“肝门优先”的肝门部胆管癌手术入路策略

正肝门部胆管癌占胆管癌总体发病率的60%～70%~([1]),早期诊断难、5年存活率低~([1-3]),根治性切除是目前惟一可能治愈手段~([3-5])。2000-2016年,笔者团队在海军军医大学东方肝胆外科医院完成肝门部胆管癌手术治疗共720例,其中完成根治性手术528例,并构建了其Nomogram预后生存预测模型~([3])。为求肿瘤根治性切除,笔者认为Bismuth-CorletteⅡ型以上肝门部胆管癌应遵循以下几个手术原则:     

小鼠抵抗素基因及其反义核酸真核表达体系的构建与鉴定

目的构建载有小鼠抵抗素(resistin)基因及其反义核酸的重组真核表达质粒,为下一步进行resistin生物功能研究打基础。方法用resistin基因mRNA编码区序列特异引物,从小鼠脂肪组织中,通过RT-PCR的方法合成resistin cDNA,T4DNA连接酶将resistin cDNA克隆于pGEM-T载体,经双酶切及测序鉴定克隆成功后再亚克隆于pcDNA3.1(+)或pcDNA3.1(-)真核表达载体,并测序鉴定。结果PCR产物长度与resistin cDNA理论长度363bp相符;重组pGEM-T被EcoRⅠ和XbaⅠ内切酶切为约3000bp和355bp两个片段,测序结果表明插入pGEM-T的DNA片段的核苷酸序列与小鼠resistin基因mRNA编码区序列完全一致。重组pcDNA3.1(+)和pcDNA3.1(-)测序结果表明插入的DNA片段分别与小鼠resistin基因mRNA编码区序列和反义resistin基因mRNA编码区核苷酸序列一致。结论成功克隆载有resistin基因和载有resistin基因反义核酸的重组真核表达质粒。     

Graves病与低钾性周期性麻痹和胸腺增生的关系

目的 观察Graves病与低钾性周期性麻痹和胸腺增生的关系.方法 收集2010年1月至2011年1月临床确诊的Graves病患者62例分为两组：Graves病不伴胸腺增生组33例;Graves病伴胸腺增生组29例,同期门诊体检健康人为正常对照组30名.结果 Graves病伴胸腺增生组与不伴胸腺增生组相比,在性别、年龄、病程、是否伴有甲状腺肿大、突眼、周期性麻痹及血清游离三碘甲状腺原氨酸、血清游离甲状腺素、促甲状腺素方面,差异均无统计学意义（P均＞0.05）,正常对照组均无胸腺增生;男性Graves病伴胸腺增生患者周期性麻痹发生率62％ （8/13）,明显高于女性6％ （1/16）,差异有统计学意义（x2=10.24,P＜0.05）;男性Graves病患者周期性麻痹发生率62％（16/26）,明显高于女性6％（2/36）,差异有统计学意义（x2=22.96,P＜0.05）;Graves病患者是否伴胸腺增生与性别、年龄、病程、是否伴有甲状腺肿大、突眼、周期性麻痹及游离三碘甲状腺原氨酸、血清游离甲状腺素、促甲状腺激素无相关性（P均＞0.05）.结论 男性Graves病伴胸腺增生患者周期性麻痹发生率高于女性,在临床工作中应予鉴别,以免漏诊误诊.     

氟伐他汀对内脏脂肪素诱导的内皮细胞MMP-1、TIMP-1和ICAM-1表达的影响

目的观察氟伐他汀对内脏脂肪素诱导的人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶1、组织型金属蛋白酶抑制剂1、细胞间黏附分子1表达的影响,探讨他汀类药物降脂外抗动脉粥样硬化的作用机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,以不同浓度氟伐他汀和内脏脂肪素共同孵育24 h,用逆转录聚合酶链反应法检测基质金属蛋白酶1、组织型金属蛋白酶抑制剂1和细胞间黏附分子1的表达。结果与正常对照组比较,内脏脂肪素组基质金属蛋白酶1和细胞间黏附分子1的表达显著升高,组织型金属蛋白酶抑制剂1的表达量下降。氟伐他汀干预后,基质金属蛋白酶1和细胞间黏附分子1的表达较内脏脂肪素组显著降低,组织型金属蛋白酶抑制剂1的表达增加。结论氟伐他汀可能通过抑制内脏脂肪素的活性,影响血管内皮细胞基质金属蛋白酶1、组织型金属蛋白酶抑制剂1和细胞间黏附分子1的表达,由此稳定血管内皮环境,抑制内皮细胞炎症反应,起到抗动脉粥样硬化的作用。     

