临床基因检测报告规范与基因检测行业共识探讨CSCD

二代测序技术（next generation sequencing,NGS）在临床的应用为广泛开展遗传病的基因检测、病因诊断、治疗及预防奠定了基础,但同时也伴随着一系列的问题,其中很重要的一个环节就是基因检测报告缺乏统一或基本的标准。首届“临床基因检测标准与规范专题研讨会”于2017年10月28日在深圳召开,来自全国138家机构的250多位遗传学专家、临床专家及第三方检测机构的代表共同探讨了遗传病基因检测报告的标准和规范问题。本文根据此次研讨会专家的意见和建议,就遗传病基因检测报告的原则、规范以及基因检测行业的发展进行了讨论,并发布了临床基因检测报告规范共识,以促进检测报告的规范化和标准化,推进我国基因检测行业的健康有序地发展。     

遗传病二代测序临床检测全流程规范化共识探讨(2)——样品采集处理及检测

二代测序技术(next generation sequencing,NGS)具有极高的检测通量,相对低的检测成本,高度的准确性(accuracy)和精准性(precision),是遗传病临床检测的有力工具之一。NGS实验室的检测流程是否规范,将直接影响NGS数据的稳定性、可靠性和有效性,将决定其是否能被用于遗传病的临床辅助诊断或筛查。因此.作为遗传病基因检测的重要环节之一,NGS实验室中流程的规范化与标准化非常重要。2019年5月,在第二届基因检测联盟会议上,针对如何规范NGS检测流程,从事遗传病临床诊治、实验室检测以及第三方基因检测机构的专家进行了全面充分的讨论,旨在规范基于NGS的基因检测流程,对检测流程中的前、中、后三个阶段(包括样本采集/接收/保存、NGS建库、上机测序及数据质控)的操作与实施提出了专业性的指导意见,以规范NGS技术在遗传病基因检测领域中的应用。本文根据此次研讨会上各行业专家的讨论,总结并发布NGS实验室检测流程的规范共识,以促进NGS实验室流程的规范化和标准化,推进我国NGS实验室在遗传病基因检测领域的快速和专业化发展。     

一种用于脓毒症快速检测的多重PCR检测体系构建

目的 建立一种基于多重实时荧光定量聚合酶链反应（multiple real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,多重PCR）技术的检测体系,快速、特异检测脓毒症患者血液中的病原菌。方法 分析血液标本分离菌主要菌种分布,绘制脓毒症特异性病原微生物谱。同时根据保守区序列设计特异性引物,构建多重PCR检测反应体系。收集脓毒症患者静脉全血样本79例,健康体检者样本（阴性样本）40例,用所建立的检测体系进行鉴定,并与血培养方法比较。结果 多重PCR法缩短检出时间至3 h,是血培养法的1/16。多重PCR法对目标病原菌样本符合率为88%（22/25）,阴性样本符合率为100%（20/20）,总符合率为94%,2种方法对目标病原菌的检出差异无统计学意义（P=0.250）,且一致性良好（Kappa=0.867,P<0.05）。多重PCR法与血培养法对临床诊断脓毒症样本的检出率分别为23.0%（17/74）及14.9%（11/74）,2种方法间检出率差异有统计学意义（P=0.031）。结论 与经典的“金标准”血培养法相比,本项目构建的多重PCR法检测时间短、符合率好、检出率更高,可为脓毒症患者更早诊断和治疗提供可靠依据。     

荧光定量PCR对NO期结直肠癌淋巴结微转移的检测及其临床意义

目的 探讨NO期大肠癌淋巴结微转移的检测及其临床意义.方法 采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测45例行根治术的NO期大肠癌患者的453枚淋巴结中细胞角蛋白20(cytokeratin,CK20)mRNA的表达以检出微转移.结果 45例NO期大肠癌病人的453枚淋巴结中,有20例(44.4%)共46枚(10.2%)淋巴结检出微转移.微转移与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度等无关,但与肿瘤浸润深度相关(X2=5.445,P＜0.05).20例微转移患者与25例无微转移患者平均随访时间分别为19.6和21.4月.20例微转移患者中7例发生复发转移,5例死亡;而无微转移25例中仅1例因复发转移而死亡(X2=7.305,P＜0.05).有微转移组和无微转移组的生存率分别是75.0%(15/20)和96.0%(24/25),两组患者之间差异有统计学意义(X2=4.240,P＜0.05).结论 CK20 mRNA的FQPCR是检测NO期大肠癌淋巴结微转移灵敏而特异的方法,可对精确临床分期、判断患者预后及制定合理的治疗方案提供一定的理论依据.     

