流体剪切应力对晚期内皮祖细胞生物学功能的影响

目的 研究流体剪切应力处理对晚期内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）体外及体内生物学功能的影响。 方法 密度梯度离心法分离大鼠骨髓单核细胞,应用EGM-2MV进行体外培养。以3~4代的EPCs,即晚期EPCs为靶细胞,对其施以1.2 Pa剪切应力处理。采用EdU标记技术、黏附能力测定实验、改良的Boyden小室、Annexin V/PI、β 半乳糖苷酶检测法、Matrigel法、荧光定量RT PCR等方法分别检测剪切应力对晚期EPCs增殖、黏附、迁移、凋亡、衰老、体外成血管及VEGF mRNA表达等生物学功能的影响。应用大鼠颈动脉损伤模型及细胞原位移植等实验手段检测剪切应力预处理对晚期EPCs修复受损内皮的影响。结果1.2 Pa剪切应力处理可不同程度提高晚期EPCs的增殖、黏附、迁移及成血管能力（P＜0.01）,上调VEGF的基因表达,抑制晚期EPCs的衰老及凋亡（P＜0.01）;移植经剪切应力预处理的晚期EPCs可加速损伤内皮的修复,减缓内膜的增生。结论 流体剪切应力可改善晚期EPCs的功能活性,提高晚期EPCs修复损伤血管内皮的能力, 这为EPCs的临床应用及剪切应力介导的细胞疗法提供了实验依据。     

弓形虫慢性感染小鼠的系统性细胞免疫应答规律

弓形虫感染可激发宿主产生Th1型免疫反应,因此研究弓形虫疫苗尤其需要关注系统性T细胞免疫应答与保护力的关系。本研究被弓形虫Pru株包囊口服感染BALB／c小鼠,成功建立了弓形虫慢性感染小鼠模型。慢性感染小鼠的脾细胞用弓形虫可溶性抗原刺激后可以产生特异性增殖。进一步分析发现弓形虫特异性CD3＋T、CD4＋T和CD8＋T细胞都可以产生IFN-γ。本研究建立的弓形虫慢性感染小鼠模型可以产生较强的系统性T细胞免疫应答,为弓形虫疫苗研制的效果评价提供重要参考。     

心肌细胞裂解液对P19细胞向心肌细胞分化的诱导效果观察

目的观察心肌细胞裂解液诱导P19细胞向心肌细胞定向分化的效果。方法 P19细胞悬浮培养至第4天形成细胞聚集体。用心肌细胞裂解液(A组)、心肌细胞条件培养液(B组)和完全培养基(C组)分别培养聚集体7、10 d。用免疫组化法检测各组细胞培养液中心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达,用Western blot法定量检测各组细胞中的cTnT及心肌细胞缝隙连接蛋白43(Cx43)。结果 A、B、C组cTnT阳性细胞率分别为5.0%、2.4%、0,cTnT阳性细胞率A组>B组>C组(P均<0.05)。培养7、10 d时A、B组细胞cTnT和Cx43明显高于C组(P均<0.05),A组细胞cTnT和Cx43明显高于B组(P均<0.05)。结论心肌细胞裂解液可诱导P19细胞向心肌细胞定向分化,其效果优于心肌细胞条件培养液。     

异丙酚复合氯胺酮用于人工流产的临床观察

目的:观察小剂量异丙酚复合氯胺酮用于无痛人流的临床效果。方法:将所有要求人工流产的妊娠妇女,随机分为对照组和观察组,观察组应用异丙酚复合氯胺酮静脉注射;对照组应用双氯酚酸钠栓的同时,行宫颈注射利多卡因。观察镇痛效果、宫颈松弛、术中出血量、人工流产综合征、不良反应等指标。结果:两组镇痛情况、术中出血量、不良反应比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:异丙酚复合氯胺酮用于人工流产术,具有减少出血量、使宫颈松弛、减轻疼痛程度、安全可靠的优点,适于临床推广。     

