抗人DR4、DR5单克隆抗体诱导神经胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的：探讨抗死亡受体DR4、DR5单克隆抗体（mAb）FMU1．4、FMU1．5对3株神经胶质瘤细胞株U343（敏感株）、U138（部分敏感株）、U373（耐受株）的杀伤作用及机制。方法：采用流式细胞术、RT—PCR、免疫细胞化学法、MTT比色法、电泳、DNA倍体分析和Westem blot等方法。结果：DR5在U343高表达；DR4在U373低表达。U343对FMU1．5敏感并呈剂量依赖性、对FMU1．4部分敏感；U138对FMU1．5部分敏感，对FMU1．4耐受；U373对两种抗体耐受。结论：FMU1．4、FMU1．5能不同程度地诱导三株细胞凋亡，其机制与DR4、0115、细胞色素C和FLIP的表达有关。     

IL-2Rα模拟肽抑制小鼠皮肤移植排斥反应的研究

目的：研究IL-2Rα模拟肽CP对小鼠皮肤移植排斥反应的影响。方法：采用小鼠同种皮肤移植模型，通过淋巴细胞增殖试验、单向混合淋巴细胞反应、脾脏T淋巴细胞亚群分析和细胞因子分泌水平测定、皮肤移植物组织学改变、记录皮肤移植物平均存活时间（MST）研究环七肽CP的免疫抑制效应。结果：环七肽CP可降低小鼠脾细胞增殖反应的强度、减少受鼠脾脏T淋巴细胞中CD4＋T淋巴细胞的数目并降低CD4＋/CD8＋的比值、下调受鼠脾脏T淋巴细胞诱导上清中IL-2和IFN的水平，并可延长皮肤移植物平均存活时间（MST）；环七肽CP与免疫抑制剂CsA联用，显示二者具有协同效应。结论：环肽CP以IL-2Rα模拟肽的方式发挥生物学效应，可有效抑制小鼠皮肤移植排斥反应。     

肿瘤患者血清及淋巴细胞培养上清sIL—2R与淋巴细胞转化相关性研究

本文通过微量全血、氚标记胸腺嘧啶核苷掺入法检测14例肿瘤患者及14例正常人PBMC 对PHA 的增殖反应;采用ELISA 双抗体夹心法检测其血浆及PHA 诱导的72小时淋巴细胞培养上清中sIL-2R 含量,其目的是探讨淋巴细胞转化与淋巴细胞培养上清sIL-2R 含量及其与血浆sIL-2R 含量的相关性。旨在了解T 细胞对分裂原反应性亦可通过对患者血清(血浆)及淋巴细胞72小时培养上     

抗肿瘤相关糖抗原sTn单克隆抗体的制备及鉴定

细胞发生转化时,经常伴随着细胞膜表面糖脂或糖蛋白糖链的改变〔１〕。在肿瘤细胞,特别是腺癌细胞,其表面粘蛋白分子的糖链经常由于合成不全而缩短,形成肿瘤相关的简单粘蛋白糖抗原,ｓＴｎ即为其中的一种〔２〕。ｓＴｎ（ＮｅｕＡｃα２→６ＧａｌＮＡｃα１→ＯＳｅｒ／Ｔｈｒ）是一种二糖结构,可表达于各种腺癌组织,而在正常组织中则很少或不表达。血清、细胞或组织中ｓＴｎ的检测,主要依赖抗ｓＴｎ的单克隆抗体（ｍＡｂ）。我们应用富含ｓＴｎ侧链的绵羊颌下腺粘蛋白（ＯＳＭ）免疫制备了抗ｓＴｎ的ｍＡｂ〔３〕,目的在于为建立检测ｓＴ…     

西洋参多糖组份 1(PPQ-1)对小鼠脾淋巴细胞合成细胞因子的影响

目的：筛选高效、低毒的生物应答反应调节剂。方法：采用淋巴母细胞增殖法、胸腺细胞增殖法、骨髓干细胞增殖法及微量病变抑制法，分别检测了西洋参多糖组份１（ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍｐａｎａｘｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ，ＰＰＱ－１－①～④）体外对小鼠脾细胞合成细胞因子的影响。结果：ＰＰＱ－１－①～④虽然单独不能诱导小鼠脾细胞合成ＩＬ－２，但可协同亚适量ＣｏｎＡ（２．５ｍｇ·Ｌ－１）诱导合成ＩＬ－２，其含量为２５０～３００ｕ。另外，这四种多糖也可单独及协同亚适量ＣｏｎＡ（２．５ｍｇ·Ｌ－１）诱导合成ＩＬ－１及ＩＦＮ，ＰＰＱ－１－①～④单独还可明显诱导脾细胞合成ＩＬ－３样活性物质。结论：ＰＰＱ－１－①～④具有一定的免疫调节作用。     

