VEGFA、VEGFC及其受体和angiopoietin-1/angiopoietin-2及其受体在人胚胎卵黄囊血岛、AGM区的表达

本研究观察VEGFA、VEGFC及其受体和angiopoietin-1、angiopoietin-2及其受体在发育第3-12周人胚胎卵黄囊血岛、主动脉-生殖腺-中肾(AGM)区的表达。在征得意外流产孕妇同意并签字后，收集其意外流产的受精龄第3-12周的人胚胎，用4％多聚甲醛固定，石蜡包埋切片，HE和免疫组织化学染色，光镜观察。结果表明：第21-25天人胚卵黄囊血岛血管内皮细胞和造血细胞强表达VEGFA及其受体flt1和flk-1，VEGFC及其受体fit4，anglopomtin-2及其受体Tie-2蛋白；弱表达angiopoietin-1蛋白。背主动脉和中肾于发育第4周开始表达上述各种因子及其受体，免疫阳性反应物集中在大而圆、有核的造血细胞。阳性细胞的数量到第7周到达高峰。8周以后，阳性细胞数量显著减少，到12周几乎所有的血细胞为免疫阴性反应。生殖腺主要在第6—8周表达VEGFA，flt1，flt4，angiopoietin-1，angiopoietin-2和Tie-2蛋白，但不表达VEGFC和flk-1。在AGM区的血管内皮细胞未检测到上述各因子的表达。结论：人胚胎卵黄囊血岛造血细胞和内皮细胞以及背主动脉和中肾共表达多种与血管发生和血液发生相关的因子。人胚内造血发生于第4周。     

第3～5周人胚肝的细胞特征和生长因子及其受体表达

背景：早期肝的发育与横隔间充质和原始心脏的发育在时间和空间上存在密切关系，来自原始心脏和横隔间充质的信号分子可诱导前肠内胚层细胞向肝细胞的特化，横隔间充质为肝芽的形成提供了一个适宜的环境，并可促进其生长和分化。但这一诱导过程的分子机制尚不清楚。 目的：利用发育第3～5周人胚标本，选择甲胎蛋白、细胞角蛋白19、c—Met作为肝干细胞的标记物，观察早期人胚胎的发育及肝干细胞的形态特征，以明确肝干细胞的特征和影响其增殖、分化的因素，为肝干细胞的基础研究和临床应用提供实验依据。 设计：开放性实验。 单位：潍坊医学院人体解剖学教研室。 材料：实验于2004-09／2005-01在成都医学院科研中心完成。选择2个月内流产的新鲜人胚胎标本20例，20min内用40g/L多聚甲醛固定，常规石蜡包埋、连续切片，苏木精-伊红染色，显微镜下观察，参照Jirasek的人胚发育分期标准，根据胚胎的长度、体节的数目及器官发育状况确定胚龄。 方法：选择胚龄第3-5周的标本，SABC法进行免疫组织化学染色。多克隆抗肝细胞生长因子、c—Met、胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体、转化生长因子β1、转化生长因子β受体1、转化生长因子β受体2抗体，单克隆抗增殖细胞核抗原、甲胎蛋白和细胞角蛋白19抗体，4℃孵育过夜，羊抗兔或羊抗鼠ⅠgG及SABC液室温下分别孵育2h，二氨基联苯胺显色。以磷酸盐缓冲液代替-抗作阴性对照。光学显微镜下观察、拍照。 主要观察指标：第3～5周人胚肝干细胞的形态特征及标记物的免疫组织化学染色，肝细胞生长因子、转化生长因子β1、胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体在第3-5周人胚肝、原始心脏及横隔间充质细胞中的表达。 结果：①第3-5周人胚肝干细胞的形态特征及标记物的免疫组织化学染色观察：第3周末肝芽形成，第4周肝芽的细胞伸人横隔间充质内形成肝索，构成肝索的细胞具有与第3周末相同的形态特点。第5周时这些细胞数量明显增加，细胞体积有所增大，胞核嗜碱性稍减弱，胞质的嗜酸性增强，但细胞的形态仍均匀一致。第3～4周时肝索的细胞呈增殖细胞核抗原的反应阴性，5周时开始出现阳性反应，主要分布在细胞核，少数细胞的胞质为弱阳性。第3～5周时多数肝索细胞都为甲胎蛋白和c—Met阳性，甲胎蛋白阳性细胞的免疫反应沉淀物在胞核、胞质及细胞膜中均存在；c—Met阳性反应主要分布于细胞核，胞质亦可见较弱的阳性反应。而这些细胞为细胞角蛋白19阴性。②肝细胞生长因子、转化生长因子β1、胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体在第3—5周人胚肝、原始心脏及横隔间充质细胞中的表达：发育第4周组成肝索的细胞表达c—Met，而不表达其他的因子或受体。第5周时，除了肝细胞生长因子以外的其他因子均在肝索细胞表达。转化生长因子β1及其受体转化生长因子β受体l、转化生长因子β受体2的免疫反应沉淀物主要存在于细胞质和细胞膜，胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体的阳性反应在细胞核、细胞质以及细细胞膜均可见。第3-5周时，肝芽或肝索周围的心肌细胞和间充质细胞呈肝细胞生长因子、转化生长因子β1、胰岛素样生长因子Ⅰ免疫反应阳性，阳性信号主要聚集在细胞质，少数胞核亦有阳性。 结论：①人胚胎发育的第3周末，前肠腹侧的部分内胚层细胞特化为肝干细胞。②发育第3-5周人胚肝的细胞为未分化的肝干细胞，若拟研究人胚肝干细胞，此时取材、并利用肝干细胞特异性的标记物，可得到具有双向分化潜能的肝干细胞。对于鼠胚肝于细胞的研究，也可利用人、鼠胚龄的对应关系，推算出其肝干细胞存在的时间、从而决定取材的时间点。③肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1等生长因子促进早期人胚肝的发育。     

