弓形虫慢性感染小鼠的系统性细胞免疫应答规律

弓形虫感染可激发宿主产生Th1型免疫反应,因此研究弓形虫疫苗尤其需要关注系统性T细胞免疫应答与保护力的关系。本研究被弓形虫Pru株包囊口服感染BALB／c小鼠,成功建立了弓形虫慢性感染小鼠模型。慢性感染小鼠的脾细胞用弓形虫可溶性抗原刺激后可以产生特异性增殖。进一步分析发现弓形虫特异性CD3＋T、CD4＋T和CD8＋T细胞都可以产生IFN-γ。本研究建立的弓形虫慢性感染小鼠模型可以产生较强的系统性T细胞免疫应答,为弓形虫疫苗研制的效果评价提供重要参考。     

表达H9N2禽流感病毒HA1蛋白的转基因和缓艾美耳球虫的构建

H9N2亚型禽流感病毒已经被证实可以传播到人类,对它存在的潜在危害已受到越来越多的关注。因此,研究安全而有效的H9N2禽流感病毒疫苗已迫在眉睫。为研究和缓艾美耳球虫作为活载体表达及运输禽流感病毒抗原的潜能,本研究构建了可稳定表达H9N2禽流感病毒HA1蛋白的转基因和缓艾美耳球虫。利用黄色荧光蛋白（YFP）及融合的乙胺嘧啶抗性基因（DHFR-TSm2m3）作为报告基因及筛选基因,我们将表达H9N2禽流感病毒HA1抗原的质粒载体核转球虫子孢子,接种鸡后在乙胺嘧啶药物的选择压力下进行筛选并连续传代获得转基因和缓艾美耳球虫系。利用染色体步移和免疫印迹证实了HA1基因的成功插入和表达;利用间接免疫荧光证实HA1蛋白定位于球虫子孢子细胞膜表面和头部。研究进一步发现,转基因球虫的繁殖力与野生球虫相当,感染后亦于第6d达到排卵囊高峰。该转基因和缓艾美耳球虫株具有作为疫苗活载体的潜能。     

我国鸡球虫抗药性现状和抗药机制研究进展

球虫病严重威胁养鸡业健康发展.随着抗球虫药物的使用,鸡球虫的抗药性越来越普遍,增加了该病的防控难度.本文对十年来鸡球虫抗药性调查文献进行了梳理,发现我国各地区鸡球虫对大部分常用药物均具有中度以上的抗药性,华东和华南地区最严重,西北和东北地区的抗药性最弱.在各类药物中,对聚醚离子载体类药物和地克珠利的检测最多,对前者接近一半地区达到完全抗药,而对地克珠利基本为中度抗药,对其他化学合成药物过半数达完全抗药.当然由于地区差异,同一地区仍存在敏感性不同的虫株.各种药物的抗药性产生机制不一样,可能涉及虫体的结构蛋白改变如SAG家族蛋白、细胞膜离子通道、糖或脂肪酸代谢酶如苹果酸脱氢酶或能量代谢酶如细胞色素氧化酶.随着鸡球虫抗药性逐步得到解析,系统监测、科学用药和免疫预防等综合举措将极大消减球虫病对养鸡业的影响,提升经济与社会效益.     

黄芪香砂六君子汤治疗功能性消化不良临床疗效及其对脑肠肽的影响

目的 观察黄芪香砂六君子汤治疗功能性消化不良患者的临床疗效及对脑肠肽的影响,探讨黄芪香砂六君子汤对功能性消化不良治疗可能基于“脑肠轴”发挥作用机制。方法 将82例功能性消化不良患者随机分为观察组42例与对照组40例。对照组给予莫沙必利片与雷贝拉唑口服,观察组在对照组的治疗基础上给予中药黄芪香砂六君子方,两组均治疗4周,治疗结束后观察两组临床疗效,并于治疗前后分别进行中医症状积分评估及胃肠激素检测、安全性评估。结果 治疗后,观察组临床总有效率高于对照组（<0.05）;观察组中医症状总积分显著低于对照组（<0.05）;观察组脑肠肽胃动素（MTL）、胃泌素（GAS）水平高于对照组,血管活性肽（VIP）水平低于对照组（均<0.05）;两组生长抑素（SS）无明显差异（>0.05）;两组不良反应情况比较无显著差异（>0.05）。结论 黄芪香砂六君子汤对于功能性消化不良患者临床症状有显著改善,其对脑肠肽MTL、GAS的上升,VIP、SS的下降有一定的作用,其作用途径可能基于“脑肠轴”对脑肠肽的影响发挥作用。     

盐霉素抗球虫机制及耐药性研究:概述

鸡球虫病是由艾美耳球虫感染引起的一种肠道寄生虫病,对养禽业造成巨大的经济损失.盐霉索作为一种聚醚离子载体类药物,具有广谱抗球虫作用,广泛用于养殖业对球虫的防控,但盐霉素药物的长期使用会导致球虫产生一定的耐药性.本文概述盐霉素的研究历史,并总结其耐药性研究的现状,以期对新型抗球虫药物研发提供参考.     