活动脚趾能健胃

中医认为，人体的五脏六腑在脚上都有相对应的穴位。第二和第三个脚趾与肠胃有关，因此，经常活动脚趾可以达到健胃的目的。活动脚趾的方法非常简单，最常见又有效的有以下几种：     

荧光定量PCR检测pNo期结直肠癌淋巴结中CK20mRNA的表达及其临床意义

目的 探讨N0期大肠癌淋巴结微转移的检测及其临床意义.方法 采用荧光定量PCR方法 检测62例行根治术的N0期大肠癌患者的548枚淋巴结中细胞角蛋白20(cytokeratin,CK20)mRNA的表达.结果 本组62例N0期大肠癌患者的548枚淋巴结中,有24例(39%)共55枚(10.0%)淋巴结中检出微转移.其中第Ⅰ、第Ⅱ、第Ⅲ组淋巴结微转移率分别是15.8%、5.0%和3.3%.微转移与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位和分化程度等尤关,但与肿瘤浸润深度相关(x2=5.462,P<0.05).结论 检测N0期大肠癌淋巴结中CK20mRNA的表达可对精确临床分期、了解淋巴结微转移分布及制定合理的治疗方案提供一定的理论依据.     

生活饮用水中三氯甲烷、四氯化碳含量测定改良法

目的:本文探讨和改进了生活饮用水中三氯甲烷、四氯化碳毛细管柱顶空气相色谱同时测定的方法.方法: 饮用水直接取样,加适量氯化钠溶解混匀于顶空瓶,于炉温60℃平衡15 min,充分有效挥发出水中三氯甲烷、四氯化碳组分进入顶空瓶空气层,经HP-5石英毛细管柱(30 m×0. 32 mm,0. 25 μm)分离,柱温为50 ℃,柱流速为1. 0 mL/min,进样口温度为190 ℃,分流比为3∶1,电子捕获检测器(ECD,230 ℃)检测.结果: 三氯甲烷、四氯化碳的浓度在0. 1~10 μg/L时,线性关系良好,r＞0. 999.方法的检出限为0. 001~0. 012 μg/L;方法的平均回收率为96. 5% ~106. 2% ,日内RSD为3. 0% ~5. 1% (n=7).结论: 该方法简便、快捷,灵敏度和准确度均较高,重现性好,适用于生活饮用水中三氯甲烷、四氯化碳的同时测定.     

残角子宫妊娠破裂1例报告

病例报告女,23岁。因停经3~+月,突然下腹剧痛约1小时,于1986年12月10日下午急诊入院。患者平素身体健康,孕2,产1。末次月经1986年8月22日,停经后无恶心、呕吐等反应。1986年12     

荧光定量PCR对N0期结直肠癌淋巴结微转移的检测及其临床意义

目的探讨N0期大肠癌淋巴结微转移的检测及其临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测45例行根治术的N0期大肠癌患者的453枚淋巴结中细胞角蛋白20(cytokeratin,CK20)mRNA的表达以检出微转移。结果45例N0期大肠癌病人的453枚淋巴结中,有20例(44.4%)共46枚(10.2%)淋巴结检出微转移。微转移与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度等无关,但与肿瘤浸润深度相关(χ2=5.445,P<0.05)。20例微转移患者与25例无微转移患者平均随访时间分别为19.6和21.4月。20例微转移患者中7例发生复发转移,5例死亡;而无微转移25例中仅1例因复发转移而死亡(χ2=7.305,P<0.05)。有微转移组和无微转移组的生存率分别是75.0%(15/20)和96.0%(24/25),两组患者之间差异有统计学意义(χ2=4.240,P<0.05)。结论CK20mRNA的FQ-PCR是检测N0期大肠癌淋巴结微转移灵敏而特异的方法,可对精确临床分期、判断患者预后及制定合理的治疗方案提供一定的理论依据。