胰腺导管上皮细胞来源的胰岛样细胞移植治疗1型糖尿病

目的 观察小鼠胰腺导管上皮细胞向胰岛样细胞转分化及其在治疗糖尿病小鼠中的作用.方法 分离培养昆明小鼠胰腺导管上皮细胞,经体外扩增及诱导培养后,进行体外和体内功能评价.结果 小鼠胰腺导管上皮细胞经体外扩增和诱导分化后,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)显示培养1周和2周后胰岛素mRNA的IA值为(1.892±0.119比3.135±0.092,P＜0.05),胰高血糖素为(1.564±0.087比2.271±0.042,P＜0.05),表达明显上调;胰岛样细胞对高糖刺激(15.0 mmol/L)的胰岛素释放较低糖(5.6 mmol/L)时增加了1.7倍[(52.3±10.5)mmol/L比(30.2±9.7)mmol/L,P＜0.05];DTZ染色阳性;将其移植入糖尿病小鼠体内后,移植组小鼠较对照组血糖下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 昆明小鼠胰腺导管上皮细胞在体外培养条件可转分化胰岛素分泌细胞,该细胞团可在体内环境下发挥生物学功能.

Abstract：

Objective To investigate the differentiation of stem cells deived from mouse pancreatic ductal epithelial cells toward insulin secreting cells and the potential application for diabetes therapy.Methods Pancreatic ductal epithelial cells were separated and differentiated into islet-like cells. Study was performed to determine whether these islet-like clusters could secrete insulin in response to glucose both in vivo and in vitro. Results Pancreatic ductal epithelial cells were separated and cultured in vitro.The expression of insulin mRNA in the stem cells was significantly up-regulated ( 1. 892 ±0. 119 vs 3. 135± 0. 092,P ＜ 0. 05 ), and also in glucagon ( 1. 564 ± 0. 087 vs 2. 271 ± 0. 042, P ＜ 0. 05 ). Immunofluoresence staining indicated that there were a lot of insulin positive cells. Insulin released from cells in response to glucose stimulation in vitro was increased [ ( 52. 3 ± 10. 5 ) mmol/L vs ( 30. 2± 9. 7 ) mmol/L, P ＜0. 05 ]. Hyperglycemia in diabetic animals was alleviated after cell transplantation. Conclusion Islet-like cell clusters generated in vitro from Kunming mice pancreatic ductal epithelial cells could secrete insulin and have some effects on reversing the diabetes in diabetic mice.     

SALL4及其在非生殖细胞恶性肿瘤中的临床应用价值

婆罗双树样基因4 (SALL4)在胚胎干细胞和肿瘤细胞的增殖、多能性维持方面发挥着重要作用.在完全分化的细胞中,SALL4基因的表达被沉默或者下调,而在多种非生殖细胞恶性肿瘤中SALL4基因被再次激活,表达上调,并且SALL4的表达水平常常与疾病的进程、治疗效果及预后相关.因此,SALL4的检测对于非生殖细胞恶性肿瘤的诊断以及病情监测具有重要意义.     