活化巨噬细胞通过接触导致肿瘤细胞凋亡

目的：探讨活化巨噬细胞与肿瘤细胞间接触引起肿瘤细胞死亡的机制.方法：通过卡介苗体内刺激和脂多糖体外刺激分别获得活化的巨噬细胞,通过体外细胞毒实验,检验其对MCA207肿瘤细胞的杀伤活性;利用流式细胞技术检测巨噬细胞表面Mac-1、TNF-α的表达情况.结果：活化的巨噬细胞可以通过与肿瘤细胞接触杀伤肿瘤细胞,这种杀伤活性不受多聚甲醛固定的影响,但胰蛋白酶消化能使杀伤活性丧失;这种杀伤活性是通过诱导肿瘤细胞凋亡实现的,但并不是由细胞表面TNF-α引起的.结论：巨噬细胞表面还存在目前未知的效应分子,该分子可以诱导MCA207细胞发生凋亡.     

抗人DR5单克隆抗体诱导Ｕ343细胞凋亡研究

目的:探讨抗肿瘤坏死因子相关凋亡配体的死亡受体DR5单克隆抗体对神经胶质瘤细胞株U343的杀伤作用及机制.方法:采用流式细胞仪从蛋白质水平定量地检测DR5在U343的表达;用RT-PCR从mRNA水平检测DR5的表达;免疫细胞化学法明确DR5在U343的分布情况.通过MTT法、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪DNA倍体分析,观察抗人DR5单克隆抗体对U343细胞增殖的抑制活性及其诱导凋亡效应.结果:神经胶质瘤细胞株U343表达死亡受体DR5,DR5分布于细胞内细胞核的周围.抗人DR5单克隆抗体3μg/ml作用4 h可明显杀伤U343细胞,其机制与诱导凋亡有关.结论:抗人DR5单克隆抗体可以诱导神经胶质瘤细胞株U343凋亡,以死亡受体为靶点的抗体制剂为肿瘤治疗提供新的途径.     

西洋参多糖对小鼠脾淋巴细胞的刺激效应

研究西洋参多糖（ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍｐａｎａｘｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍＰＰＱ）对小鼠脾淋巴细胞刺激效应。通过３Ｈ掺入法测淋巴细胞转化及母细胞增殖法测ＩＬ－２合成。结果表明，ＰＰＱ可协同亚剂量ＣｏｎＡ促进脾淋巴细胞转化及ＩＬ－２合成。将ＰＰＱ—１进一步分离得到４种成分（ＰＰＱ－１－１～４）。体外实验结果表明，ＰＰＱ－１－１～４既可单独也可协同亚剂量ＣｏｎＡ促进脾淋巴细胞转化。提示西洋参多糖对小鼠脾淋巴细胞具有一定刺激作用。     

可溶性白细胞介素Ⅱ受体与四种皮肤病相关性的初步研究

检测91例皮肤病(即银屑病、胶原病、白癜风、尖锐湿疣)患者血清可溶性白细胞介素Ⅱ受体(SIL—2R)水平,并分析了与疾病的关系。结果显示,91例患者血清SIL—2R水平高于正常者53例(占58.24％),1500u/ml以上者2例。表明SIL—2R水平与同免疫有关的皮肤病密切相关。     

特异性抗人cyclin D1人源单链抗体的筛选

目的 从噬菌体抗体库中筛选人源性抗人cyclinD1蛋白的单链抗体并进行鉴定.方法 以原核表达并用Ni-NTA Agarose纯化的重组人cyclinD1蛋白为抗原,通过"吸附-洗脱-扩增"淘选过程从噬菌体抗体库中筛选特异性抗人cyclinD1蛋白的单链抗体,通过ELISA方法对获得抗体的特异性和结合活性进行分析鉴定.结果 经过4轮筛选,获得7株能与人cyclinD1蛋白结合的阳性克隆,其中3株噬菌体的可溶性表达单链抗体能与人cyclinD1蛋白有特异性结合活性.结论 利用噬菌体抗体库技术可以不经免疫过程制备出特异性的人源性抗人cyclinD1抗体.