喉镜、鼻咽镜等处理方法的改进

目的 改进喉镜、鼻咽镜、压舌板、枪状镊的处理方法,避免院内交叉感染,减少损失.方法 将喉镜、鼻咽镜、压舌板、枪状镊的包装分成多个数量规格,使用等离子灭菌柜进行灭菌.结果 改进喉镜、鼻咽镜、压舌板、枪状镊的处理方法后减少了喉镜、鼻咽镜、压舌板、枪状镊的损失,减少了交叉感染机会,利于院内感染控制,有实用价值.     

DahlS高血压大鼠卵巢细胞凋亡相关因素的实验研究

目的:探讨高血压时卵巢细胞凋亡的调控机制。方法:以日本引进DahlS高血压大鼠为研究对象,应用流式细胞仪、生化等技术,对DahlS高血压大鼠卵巢细胞凋亡与Bcl-2、iNOS及NO等相关因素进行研究。结果:(1)随高血压病情加重,卵巢细胞凋亡率逐渐上升,与之伴随Bcl-2表达率逐渐下降,iNOS表达率逐渐升高,实验组与对照组比较差别显著,P<0.05。(2)11周龄实验组血清NO含量较对照组降低,两者比较差别显著,P<0.01;而随高血压病情加重,实验组NO含量逐渐增高,反而高于对照组,两组比较差异有统计学意义,P<0.05。丙二醛(MDA)随高血压病情加重逐渐增高,实验组与对照组比较差别显著,P<0.05。结论:随血压升高,卵巢细胞凋亡加重与Bcl-2调控及iNOS、NO直接作用有关。     

《中国美容整形外科杂志》创新平台的形成——医疗卫生事业如何创新(刍议)

以胡锦涛为首的党中央多次强调，各行各业要积极贯彻科学发展观，为共建创新型国家、单位和个人而奋斗。因此，如何将《中国美容整形外科杂志》办成能够为同行提供尽可能宽松的创新型学术交流平台，是当务之急!     

应用二甲基亚砜体外诱导P19细胞分化为心肌细胞

目的观察P19细胞经二甲基亚砜（DMSO）诱导及不同培养方法,培养形成细胞聚集体并向心肌分化的过程.方法将P19细胞接种于Petri塑料培养皿或铺有0.5%软琼脂的培养皿中,DMSO诱导悬浮培养7 d形成细胞聚集体,将聚集体用生长培养基黏附培养至19 d.观察细胞跳动情况,用α-sarcomeric actin、cardiac Troponin T（cTnT）抗体进行免疫组织化学染色,鉴定细胞分化.结果经DMSO诱导7d,将形成的细胞聚集体用生长培养基黏附培养至15 d,在聚集体周围的生长晕中出现自发性节律跳动的细胞团片,α-sarcomeric actin及cTnT染色阳性,至19d,阳性率分别可达26%和15%.结论 DMSO诱导结合聚集体形成培养方法可诱导P19细胞向心肌细胞分化,并出现自发性有节律跳动.     

外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化

目的:构建人Nkx2-5基因融合绿色荧光蛋白真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,探讨外源性Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化的作用。方法:以真核表达质粒pEFSA-HA-Nkx2-5为模板,PCR扩增得到人Nkx2-5基因,将目的片段亚克隆到pEGFP-N1载体,鉴定正确。将重组质粒pEGFP-N1-Nkx2-5以脂质体法转染P19细胞,G418筛选2周,聚集4d,贴壁培养16d。以免疫细胞化学检测desmin、α-sarcomeric actin和cardiac Troponin T(cTnT)的表达。结果:将Nkx2-5基因正确插入pEGFP-N1载体,外源表达Nkx2-5基因可使P19细胞在无诱导剂、聚集条件下表达desmin、α-sarcomeric actin和cTnT蛋白。结论:成功构建真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化。