TRAIL及其受体在多发性肌炎/皮肌炎患者外周血CD3~+T淋巴细胞中的表达

目的:通过检测多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)患者外周血CD3+T淋巴细胞表面肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体DR4、DR5的表达,探讨TRAIL及其受体在PM/DM患者T淋巴细胞凋亡中的作用。方法:采用流式细胞术对44例PM/DM患者和20例健康人的外周血CD3+T淋巴细胞表面TRAIL及其受体DR4、DR5的表达进行检测。用流式细胞术检测外周血单个核细胞的凋亡率。结果:PM/DM组的m TRAIL、DR4、DR5的阳性表达率均显著高于健康对照组(均P<0.05)。不同浓度TRAIL(0,5,10,50,100ng/ml)刺激淋巴细胞24h后,检测其凋亡率,PM/DM组淋巴细胞凋亡率(%)分别为25.63±8.79,33.04±12.31,42.42±10.72,80.74±14.52,69.9±16.99,均显著高于对照组的凋亡率(%):18.72±12.48,23.23±17.00,24.69±9.15,26.64±13.28,20.32±11.07。结论:TRAIL及其受体DR4、DR5在多发性肌炎/皮肌炎患者外周血CD3+T淋巴细胞表面的表达阳性率增高,提示TRAIL介导的细胞凋亡可能在多发性肌炎/皮肌炎的发病机制中发挥一定的作用。     

2型糖尿病大鼠经不同干预后血浆内脏脂肪素水平的变化

目的探讨2型糖尿病大鼠经不同干预后血浆内脏脂肪素水平的变化及其与空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）、胰岛素抵抗指数（HOMA）、总胆固醇（TO）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、游离脂肪酸（FFA）及体重的关系。方法采用高热量饲料加单次腹腔注射链脲佐菌素（35mg／kg）制备2型糖尿病大鼠模型,以1周后FPG≥11．1mmol／L为成模标准（n=28）,将糖尿病大鼠分别予以瑞格列奈＋二甲双胍（B,n=7）、罗格列酮十二甲双胍（C,n=7）、胰岛素＋二甲双胍（D,n=7）、生理盐水（E,n=7）干预,8周末测定血生化指标并计算HOMA,采用ELISA法检测血浆内脏脂肪素水平。结果B—E组FPG、FINS、HOMA、TC、TG、LDL、FFA、内脏脂肪素及体重较对照组均显著升高（P〈0．01）,HDL较对照组均明显下降（P〈0．01）;给予不同治疗后FPG、FINS、HOMA较未治疗组明显下降（P〈0．05）,C组FFA较其他各组明显下降（P〈0．05）,而内脏脂肪素较其他各组明显升高（P〈0．051;相关分析及多元回归分析显示血浆内脏脂肪素水平与体重及糖脂代谢相关。结论过氧化物酶体活化增殖受体（PPARr）核受体可能参与调控内脏脂肪素的表达和分泌活动;内脏脂肪素可能是PPARr的激动剂药物治疗2型糖尿病的作用靶点之一;内脏脂肪素与糖脂代谢和体重密切相关,与胰岛素抵抗无关。     

老年类风湿性关节炎治疗进展

老年类风湿性关节炎患者在选择NSAIDs药物时,需评估老年患者的危险因素。目前研究热点多集中于生物制剂治疗,老年患者使用生物制剂时应更多关注其感染的风险。传统中医药方案疗效确切,尤以雷公藤为突出,应开展大型关于中西医治疗老年类风湿性关节炎临床试验精确用药策略。老年患者更易合并心血管疾病、间质性肺病等共存病,治疗共存病同时也可控制类风湿本身疾病活动。老年类风湿性关节炎与其他年龄发病类风湿性关节炎一致,也需要"达标治疗",以疾病完全缓解及降低疾病活动度为目标,但由于老年类风湿性关节炎的发病及临床特点及治疗策略与其他年龄发病类风湿性关节炎不同,因此其达标治疗理念可能也会有所不同,目前临床试验多将老年患者排除在外,导致相应循证数据缺乏。因此需开展针对老年患者的临床研究,为临床治疗方案提供依据和指导。     

