次级淋巴组织趋化因子(SLC)转染树突状细胞抗肝癌细胞特异性免疫的实验研究

[目的]构建携带次级淋巴组织趋化因子(SLC)基因的重组腺相关病毒载体并转染肝癌患者外周血来源的树突状细胞(DC),探讨其对肝癌细胞特异性的免疫作用。[方法]采用PCR法扩增出SLC基因,将SLC基因片段克隆至腺相关病毒PAG-AAV载体上,GFP作为成功转染的示踪蛋白。经HEK293T细胞的包装扩增后得到携带SLC基因的重组腺相关病毒体外转然DC,制备AAV-SLC-DC疫苗,流式细胞仪检测感染率,免疫荧光、RT-PCR法检测SLC表达。并以MTT法检测DC刺激T淋巴细胞增殖能力(MLR)及对肝癌细胞株HepG2的CTL效应。[结果]成功得到SLC基因,并将SLC基因片段克隆至PAG-AAV载体上,可检测到序列正确的SLC基因的正确表达,经HEK293T细胞包装出病毒颗粒;测定病毒滴度为6.3×1010μg/ml。重组腺相关病毒PAG-AAV-SLC体外感染DC,流式细胞仪检测感染率达48.37%。SLC基因转染不影响DC的表型表达,与对照组无显著差异(P>0.05);转染后DC较对照组有较强的刺激T淋巴细胞增殖的能力;并可诱导出特异性的CTL效应,不同效靶比与对照组相比均有显著差异(P<0.05)。[结论...     

内镜下氩离子凝固术联合药物治疗幽门螺旋杆菌阳性成熟型疣状胃炎的临床疗效观察

目的探讨内镜下氩离子凝固术联合药物治疗幽门螺旋杆菌阳性成熟型疣状胃炎的临床价值。方法选取我院消化内科幽门螺旋杆菌阳性成熟型疣状胃炎病例176例,随机分为西药治疗组和综合治疗组,综合治疗组89例无痛胃镜下针对疣状胃炎典型病灶行APC治疗,术后予以抗Hp治疗。西药治疗组87例仅给予药物治疗。均于停药1月后复查C13呼气试验,于治疗3个月后复查胃镜。结果两组患者治疗后症状积分均下降,综合治疗组积分下降更明显。最终Hp根治率及显效率比较,综合治疗组高于西药治疗组。结论内镜下氩离子凝固术联合药物治疗幽门螺旋杆菌阳性成熟型疣状胃炎在内镜下表现缓解、症状缓解、Hp根除率方面均优于单纯药物治疗,是一种疗效确切、安全性好、经济实用而简便易操作的好方法,值得基层医院的临床推广。     

次级淋巴组织趋化因子和甲胎蛋白共修饰的树突状细胞诱导特异性抗肝癌免疫作用的研究

背景与目的：树突状细胞（dendritic cell,DC）是迄今发现的抗原呈递功能最强的专职抗原呈递细胞,近年来以DC为基础的肿瘤基因免疫治疗研究倍受瞩目。病毒载体介导的基因转移以其高效和良好的靶向性已被广泛应用于肿瘤基因治疗。本实验拟制备携带人AFP和SLC基因的慢病毒表达载体,并于体外感染CD34^＋造血干细胞来源的DC,诱导DC产生特异性抗肝癌细胞免疫作用,观察其对肝癌细胞株的杀伤作用。方法：采用化疗和集落刺激因子动员的肝癌患者外周血造血干细胞,血细胞分离机采集CD34＋造血干细胞,IL-4、GM-CSF联合TNF-α刺激CD34^＋细胞分化为DC。并检测经Lenti-AFP/Lenti-SLC转染致敏后的DC对CTL增殖的影响,并检测其对人肝癌细胞HepG2的作用。结果：经细胞因子刺激诱导培养的DC具有典型的分枝状突起,高表达CD1a、CD11c、CD80和CD86。MTT法检测Lenti-AFP/Lenti-SLC抗原冲击的DC能明显诱导CTL增殖。此CTL对表达AFP的肝癌细胞株HepG2的杀伤率显著性高于未转染DC组和无DC组（P〈0.05和P〈0.01）,效靶比为50：1时杀伤效应达到最高峰（P〈0.01）。结论：Lenti-AFP/Lenti-SLC抗原转染的DC在体外可诱导同种CTL产生和增殖,后者对AFP阳性肝癌细胞株具有特异性杀伤效应,该方法为肝癌免疫治疗奠定了基础。     

成人腺病毒7型感染54例分析

腺病毒主要引起呼吸道疾病,但也可感染消化道、泌尿道、眼部、心肌等部位。一般以小儿感染多见,成人发病报道较少。2014年1—2月,某单位突发成人呼吸道感染54例,经临床和实验室检查确定为腺病毒7型感染。现分析报告如下。1临床资料1.1一般情况54例中,男49例,女5例;年龄（20.5±3.5）岁。均有密切接触史。主要表现为发热、咳嗽、咳痰、咽痛、咽部充血及淋巴滤泡增生等。     

