免疫组化和组织化学双重染色技术在组织芯片上的应用

组织芯片是从组织块中挑选典型部位的组织以获得数百个圆柱状的样本，并按次序排列在一个新的石蜡块上，制作成HE切片，然后按研究的需要进行免疫组化及原位杂交等研究。组织芯片技术最重要的特点是：一次可以同时对多个组织块检测研究而对原来的组织材料破坏很小。此外，利用组织芯片仪还可以进行组织切片的精确定位和多种类型的分子生物学分析。     

乳腺癌中树突状细胞的浸润及其与临床病理特点的关系

目的通过检测乳腺癌中树突状细胞(dendritic ce lls,DC)和T细胞的分布状况和浸润密度,分析其与临床病理资料的关系,探讨DC在乳腺癌局部免疫中的作用。方法应用免疫组化方法检测67例乳腺癌中S100 DC、HLA-DR DC、CD 1a DC(DC三参数)、CD 45RO T细胞的浸润密度和c-erbB-2表达情况。结果S100 DC和HLA-DR DC浸润密度在癌巢内均显著低于癌巢周围(P值均<0.001),而CD 1a DC浸润密度在癌巢内显著高于癌巢周围(P=0.001);S100 DC、CD 1a DC和CD 45RO T细胞浸润密度在低分化病例均显著高于高、中分化病例(P值均<0.05);S100 DC浸润密度与组织学分级呈明显正相关(rs=0.286,P=0.042);CD 1a DC阳性表达率在肿瘤≤2 cm的病例显著高于肿瘤>2 cm的病例(P<0.05);DC三参数及CD 45RO T细胞阳性表达率和浸润密度与有无腋淋巴结转移、临床分期及c-erbB-2表达情况均无关。结论DC三参数在乳腺癌中分布部位不同,可标记不同成熟状态的DC,综合检测DC三参数可更全面地反映乳腺癌局部免疫状态。     

“医院-社区-家庭”三维信息化管理方案在社区高血压随访中的应用

目的探究"医院-社区-家庭"三维信息化管理方案在社区高血压随访中的应用效果。方法回顾性分析2016年1月—2017年6月上海市闵行区吴泾社区卫生服务中心140例原发性高血压患者的诊疗情况。按照管理的方式,分为观察组和对照组。对照组患者按照常规模式进行社区高血压防治管理,观察组患者则按照"医院-社区-家庭"三维信息化管理方案进行高血压防治管理。对两组患者的血压控制情况、生活质量水平以及各项遵医行为执行情况进行统计分析。结果实施管理6个月后,观察组患者的SBP、DBP水平均明显低于对照组,各项SF-36评分均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。观察组患者各项遵医行为执行率也均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 "医院-社区-家庭"三维信息化管理方案能够显著提升社区高血压患者的自我管理能力,使患者养成良好的生活习惯,值得在社区高血压的防治中推广应用。     

德尔菲法在助理全科医师岗位胜任力指标体系构建中的应用*

目的采用德尔菲法构建助理全科医师岗位胜任力指标体系。方法综合运用文献查阅、调研访谈等方法设计助理全科医师岗位胜任力指标库,对24位专家进行两轮德尔菲专家咨询,根据结果对52个指标进行筛选并计算各级指标权重。结果两轮问卷有效回收率分别为100%和92%,专家权威系数为0.87。专家协调系数为0.385(P0.001),最终构建的助理全科医师岗位胜任力评价指标体系包含一级指标3个、二级指标10个和三级指标28个,一级指标的权重分别为0.354、0.333和0.313。结论本研究的专家权威系数高,一致性强,构建的指标体系可为评价助理全科医师岗位胜任力提供一定的科学依据。     

基于双因素理论的乡村医生工作满意度研究——以山东省为例

目的研究山东省乡村医生的工作满意度,分析其影响因素,并提出对策及建议,促进乡村医生队伍的可持续发展。方法运用多阶段分层随机抽样的方法,在山东省烟台市、潍坊市和聊城市随机抽取368名乡村医生开展问卷调查。采用自制的满意度问卷调查乡村医生的满意度状况;应用赫兹伯格"双因素理论",通过Logistic回归分析,探讨影响乡村医生工作满意度的因素。结果调查完成有效问卷335份,有效率为91.0%。完成调查的乡村医生中,总体的工作满意率仅为15.5%。Logistic回归分析结果显示,影响工作满意度的激励因素为收入满意度、养老政策满意度。保健因素为收入满意度、是否参加培训和工作年限。结论山东省乡村医生工作满意度低。建议应重点完善乡村医生的养老保障制度,加强乡村医生培训,并合理地提高乡村医生的收入,以保证乡村医生队伍的可持续发展。     