超声评分法在强直性脊柱炎髋关节受累诊断中的应用价值

目的 探讨超声评分法诊断强直性脊柱炎髋关节受累的应用价值。方法 对86例强直性脊柱炎髋关节受累的患者分别按照髋关节囊及大转子肌腱端不同超声表现进行评分，分析髋关节超声与临床、实验室指标的相关性，评价超声评分法诊断髋痛患者的可行性。结果 ①既往髋痛病史与软骨损伤相关性最高(r＝0.509，P＜0.01)；髋关节内旋和外旋疼痛与滑膜内血流相关性最高(r＝0.550，P＜0.01),与滑膜增厚和积液低度相关(r＝0.416、0.336，P＜0.01)；大转子压痛与附着端血流低度相关(r＝0.475，P＜0.01)。②髋关节囊评分与VAS和ASDAS-CRP评分呈显著相关(r=0.784、0.624，P＜0.01)。结论 超声评分中髋关节囊评分与临床评分及实验室指标相关性最高，可在一定程度上应用于髋关节受累的患者，超声单个项指标中滑膜内血流最能提示疾病活动性。     

肌球蛋白结合蛋白C的表达和鉴定

目的：探讨优化原核表达方法以及用亲和层析的方法制备重组人快型肌球蛋白结合蛋白C （MYBPC2）.方法：根据MYBPC2的序列设计一对引物,在上下游引物的5’端分别加上BamHI和HindⅢ酶切位点.以健康人骨骼肌cDNA为模版,扩增第284位至第579位氨基酸残基对应的碱基序列,经双酶切后插入pMalc-5e载体中,测序鉴定重组质粒的序列,将构建好的重组质粒转化大肠杆菌中,IPTG诱导重组蛋白MYBPC2-MBP的表达,亲和层析纯化重组蛋白,蛋白电泳法鉴定蛋白的分子量及纯度,测定蛋白浓度并估算蛋白纯化后得率.用商品化的抗MYBPC2抗体证实所表达蛋白序列的正确性.以纯化的蛋白免疫动物获得动物免疫血清,用Western Blot的方法鉴定此蛋白的免疫原性.结果：人MYBPC2蛋白表达载体构建成功,每升大肠杆菌菌液可生产纯化后的重组MYBPC2蛋白约30mg,Western Blot显示重组蛋白与其抗体及抗血清特异结合.结论：本方法可以高效制备生产人MYBPC2蛋白片段,具备良好的抗原特异性和免疫原性.     

循环游离DNA在多发性肌炎和皮肌炎中的作用

目的:研究循环游离DNA(cfDNA)在多发性肌炎(PM)和皮肌炎(DM)中的作用.方法:使用PicoGreen试剂盒检测61例PM/DM患者、34例系统性红斑狼疮(SLE)患者和48例健康对照的血浆cfDNA浓度,并与患者的血清学指标做相关性分析.结果:cfDNA浓度在PM/DM组是247.1 ±61.09ng/ml,显著高于健康对照组(197.1±31.36ng/ml,P＜0.01),显著低于SLE组(281.9±82.21 ng/ml,P＜0.01).cfDNA与血沉和血清球蛋白呈显著正相关(P＜0.01,P＜0.05),与C3呈显著负相关(P＜0.01).结论:cfDNA可能与PM/DM疾病活动度相关.     