血管紧张肽原基因与原发性高血压的关系

血管紧张肽原酶——血管紧张肽系统是人体内影响水电解质平衡的重要系统。血管紧张肽原(也称血管紧张肽原酶降解物)是这个系统的关键部分,它可被血管紧张肽原酶降解产生血管紧张肽Ⅰ,然后再被血管紧张肽转换酶降解产生血管紧张肽Ⅱ。血管紧张肽原皿浆水平与血压及家族之间联系的观察表明,血管紧张肽原可能对原发性高血压起作用。因此Mark     

超声引导经皮经肝穿刺胆管置管引流术(附159例报告)

目的探讨超声引导下经皮经肝穿刺胆管置管引流术(PTCD)的临床应用价值。方法159例梗阻性黄疸病人,其中肝癌84例,胰头癌31例,胆管癌19例,胃癌肝转移12例,胆囊癌13例,在超声引导下经皮经肝胆管穿刺置管引流术178次。结果肝总管内置管86支,右肝管内置管41支,左肝管内置管51支,导管置入失败3支,PTCD成功率98%。结论超声引导下PTCD定位准确,成功率高,是较为安全、有效、病人易接受的胆道减压引流方法。     

胺碘酮致严重肝损害二例

胺碘酮为Ⅲ类广谱抗心律失常药,被广泛应用于临床治疗和预防各种室性、室上性心律失常及心房颤动。但在取得临床疗效的同时,该药引起的肝脏损害亦较常见,个别可致暴发型肝损害及肝功能衰竭死亡^[1],在临床上还未引起高度重视。本文分析2例应用胺碘酮致严重肝损害的患者资料,以便加强临床医师对此药不良反应的监测及防治。     

三维适形放疗同步化疗对中晚期食管癌患者生存质量影响的临床研究

目的比较三维适形放疗同步化疗与单纯三维适形放疗对中晚期食管癌患者生存质量的影响,治疗期间并发症及临床疗效。方法选取206例中晚期食管癌患者作为研究对象,将其中106例行单纯三维适形放疗患者列为对照组,100例行三维适形放疗同步化疗患者为观察组,比较2组患者治疗期间及治疗结束后生存质量各维度的改变,并发症发生率及临床疗效。结果 1治疗结束时对照组躯体功能、角色功能、总体症状明显好于观察组(P<0.05)。但治疗结束后3个月,观察组躯体功能、角色功能、情绪功能、社会功能以及总体症状均显著优于对照组(P<0.05)。22组患者均未发生严重的4级不良反应,放射性食管炎和放射性肺损伤组间差异不明显(P>0.05);观察组患者白细胞降低、血小板减少、肝功能异常、心脏毒性的发生率显著高于对照组(P<0.05)。观察组临床疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论三维适形放疗同步化疗方案治疗期间会影响患者的生存质量评分,但治疗后短期内生存质量即可逐渐恢复,相对于单纯放疗的患者获益更多。     

组织细胞坏死性淋巴结炎45例临床分析

组织细胞坏死性淋巴结炎(HNL,也称Kikuchi-Fujimolo病、Kikuchi病)是一种主要累及淋巴结肿大的良性、自限性疾病[1].该病多累及青年人,至今病因未明、发病机制不清.近年发病率呈上升趋势.我院近期收治了HNL患者45例,现将其临床资料分析如下.     

H_2O_2诱导的HT-29结肠癌细胞凋亡中microRNA-23表达变化

目的观察过氧化氢（H_2O_2）诱导的HT-29结肠癌细胞凋亡中microRNA（miRNA）的表达变化及其在细胞凋亡中的作用。方法常规培养的HT．29结肠癌细胞,给予500nMH_2O_2处理48h,构建HT-29细胞凋亡模型;常规RNA抽提后,利用miRNA颈环结构引物进行反转录反应后,采用实时荧光定量PCR分析miRNAs的表达水平。构建miR-23的Psuper过表达质粒,并将其转染HT-29细胞。实时荧光定量PCR分析Psuper-miR-23在HT-29细胞中的过表达效率。在H202诱导的HT-29细胞中过表达miR-23,48h后通过流式细胞术检测HT-29细胞的凋亡情况,并通过定量PCR检测细胞中Caspase3的表达。结果在H_2O_2诱导的HT-29结肠癌细胞凋亡模型中,miR-22、miR-24、miR-26、miR-30、miR-181和miR-214的表达水平在对照组与H_2O_2组之间表达差异没有显著性,而miR-23在处理组的表达水平明显升高。Psuper-miR-23过表达质粒转染培养的HT-29细胞能够明显提高miR-23的表达水平。在H_2O_2诱导的HT-29细胞过表达miR-23,能够促进HT-29细胞的凋亡。结论miR-23在H_2O_2诱导的HT-29细胞凋亡模型中表达升高,将其过表达能够促进H_2O_2诱导的HT-29细胞凋亡作用,表明miR-23可能参与了H_2O_2诱导的细胞凋亡过程。