小鼠持续性脑缺血后NMDA受体亚单位表达的变化

目的：研究小鼠持续性脑缺血后不同脑区NMDA受体亚单位表达的变化及其与病理损伤之间的联系。方法：采用大脑中动脉阻断法制作小鼠持续性脑缺血模型，取缺血后不同时间的皮层、海马、皮层下脑组织，用免疫印迹技术测定NMDA受体亚单位ζ1和ε1及ε2蛋白的含量。同时作冰冻切片和苏木素伊红染色，计算相应脑区神经元密度。结果：NMDA受体ζ1和ε1及ε2亚单位表达的改变发生于缺血后5h内，皮层下3个亚单位表达均明显增加，海马则各亚单位表达变化不一。脑梗塞灶和相关脑区神经元密度显著减小均出现于缺血后5h，相关脑区神经元死亡严重程度依次为皮层下组织和海马CA1区及大脑颞叶皮层Ⅲ－Ⅳ层。结论：小鼠持续性脑缺血，缺血侧脑组织NMDA受体亚单位ζ1和ε1及ε2表达的变化发生在明显的病理损害之前，表达变化程度因脑区不同，与相关脑区神经元损害的程度相应。     

金丝桃提取物对应激动物模型的抗抑郁作用及其机理研究

[目的]探讨金丝桃提取物(EHP)的抗抑郁作用及其作用机制。[方法]选取了小鼠强迫游泳应激实验;小鼠尾悬吊应激实验;大鼠慢性应激抑郁模型脑内单胺类神经递质测定实验,研究EHP抗抑郁作用及其作用机制。[结果]EHP(320mg/kg、160mg/kg)能显著缩短强迫游泳小鼠及尾悬吊小鼠的不动时间(P<0.05);EHP(320mg/kg、160mg/kg)能显著提高慢性应激抑郁模型大鼠大脑内单胺类神经递质及其代谢物的含量(P<0.05).结论金丝桃提取物具有一定的抗抑郁作用,其抗抑郁作用可能与增加脑内单胺类神经递质的含量有关。     

西洛他唑对脑缺血后神经元损伤的保护作用

目的：观察西洛他唑对小鼠持续性局灶性脑缺血后神经元损伤的剂量依赖性保护作用。方法：以大脑中动脉阻塞诱导小鼠持续性局灶性脑缺血。缺血前30min腹腔注射西洛他唑（3～30mg/kg）和普鲁司特（0.1mg/kg）。观察药物对缺血后神经元形态、密度的影响。结果：脑缺血损伤后,神经元密度降低,变性神经元密度增加。西洛他唑（3～10mg/kg）和普鲁司特能明显增加缺血侧存活神经元密度,减少变性神经元密度。结论：西洛他唑对小鼠持续性局灶性脑缺血后神经元损伤有保护作用。     

5-脂氧酶/半胱氨酰白三烯途径不参与大鼠C6胶质瘤细胞缺氧缺糖损伤

目的:观察缺氧缺糖(OGD)是否损伤大鼠C6胶质瘤细 胞,以及5-脂氧酶(5-LOX)/半胱氨酰白三烯(CysLT)途经是否参与OGD损伤. 方法:在OGD处理并恢复不同时间后,观察C6细胞活性变化,以及5-LOX抑制剂和Cy sLT受体拮抗剂的影响;以免疫细胞化学法观察5-LOX蛋白的细胞内分布;以RT-PCR法检测 CysLT1和CysLT2受体mRNA表达;并观察白三烯D4(LTD4)对C6细胞的作用.结果:OGD 4～8 h并恢复24～72 h后,可诱导C6细胞损伤;5-LOX 抑制剂和CysLT受体拮抗剂对OGD损伤无明显作用.OGD未诱导5-LOX的核膜移位.C6细胞高 表达CysLT2受体,但CysLT1受体表达很微弱,OGD不影响它们的表达.此外,L TD4对C6细胞没有明显作用.结论:OGD可诱导C6细胞损伤,但5-LOX /CysLT途径不参与OGD诱导的损伤.     

镇静小鼠的非侵入式气道反应性测定法及药物作用

目的：建立并验证镇静小鼠气道反应笥的非侵入式测定法,探讨小鼠气道高反应性与气道炎症的关系。方法：观察致敏及药物对小鼠引喘阈浓度的影响,及支气管－肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中白细胞渗出量的变化。结果：与未致敏小鼠相比,致敏小鼠吸入ＯＡ６ｈ的ＭＣｈ引喘阈逍度显著降低,ＢＡＬＦ中细胞渗出量显著增高,地塞米松（７．５ｍｇ／ｋｇ）和氨茶碱（３７．５ｍｇ／ｋｇ）可降低致敏小鼠吸入ＯＡ引起的气道反应性增高和ＢＡＬＦ     