中性粒细胞胞外诱捕网在特发性炎性肌病相关间质性肺病发病机制中的作用研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网在机体的病原体防御中发挥重要作用,但过度激活的中性粒细胞胞外诱捕网可能会损伤正常组织,同时参与特发性炎性肌病相关间质性肺病的发生发展。本文总结了中性粒细胞胞外诱捕网与特发性炎性肌病相关间质性肺病的关系,以及目前研究发现的可能的致病机制,并基于此讨论了潜在的治疗靶点和未来研究的方向。     

百日咳毒素通过诱导中性粒细胞胞外诱捕网形成参与实验性自身免疫性肌炎小鼠间质性肺疾病的发生

目的旨在明确百日咳毒素(PTX)能否促进实验性自身免疫性肌炎(EAM)模型间质性肺疾病(ILD)的发生并探究其潜在的致病机制。方法构建单用骨骼肌匀浆或骨骼肌匀浆联合PTX诱导的EAM模型, 通过组织病理学、血清学研究明确PTX与EAM小鼠ILD表型及中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的关系;健康小鼠单独给予PTX腹腔注射, 明确是否能在体内诱发NETs形成, PTX体外干预健康人中性粒细胞明确能否诱发NETs形成。计量资料使用Shapiro-Wilk正态性检验, 采用t检验或单因素方差分析, 采用图基事后检验(Tukey)进一步比较组间差异。结果与单用骨骼肌匀浆组相比, 使用骨骼肌匀浆联合PTX组的EAM模型肺组织有着类似于多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)相关ILD的多种病理学改变, 以非特异型间质性肺炎、普通型间质性肺炎为主要类型;EAM组肺间质伴有明显的NETs浸润;EAM组血清NETs标记物水平明显升高, 与对照组[n=5, (87±10)ng/ml]相比, 肌匀浆组[n=4, (115±27)ng/ml]和EAM组[n=7, (150±50)ng/ml]循环核酸(cfDNA)水平...     

血清骨代谢标记物对预测类风湿关节炎关节破坏的意义

目的：探讨血清骨代谢标记物与RA患者关节破坏的相关性。方法选取140例住院RA患者,90例同期健康人作为研究对象。采用DEXA测定RA者腰椎（ L1～L4）及股骨上端骨密度值,根据T值分为正常骨量、低骨量、骨质疏松组3组;另根据双手X线结果显示关节破坏程度分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期组;同时检测患者血清CTX、25（ OH） D、TRACP－5b、PTH、血钙、血磷、抗CCP抗体、RF、CRP、ESR。结果 RA组TRACP－5b、CTX水平明显高于健康对照组（Z＝－2．747,－4．809,P＜0．01）,25（OH）D水平明显低于健康对照组（Z＝－6．152,P＜0．001）;TRACP－5b与病程、关节压痛个数、CTX呈正相关（r＝0．193, r＝0．189, r＝0．196,P＜0．05）,随着疾病活动度的加重,TRACP－5b水平呈现递增趋势,且骨质疏松组TRACP－5b水平高于正常骨量组,但未达统计学差异;CTX与关节肿胀个数、25（OH）D呈正相关（r＝0．215, r＝0．192,P＜0．05）,其水平在疾病重度活动组明显高于中低度组;X线Ⅰ期组患者与其他各组相比年龄较小,病程较短,关节破坏程度轻;Ⅰ期、Ⅱ期组骨质疏松患病率明显低于Ⅲ期、Ⅳ期组（ P＜0．05）;骨量丢失随年龄增长、病程的延长、疾病活动度的加重而增加。结论骨代谢标记物与RA患者关节破坏有一定的相关性,联合检测多种骨代谢标记物可望预测关节破坏的程度。     

体型指数与胰岛素抵抗的相关性临床分析

目的 探讨体型指数(figure index,FI)与胰岛素抵抗(IR)的相关性,并与体重指数(BMI)和腰围(WC)进行比较.方法 256研究对象分为2型糖尿病(DM)组、糖调节受损(IGR)组和正常糖耐量(NGT)组,比较FI、WC、BMI与IR的相关性以及相关性在3组的差异.结果 FI、WC、BMI与稳态模型胰岛素抵抗指数均有显著相关性(P＜ 0.01),FI与IR的相关性更强;不同糖代谢各组比较,FI、WC、BMI与各指数间的相关性DM组＞ IGR组＞ NGT组,即与各指数间的相关性随糖调节异常的加重而增强.结论 FI、WC、BMI均是评估IR的良好指标,以FI敏感性最高.