分化型甲状腺癌患者术后放射性131I治疗效果的影响因素分析

目的 探讨分化型甲状腺癌(DTC)患者术后放射性131I治疗效果的影响因素.方法 选取115例手术后首次行131I治疗的DTC患者作为研究对象,根据治疗后131I全身显影结果将其分为清甲成功组与清甲未成功组,前者完全清除残余甲状腺组织,后者未完全清除残余甲状腺组织.影响因素分析先采用x2检验进行单因素分析,然后选择有统计学意义的指标进行非条件logistic回归分析.结果 115例DTC患者,其中51例患者在术后经首次131I治疗即成功清除残余甲状腺组织,治疗成功率为44.3％.清甲成功组与清甲未成功组性别、年龄、体质指数(BMI)、病理类型差异无统计学意义(P＞0.05),2组患者手术方式、131I首次治疗剂量、131I首次治疗前促甲状腺激素(TSH)以及甲状腺球蛋白(Tg)水平差异有统计学意义(P＜0.05).多因素非条件Logistic回归分析显示:131I首次治疗剂量、131I首次治疗前TSH以及Tg水平等指标是影响DTC患者术后放射性131I治疗效果的独立相关因素(P＜0.05),手术方式是非独立相关因素(P＞0.05).结论 131I首次治疗剂量、131I首次治疗前TSH以及Tg水平是影响DTC患者术后放射性131I治疗效果的重要因素.     

胰十二指肠切除术中胰胃吻合研究进展

正胰腺的主要吻合方式包括胰肠吻合与胰胃吻合两种。自1935年Whipple首先使用胰肠吻合完成第一例胰十二指肠切除术后,胰肠吻合经历了长期的演变,目前已经愈加成熟,但其术后胰瘘发生率仍维持在5.0%~25.0%[1]。而较其稍后出现的胰胃吻合一直未在临床上得到广泛应用。近年来,由于胰胃吻合理论上可减少胰瘘发生的优势和临床随机对照试验结果的支持,使得该技术逐渐得到外科医师的认可。本文结合最新的相关文献,对胰胃吻合方     

以中枢性尿崩症为首发症状的垂体转移癌的临诊应对

回顾性分析10例垂体转移癌患者的肿瘤来源、临床特征、影像学特点、诊断与鉴别诊断、治疗及预后。结果显示,10例患者就诊时平均年龄62.0岁,转移灶9例源于肺癌、1例源于乳腺癌。所有患者均以尿崩症起病,部分合并垂体前叶功能减退,以及头痛、视物模糊等占位效应。MRI均显示垂体柄及垂体后叶异常,其中4例表现出特征性"哑铃状"改...     

胰腺导管上皮细胞转分化为胰岛样细胞

背景: 胰岛移植是治疗1型糖尿病包括部分2型糖尿病的有效方法.然而,供体来源的匮乏及移植免疫排斥反应极大地阻碍了该方法的推广和应用.最有希望的来源是从干细胞诱导分化出大量可供移植的胰岛细胞,但目前胰腺干细胞转分化方面的研究尚处于起步阶段.目的:寻找胰岛移植治疗糖尿病合适的细胞来源.方法:分离培养昆明小鼠胰腺导管上皮细胞,以添加有角化细胞生长因子、肝细胞生长因子和烟酰胺的DMEM/F12培养基培养,不同时间取样本于光镜和电镜下观察,检测第1,16天时CK-19、PDX-1免疫化学染色变化并以半定量RT-PCR检测第1,16天时胰岛素和胰高血糖素基因表达情况,21 d时行双硫腙染色实验及葡萄糖刺激的胰岛素释放实验以检验胰岛样细胞的生理功能.结果与结论:分离第1天,大部分细胞CK-19染色阳性,偶可见PDX-1阳性细胞,16 d后,CK-19阳性细胞快速增殖形成细胞团,大部分细胞PDX-1染色阳性;RT-PCR显示培养细胞胰岛素和胰高血糖素表达明显增强,分别增加了5.4倍和6.1倍(P < 0.01);21 d时胰岛样细胞团更加成熟,双硫腙着色阳性,且对高糖(15 mmol/L)刺激的胰岛素释放较低糖(5.6 mmol/L)时增加了1.6倍(P < 0.05).提示小鼠胰腺导管上皮细胞在体外培养条件下可增殖,并具有干细胞潜能,可转分化胰岛素分泌细胞.