半胱氨酰白三烯受体2通过介导小胶质细胞激活诱导缺血性神经元损伤

目的探索半胱氨酰白三烯(CysLT)受体在大鼠皮层神经元缺氧缺糖损伤中的调节作用及作用机制。方法培养大鼠原代皮层神经元或大鼠原代皮层混合培养细胞,以缺糖缺氧(OGD)模拟脑缺血损伤,以MTT还原法/LDH释放检测确定神经元存活/损伤,以免疫组化做神经元(抗MAP2)、星形胶质细胞(抗GFAP)、小胶质细胞(抗Iba1)特异性染色,观察各细胞数量变化,以PI/Hoechst染色确定细胞凋亡/坏死。以受体激动剂LTD4,NMLTC4,CysLT1拮抗剂孟鲁司特、CysLT2拮抗剂HAMI3379/CysLT1-siRNA及CysLT2-shRNA为药理学干预/基因干扰工具。结果 LTD4(0.1～1000 nmol·L-1),NMLTC4(0.1～1000 nnmol·L-1)不能诱导单纯神经元损伤;CysLT1-siRNA及CysLT2-shRNA不能减轻OGD诱导的神经元损伤;LTD4(1～1000 nnmol·L-1),NMLTC4(0.1～1000 nnmol·L-1)能诱导皮层混合细胞损伤;HAMI3379(0.001～1μmol·L-1)和CysLT2-shRNA能减轻OGD,LTD4或NMLTC4诱导的皮层混合细胞损伤及其诱导的小胶质细胞激活,CysLT1-siRNA无此作用。结论 CysLT2受体可能参与OGD诱导神经元损伤的调节,CysLT2拮抗剂可通过减轻小胶质细胞激活而减轻OGD诱导的神经元损伤。     

半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂孟鲁司特对缺血性损伤后神经元形态的作用

目的:观察半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂孟鲁司特对原代神经元缺血性损伤后形态变化的作用。方法:在不同浓度孟鲁司特存在条件下,以缺氧缺糖(OGD)2 h和再灌(R)24 h(OGD/R)诱导大鼠原代神经元及皮层混合培养细胞的神经元损伤;以免疫染色法检测神经元数量、胞体大小、胞体总神经突起数量、一级神经突起数量、长度及其分支数量等指标,观察神经元形态的变化。结果:OGD/R可明显减少神经元的数量,显著改变神经元的形态。而孟鲁司特(0.0001～1μmol/L)能减轻单独神经元培养中OGD/R诱导的神经元数量减少,抑制一级神经突起分支数量增加;在混合培养中,孟鲁司特(0.0001～0.1μmol/L)增加OGD/R后一级神经突的长度,减少神经突起数量以及一级神经突起分支数量。结论:半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂孟鲁司特对大鼠原代神经元缺血性损伤有保护作用。     

益阴益气活血冲剂对大鼠大脑中动脉局灶性缺血的治疗作用

用线栓法造成大鼠大脑中动脉局灶性缺血模型，在麻醉前及缺血30min再灌注6h后分别给以养阴活血冲剂口服，能减轻神经功能缺失症状，减少缺血发生率、减少缺血体积、保护神经元免于死亡，表明养阴益气活血冲剂对脑缺血有保护作用。     

速激肽受体拮抗剂对豚鼠离体气道平滑肌的作用

速激肽NK－2受体拮抗剂SR－48968（1μmol／L）能抑制抗原（OA，10mg／L）诱导的气管和支气管平滑肌收缩；NK－1受体拮抗剂CP－96345（1μmol／L）仅抑制支气管的收缩．两药均抑制辣椒素和P物质引起的支气管平滑肌收缩，对组胺和氨甲酸胆碱引起气管、支气管收缩作用无明显影响．结果证明速激肽参与抗原诱导的气道平滑肌收缩，速激肽受体拮抗剂具有抗过敏性哮喘的作用．     

速激肽受体拮抗剂对豚鼠组胺反应的影响

目的：探讨速激肽与组胺（Ｈｉｓ）反应的关系。方法：观察速激肽受体拮抗剂对豚鼠Ｈｉｓ的整体和离体的呼吸道和心血管效应。结果：单用或合用速激肽ＮＫ－１受体拮抗剂ＣＰ－９６３４５（１ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｐ）及ＮＫ－２受体拮抗剂ＳＲ－４８９６８（１ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｐ）均可显著降低清醒豚鼠吸入Ｈｉｓ气雾的气道反应性。ＣＰ－９６３４５（１ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｖ）可显著降低静脉注射Ｈｉｓ引起麻醉豚鼠支气管和心房的伊文思蓝渗出，ＳＲ－４８９６８（１ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｖ）则对肺内压升高有较弱的抑制作用，两药对平均动脉压降低无明显作用。在豚鼠的离体气管和支气管平滑肌标本，ＣＰ－９６３４５（１μｍｏｌ·Ｌ－１）及ＳＲ－４８９６８（１μｍｏｌ·Ｌ－１）对Ｈｉｓ的Ｅｍａｘ及ｐＤ２无明显作用。结论：速激肽部分参与了豚鼠的Ｈｉｓ炎症反应，速激肽受体拮抗剂有抗炎作用。