Caspase 8和9在肿瘤局部微环境形成早期与调控蛋白Twist1的关联性

目的:研究Caspase 8、9在肿瘤局部微环境早期线形程序性坏死(LPPCN)及血管生成拟态(VM)形成中对上皮-间充质转变(EMT)调控蛋白Twist1表达的影响。方法:将96只C57BL小鼠随机分为Caspase 8抑制剂组、Caspase 9抑制剂组、Caspase 8、9抑制剂联合用药组(联合组)和对照组,制备小鼠荷瘤模型。采用免疫组织化学法检测EMT调控蛋白Twist1在LPPCN和VM周围第1~4层肿瘤细胞的表达水平。结果:4组LPPCN周围第1~4层肿瘤细胞Twist1核阳性染色指数差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且呈递减趋势;对于同层肿瘤细胞,联合组和对照组的细胞核Twist1阳性染色指数比较差别有统计学意义(均P<0.01)。LPPCN、VM周围第1~4层肿瘤细胞、同一层不同组的肿瘤细胞浆Twist1阳性染色指数差异均无统计学意义(均P>0.05);VM周围第1~4层肿瘤细胞、同一层不同组的肿瘤细胞核Twist1阳性染色指数差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:Caspase 8、9介导的凋亡机制启动与EMT发生存在关联性。     

应用小干扰RNA下调CXCR4抑制乳腺癌增殖及迁移

目的:验证CXCR4对乳腺癌细胞增殖及迁移功能的影响.方法:以Western-blot筛选出高表达CXCR4的乳腺癌细胞系MDA-MB-231作为研究对象,将合成的CXCR4-siRNA序列转染至细胞内,下调CXCR4表达,通过Western-blot验证干扰效果,利用细胞增殖实验和划痕实验检测下调组与阴性对照组细胞的增殖及迁移功能.结果:MDA-MB-231细胞表达CXCR4水平较高,小干扰RNA下调CXCR4基因表达效果好,同时下调的CXCR4基因表达的细胞增殖能力低于阴性对照组(P＜0.01),且迁移能力有所下降.结论:下调CXCR4对乳腺癌转移及增殖有一定程度的抑制作用.     

数字切片库结合网络在病理学实验教学中的应用

传统病理学实验教学依赖显微镜对病理学组织切片进行观察,这种教学模式所固有的缺点影响了教学效果和学生学习的主动性与创造性.病理学实验教学数字切片库结合网络教学的新型病理学实验教学模式打破了传统病理学组织切片教学所存在的时空限制,给传统病理学实验教学带来全新模式的变革,并对病理学实验考试产生了积极的影响,而且这种全新的教学模式对形成以学生为学习主体、开展自主性学习和创造性学习具有重要作用,对培养医学生的创新能力具有重要意义.     

急性炎症对黑色素瘤血管生成的影响作用研究

目的：研究急性炎症对黑色素瘤血管生成的影响。方法：C57BL小鼠,构建B16F10小鼠黑色素瘤动物模型,待肿瘤生长至0．8cm×0．8cm×0．8cm时构建伤口模型,分为单纯肿瘤组、同侧伤口＋肿瘤组（局部组）和对侧伤口＋肿瘤组（全身组）,比较肿瘤微血管密度（MVD）,免疫组织化学染色检测肿瘤组织VEGF的表达。结果：局部组和全身组肿瘤微血管密度明显低于对照组,结果具有统计学意义（P〈0．05）;VEGF阳性表达率在局部组和全身组均低于对照组（P〈0．05）。结论：急性炎症可影响肿瘤组织VEGF的表达,明显抑制黑色素瘤血管生成。     

急性炎症对黑色素瘤基质金属蛋白酶影响的研究

目的:研究急性炎症对黑色素瘤生长及肿瘤基质金属蛋白酶(MMP)-9和MMP-2的表达水平的影响.方法:采用C57BL小鼠,构建B16小鼠黑色素瘤动物模型,待肿瘤生长至0.5 cm2时构建伤口模型,分为单纯肿瘤组(对照组)和伤口+肿瘤组(实验组),比较肿瘤体积大小,免疫组织化学染色检测肿瘤组织MMP-2和MMP-9的表达,明胶酶谱法分析MMP-2和MMP-9活性.结果:(1)实验组肿瘤体积在5 d和7 d时明显小于对照组(P<0.05或P<0.01).(2)在造模后7 d实验组MMP-2的细胞阳性表达率低于对照组(P<0.01),11 d时2组比较差异无统计学意义(P>0.05);7 d和11 d实验组MMP-9阳性表达率均低于对照组(P<0.01).实验组MMP-2和MMP-9酶活性在7 d时低于对照组(P<0.01),11 d时2组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:急性炎症早期可影响肿瘤组织MMPs的表达,明显抑制黑色素瘤生长;而急性炎症晚期则对黑色素瘤生长和MMPs失去抑制作用.