兔球虫PCR检测方法的改进和应用

兔球虫病由艾美耳属球虫寄生于消化道而引起,对养兔业的危害极大。由于兔艾美耳球虫的11个虫种在致病性上有较大差异,因此进行准确的虫种鉴定对兔球虫病的诊断和防治有十分重要的意义。为提高和扩大PCR方法检测粪便样品中艾美耳球虫的灵敏度和应用范围,我们利用全基因组扩增技术对提取自粪便样品的球虫基因组进行预扩增,提高PCR反应初始模板含量,再利用兔艾美耳球虫ITS-1序列种特异性引物对WGA产物进行PCR扩增,以鉴定虫种。结果显示,经全基因组扩增后的样品的PCR检测能够在单个卵囊的水平上进行虫种鉴定。利用该方法,我们对10份卵囊含量较少的田间兔粪样品进行了PCR检测,对其中的虫种进行了的鉴定。检测结果显示,与卵囊形态鉴定相比,该方法不仅与能确定形态的形态学检测结果一致,还能够检测出形态学不易判断的虫种,体现了更高的准确性。该技术的应用可提高田间样品检测的敏感性和准确度,为兔球虫临床感染情况提供实践指导。     

艾美耳球虫转基因研究进展

艾美耳属Eimeria球虫是寄生于多种动物的一类细胞内寄生原虫。近年来随着荧光报告基因及药物筛选基因的应用,艾美耳属球虫的转基因研究取得了较为可喜的突破。转基因艾美耳球虫为球虫生物学、免疫学和遗传学研究提供了很好的研究材料。本文将对艾美耳球虫转基因研究取得的突破、所使用的转基因及鉴定技术,以及转基因球虫的潜在应用作一综述。     

肠艾美耳球虫张家口分离株致病性和免疫原性的初步研究

肠艾美耳球虫是兔球虫中的主要致病虫种之一,充分研究其生物学特性对兔球虫病的防治有十分重要的意义。本文对肠艾美耳球虫张家口分离株的致病性和免疫原性进行了初步研究。利用3个剂量（1×10^4、1×10^5、1×10^6）的肠艾美耳球虫张家口分离株孢子化卵囊感染35—45日龄无球虫兔,观察临床症状和体重变化,以研究其致病性;21d后,再用1×10。个肠艾美耳球虫孢子化卯囊进行攻毒,监测体重变化和卵囊排出量,评价其免疫原性。结果发现,接种1×10^4个卵囊,即可导致家兔出现临床症状,与空白对照组相比,日增重显著下降,更高感染剂量则会加重症状。攻毒后,免疫组增重未受影响,与空白对照组相比无差异,而不免疫攻毒组体重显著下降;同时免疫组的卵囊排出量显著低于不免疫攻毒组。结果表明肠艾美耳球虫张家口分离株对仔兔具有中等致病性;同时其免疫原性良好。因此可以把该株球虫作为原始株进行早熟虫株选育,并以此为基础,进行兔球虫病疫苗的开发。     

和缓艾美耳球虫激发宿主免疫应答的初步研究

和缓艾美耳球虫Eimeriamitis是7种鸡球虫中致病力弱的虫种,对于其免疫原性的认识至今仍有争论。本研究以和缓艾美耳球虫涿州株为研究对象,以初次免疫及二次免疫后鸡的卵囊排出量为标准评估了其免疫原性。同时利用ELISA检测了免疫后鸡群血清中球虫特异性IgY抗体的水平,并通过ELISPOT技术分析了二免后鸡群外周血单核淋巴细胞（PBMC）中分泌IFN-γ的特异性淋巴细胞的数量。结果显示,二次免疫后,鸡的卵囊排出量显著低于初次免疫,免疫组的血清特异性IgY抗体水平较低,而分泌IFN-γ的特异性淋巴细胞的数量较高。这些结果表明和缓艾美耳球虫涿州株具备良好免疫原性,且其激发宿主产生的保护性免疫以细胞免疫应答为主,有作为疫苗株的潜力。     

艾美耳球虫子孢子从宿主细胞中逸出机制的初步研究

艾美耳球虫是一类重要的肠道病原,其裂殖生殖阶段的虫体逸出过程是造成畜禽肠道破坏的主要原因之一,但此逸出过程的机制仍鲜有报道。本研究以乙醇作为诱导剂研究柔嫩艾美耳球虫M2e株子孢子从宿主细胞中逸出的机制。结果显示,乙醇可诱导子孢子从MDBK细胞中逸出,此逸出过程依赖于虫体的运动能力;同时,乙醇可激发子孢子逸出相关的微线体蛋白2（Mic2）的分泌释放。进一步实验证实,螯合虫体内部钙离子明显阻断了子孢子逸出及Mic2蛋白的释放。本研究初步证实了与柔嫩艾美耳球虫逸出相关的蛋白和离子,为深入解析球虫致病的分子机制、研发新型抗球虫药物提供了新的研究方向。