人群高于DAS28-ESR评分为疾病中度活动的人群,差异均有统计学意义（均P〈0．05）,DAS28-ESR评分会高估老年女性RA患者的疾病状况。结论在使用相同分层标准的情况下,DAS28-ESR与DAS28-CRP两种评分方法对患者疾病程度的判断存在差异,而这种差异可能造成临床诊断和治疗上的不同。     

pEGFP-HSP70重组质粒的构建及其在大鼠神经干细胞中的表达*

 目的：构建重组pEGFP-HSP70质粒并观察其在神经干细胞中的表达。方法：采用RT-PCR方法从SD胎鼠肝组织中获取总RNA,扩增出热休克蛋白70（HSP70）基因的全序列cDNA,并克隆到含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的真核表达载体pEGFP-C2上, 经EcoRⅠ、BamHⅠ酶切及测序分析对重组质粒pEGFP-HSP70进行鉴定。采用Nucleofector转染技术将重组质粒pEGFP-HSP70转染至胎鼠神经干细胞中。结果：(1) 胎鼠HSP70 cDNA序列被正确地克隆到真核表达载体pEGFP-C2中, 成功构建重组大鼠pEGFP-HSP70质粒。荧光强度检测空质粒转染组（pEGFP-C2组）、pEGFP-HSP70组与对照组相比显著升高（P<0.01）;pEGFP-HSP70组内24 h的荧光强度与7 d（P<0.05）、14 d（P<0.05）和21 d（P<0.01）相比降低明显。(2) 转染后HSP70的表达在1 d（P<0.05）、7 d（P<0.01）和14 d（P<0.01）与对照组相比均明显升高。结论：神经干细胞可直接作为基因靶细胞, 能有效地表达重组质粒pEGFP-HSP70,且HSP70在神经干细胞中的表达与转染时间密切相关。     

多发性肌炎及皮肌炎患者血清单核细胞趋化蛋白-1的测定及临床意义

目的：检测多发性肌炎/皮肌炎(polymyosits/dermatomyosits, PM/DM)患者血清中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1）的水平,分析其在PM/DM中的临床意义。方法：采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)方法测定100例PM/DM患者、20例肺部感染患者以及42名健康对照者血清中MCP-1水平,分析PM/DM患者临床表现及预后与血清MCP-1水平的相关性。结果：血清MCP-1浓度在合并肺间质疾病(interstitial lung disease, ILD)的PM/DM组、未合并ILD的PM/DM组、肺部感染组和正常对照组的平均值分别是(1 869±1 590) ng/L、(1 349±1 303) ng/L、(493±255) ng/L和(256±144) ng/L。PM/DM患者血清MCP-1水平高于肺部感染组及正常对照组(P均<0.001）,合并ILD的PM/DM组血清MCP-1水平较未合并ILD的PM/DM组、肺部感染组和正常对照组均显著升高(P均<0.01)。血清MCP-1的升高与肺间质病变存在显著关联性(χ²=9.6, P<0.01)。MCP-1诊断PM/DM合并ILD的敏感性为60.7%、特异性为68.2%。MCP-1升高组中,发热、关节炎、一氧化碳弥散量(%DL_CO)下降的发生率以及血红细胞沉降率、C反应蛋白、血清铁蛋白水平均较MCP-1正常组明显升高(P均<0.05)。相关性分析显示,PM/DM患者血清MCP-1水平与血清铁蛋白呈显著正相关(r=0.488, P<0.001)。结论：MCP-1在PM/DM患者血清中表达增高,并与合并ILD密切相关,可用于鉴别肺部感染和肺间质病变,具有重要临床意义。     

抗黑色素瘤分化相关基因5抗体阳性皮肌炎诊疗中国专家共识(2023版)

抗黑素瘤分化相关基因5抗体阳性皮肌炎(MDA5-DM)是一类以特征性皮疹和快速进展性间质性肺疾病为突出表现的DM亚型, 对常规糖皮质激素及免疫抑制剂治疗反应差, 预后差。我国风湿病学、呼吸病学及皮肤病学专家, 结合国内外MDA5-DM的研究进展与我国MDA5-DM患者的特点, 制定本共识。本共识从流行病学、发病机制、临床特征、诊断和风险评估、防治策略等方面进行了详尽阐述, 以期提高临床诊治, 改善和提高MDA5-DM患者的预后。     