浅谈系统化整体护理的体会

随着社会的发展，医学科学的进步，护理学进入一个新的阶段，以现代护理观为指导，以人的健康为中心，以护理程序为核心，为病人提供各种包括生理、心理、社会、文化等各方面整体护理服务系统化护理模式，为维护与增进人民的健康，为病人的安全舒适，最大程度满足病人的需要，针对骨科工作性质，我们开展了系统化整体护理二年来，我们做为责任护士浅谈一下个人体会。     

胰岛素样生长因子—Ⅰ在胎儿肝，肾等组织的分布

目的 研究胰岛素样生长因子（IGFs）对胎儿组织增殖和分化的作用。方法 应用免疫组化ABC法对16至24周胎龄肝、肾、肾上腺、脾、胸腺等ICF－I阳性细胞进行定位研究。结果 胎儿期内,以上器官中均有IGF－I阳性细胞存在,不同个体和器官其阳性细胞的数量、反应强弱和表达情况有差异。结论 在人胎发育过程中,这些器官组织均能表达IGF－I,对其增殖分化起着自分泌和旁分泌的作用。     

胰岛素样生长因子——Ⅰ在胎儿肝、肾等组织的分布

目的　研究胰岛素样生长因子 (IGFs)对胎儿组织增殖和分化的作用。方法　应用免疫组化 ABC法对16至 2 4周胎龄肝、肾、肾上腺、脾、胸腺等组织 IGF— I阳性细胞进行定位研究。结果　胎儿期内 ,以上器官中均有IGF— I阳性细胞存在 ,不同个体和器官其阳性细胞的数量、反应强弱和表达情况有差异。结论　在人胎发育过程中 ,这些器官组织均能表达 IGF— I,对其增殖分化起着自分泌和旁分泌的作用     

胚胎早期胰腺发育中相关因子表达的变化

目的 探讨人胚胎胰腺发育过程中相关因子表达的变化，为胚胎胰腺移植治疗糖尿病提供基础性研究。方法 对7～12周胎龄段的胰腺采用免疫组化S-ABC法分析胰腺发育中相关因子的表达变化、胰岛的分化和形成。结果 胰岛素、胰升糖素、生长激素抑制因子及细胞角蛋白在胚胎胰腺发育中7周开始表达，与胰岛的分化和形成一致，随着胎龄的增加表达增强；IGF-Ⅰ及Ⅶ因子在胚胎12周时出现在胰腺间质内。结论 胰岛素、胰升糖素、细胞角蛋白和IGF-Ⅰ在人胚胎胰腺的发育中起着重要的调控作用，与胰腺内外分泌腺的分化和形成有关；12周后的胚胎胰腺可以作为胚胎胰腺移植的供体。     

人胎视网膜血管结构发育的研究

目的；观察人胎视网膜血管结构发育过程。 方法：收集134例12~38周受精龄胎儿和4例成人视网膜，进行整装铺片和切片的免疫组织化学染色检查。 结果：①梭形细胞仅存于小于27周胎儿的视网膜内；足月胎儿节细胞层血管仍有出芽．②各阶段胎儿及成人视网膜血管基膜的纤维连接蛋白免疫反应均呈阳性。层粘连蛋白和Ⅳ型胶原免疫反应分别于25周和29周出现在节细胞层血管基膜，并分别在29周和32周开始完全包裹视网膜内已形成的4层血管．③内皮细胞束管道化时管道外即出现平滑肌细胞和周细胞．④4层血管向锯齿缘扩展的同时，内皮细胞外即有星形腔质细胞和Müller细胞突起形成血—视网膜屏障胶质膜。 结论：与成人比较，不同阶段胎儿视网膜血管均存在一定的缺陷，到足月时内皮细胞仍处在增殖、迁移状态． （中华眼底病杂志，1997，13：153-156）     

人胎视网膜血管发生方式的研究

人胎视网膜血管发生方式的研究李爱冬，羊惠君。华西医科大学人体解剖学教研室。中华眼底病杂志１９９６；１２（２）∶８８目的：观察人胎视网膜血管的形成方式。方法：收集１３～３８周胎儿视网膜８６例，免疫组织化学杂色（ＡＢＣ）法，光镜观察。结果：在胎儿１２～１...     

人胎视网膜神经元凋亡的研究

目的：观察人胎视网膜各种神经元凋亡的发生时间，神经元凋亡与增殖，分化的关系，方法：收集８～３８周（受精龄）胎儿视网膜２７例，成人视网膜３例，核苷酸末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口翻译法（ＴｄＴ－ｍｅｄｉａｔｅｄｄＵＴＰｎｉｃｋｅｎｄｌａｂｅｌｌｉｎｇｍｅｔｈｏｄ，ＴＵＮＥＬ法）标记凋亡细胞，光镜观察，结果：标记的凋亡细胞具有环形核，核浓缩或新月形等典型形态学特征，可见凋亡小体，胎儿视网膜神经上皮细胞，