补肾阴对胚胎干细胞关键基因功能的影响

1材料 1．1细胞株与试剂 小鼠胚胎干细胞CRL-1825细胞：购自ATCC（American Type Culture Collection）；α-MEM培养基：Hyclone公司产品；DeadEnd^TM Fluorometric TUNEL System：Promega公司产品；Wnt-1（H-89）单抗、Oct-3／4（C-10）单抗、p16（50．1）单抗为Santa Cruz公司产品；Lipofetamine^TM2000：Invitrogene公司产品；DNA合成有关试剂;上海生工生物工程技术服务有限公司；siRNA Oligo合成;上海吉玛制药技术有限公司，其余为国产试剂。     

补肾阴对胚胎干细胞活动的影响

目的观察补肾阴中药复方对胚胎干细胞活动的影响。方法选用胚胎干细胞模型CRL-1825细胞株,加入补肾阴中药复方大鼠含药血清,观察补肾阴中药对干细胞分化、凋亡、细胞周期及其关键基因表达的影响。结果补肾阴中药复方含药血清可以抑制干细胞的分化和凋亡,促进干细胞增殖以及细胞周期的进程,促进干细胞Wnt、Oct4等基因的表达,下调P16INK4a基因的表达。结论补肾阴中药复方可以促进干细胞增殖、维持其不分化状态。     

连翘中连翘酯苷的大孔树脂纯化工艺

目的:优选连翘叶中连翘酯苷的最佳大孔树脂纯化工艺。方法:比较不同型号的大孔树脂和不同工艺条件对连翘酯苷的分离纯化能力。结果:确定AB-8树脂为连翘酯苷的纯化材料,其最佳工艺条件为药液质量浓度2.0 g.mL-1、吸附流速0.25 BV.h-1、洗脱流速3.0 BV.h-1。结论:工艺条件可以为连翘酯苷的制备提供理论依据。     

基于SPA-PLS的秦皮提取液中秦皮甲素的快速测定

目的探讨连续投影算法(SPA)结合偏最小二乘法(PLS)用于快速测定秦皮提取液中秦皮甲素的可行性。方法以HPLC分析值作为参照,采集不同产地的秦皮提取液的紫外光谱,运用SPA算法筛选样本的紫外特征波长,PLS算法建立快速测定秦皮甲素的数学模型。结果应用SPA算法筛选,只用了全部变量的16.21%(65个变量)建立模型,所建模型的预测集相关系数(RP)及预测均方根(RMSEP)分别为0.969 0、0.067 0。结论 SPA算法可以在不降低模型性能的前提下显著降低模型的复杂度,结合PLS算法建立的模型可以用于快速测定秦皮提取液中秦皮甲素。     

藤梨根对RKO结肠癌细胞失巢凋亡的作用

目的:观察藤梨根对人结肠癌RKO细胞悬浮生长及失巢凋亡作用.方法:200～800 mg·L-1藤梨根作用于RKO细胞,CCK-8(CCK-8)法检测藤梨根对RKO细胞悬浮生长作用,双嵌入剂乙锭均二聚物(EthD-1)染色检测失巢凋亡,比色法检测半胱天冬酶-3(caspase-3)活性,2-7-二氯氢化荧光素乙二脂染色法结合荧光酶标仪检测细胞内活性氧的产生.结果:200 ～800 mg·L-1藤梨根可显著抑制RKO悬浮生长,呈剂量依赖性(P＜0.01).200 ～800 mg·L-1藤梨根作用后悬浮生长RKO细胞吸收EthD-1散发红色荧光,部分细胞可见核碎裂,呈现凋亡形态改变;藤梨根组EthD-1荧光吸光度与对照组比较差异显著(P＜0.01).终质量浓度200 ～800 mg·L-1藤梨根可显著增强RKO细胞caspase-3活性以及细胞内活性氧的产生(P＜0.01).结论:藤梨根可抑制RKO细胞悬浮生长,促使RKO细胞发生失巢凋亡,可能与活化caspase-3以及升高细胞内活性氧水平相关.     

镇惊泻火颗粒的制备工艺研究

摘 要 目的： 研究镇惊泻火颗粒的制备工艺。方法: 采用正交试验,以干浸膏得率、甘草苷和丹酚酸B的含量为指标,对镇惊泻火颗粒的提取、纯化工艺进行研究;以合格颗粒得率为指标,对颗粒的成型工艺进行研究,优选制剂的制备工艺。结果: 铁落先煎60 min,其余各药加8倍量水,浸泡90 min,加入先煎铁落液,煎煮提取90 min,共3次。合并浓缩至相对密度1.3左右（60℃热测）,加蒸馏水至稀释比为1:2（V/V）,加乙醇至含醇量50%,24 h后滤过。滤液回收乙醇后浓缩至相对密度1.3 （60℃热测）,60℃下干燥粉碎得干浸膏。以淀粉作稀释剂,干浸膏与辅料比例1：0.8,90%乙醇为润湿剂制软材,过20目筛制粒,60℃干燥3 h,烘干,整粒,即得。结论:优选的镇惊泻火颗粒制备工艺稳定可行。     

基于最小二乘支持向量机的秦皮提取工艺的研究

目的：应用最小二乘支持向量机（LS-SVM）技术优化秦皮的提取工艺。方法：以秦皮甲素和秦皮乙素为指标,采用均匀设计安排提取试验,并用最小二乘支持向量机建立关系模型。结果：最小二乘支持向量机对秦皮甲素和秦皮乙素的拟和相关系数分别为0．9997与0．9999;得到的最优工艺条件为提取温度100℃、乙醇浓度50％、液固比11、提取时间70min,机器模型在此条件下的预测值为秦皮甲素提取量为9．291mg·g^-1,秦皮乙素提取量为2．241mg·g^-1,和实际测量值的相对误差仅为-2．97％和2．66％,具有较好的预测性。结论：最小二乘支持向量机可用优化秦皮提取工艺。     

双黄升白颗粒絮凝沉淀与醇沉工艺的比较研究

目的比较双黄升白颗粒絮凝沉淀与醇沉工艺的优劣,为双黄升白颗粒的生产提供一定的依据。方法采用高效液相法与紫外吸收光谱法测定提取液中黄芪总苷、淫羊藿苷含量,通过计算转移率和得膏率,比较两种澄清工艺。结果和结论通过比较得出,两种工艺虽然在有效成分的保留上基本无显著性差异,但絮凝沉淀法在成本、工艺周期等方面具有明显优势。     

熟地黄对D-半乳糖衰老模型大鼠脑细胞周期蛋白表达的影响

目的：从脑细胞周期的角度揭示熟地黄防治脑衰老的作用机制。方法：36只SD大鼠随机分为正常组、模型组、天保宁组和熟地黄组，采用D-半乳糖造模同时服用相应药物45d。在检测大鼠行为学、脑组织生化指标、细胞衰老特异代谢产物SA-β-gal阳性表达细胞数的基础上，采用流式细胞术检测细胞周期、免疫组化法检测海马CA1区P53，P21，P16的表达。结果：熟地黄能一定程度促进细胞周期从G0／G1期向S期进展，抑制海马CA1区CDK抑制基因蛋白P53，P21，P16的表达。结论：熟地黄能调控细胞周期相关基因P53，P21，P16表达。