肌球蛋白结合蛋白C的表达和鉴定

目的：探讨优化原核表达方法以及用亲和层析的方法制备重组人快型肌球蛋白结合蛋白C （MYBPC2）.方法：根据MYBPC2的序列设计一对引物,在上下游引物的5’端分别加上BamHI和HindⅢ酶切位点.以健康人骨骼肌cDNA为模版,扩增第284位至第579位氨基酸残基对应的碱基序列,经双酶切后插入pMalc-5e载体中,测序鉴定重组质粒的序列,将构建好的重组质粒转化大肠杆菌中,IPTG诱导重组蛋白MYBPC2-MBP的表达,亲和层析纯化重组蛋白,蛋白电泳法鉴定蛋白的分子量及纯度,测定蛋白浓度并估算蛋白纯化后得率.用商品化的抗MYBPC2抗体证实所表达蛋白序列的正确性.以纯化的蛋白免疫动物获得动物免疫血清,用Western Blot的方法鉴定此蛋白的免疫原性.结果：人MYBPC2蛋白表达载体构建成功,每升大肠杆菌菌液可生产纯化后的重组MYBPC2蛋白约30mg,Western Blot显示重组蛋白与其抗体及抗血清特异结合.结论：本方法可以高效制备生产人MYBPC2蛋白片段,具备良好的抗原特异性和免疫原性.     

炎症体在皮肌炎与多发性肌炎肌肉组织中的表达

摘要目的：研究炎症体在皮肌炎（DM）和多发性肌炎（PM）受累肌肉中的表达情况,探讨其在发病机制中的意义。方法：采用免疫组织化学的方法检测新发病并未经治疗的成年DM／PM患者肌肉标本10例（DM4例,PM6例）及5例健康对照肌肉组织NALP1、NALP3、衔接蛋白ASC及半胱天冬酶-1（caspase-1）的表达情况。结果：4例DM患者肌肉组织中CD3叮细胞及CD20＋B细胞均表达ASC及caspase-1,其中2例表达NALP3。6例PM患者中仅1例肌肉组织中CD3＋T细胞及CD20＋B细胞表达NALP3、ASC及caspase-1。10例患者均不表达NALP1。5例正常对照肌肉组织均不表达NALP1、NALP3、ASC及caspase-1。DM组ASC及caspase-1的表达阳性率显著高于PM组及正常对照组（P〈0．01,P〈0．05）,NALP3的表达阳性率亦高于PM组及正常对照组,但均无统计学意义（均P〉0．05）。结论：固有免疫反应与调节在DM和PM中起不同的作用。炎症体可能参与DM的发病过程,部分由NALP3激活。而炎症体激活可能并不参与大部分PM的发病。     

帕金森病合并类风湿样关节畸形一例并文献复习

目的 分析帕金森病合并类风湿样关节畸形的临床特点、实验室检查、X线及病理特征,提高对帕金森病合并类风湿样关节畸形的认识.方法 报道1例帕金森病合并类风湿样关节畸形的临床表现、实验室及病理资料,并检索复习近50年国内外文献报道的病例特点.结果 帕金森病合并类风湿样关节畸形主要见于女性,男:女比例约为1:5.6,平均在帕金森病病程约7.6年出现关节畸形改变;关节症状主要表现为掌指关节屈曲、近端指间关节过伸、远端指间关节屈曲及双足拇趾外翻畸形;实验室检查示血常规、生化、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)均无异常,类风湿因子(RF)及抗核抗体(ANA)、抗可提取性核抗原(ENA)抗体谱、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、抗角蛋白抗体(AKA)、抗核周因子(APF)等抗体均阴性;X线无关节侵蚀改变;滑膜病理为非特异性炎症,无典型类风湿关节滑膜增生及血管翳形成;非甾体抗炎药及改善病情抗风湿药物治疗无效,但抗帕金森病治疗可使关节症状缓解.结论 帕金森病可合并类风湿样关节畸形,极易误诊为类风湿关节炎,通过实验室检查、放射学检查、滑膜病理分析可资鉴别.