生物工程技术制备人源抗-HBs Fab 片段

目的：用生物工程技术制备人源性抗-HBsFab。方法：将从抗体文库中筛选出的人源抗-HBsFab基因克隆入pBAD/gⅢA载体，进而转化Tpo10大肠杆菌，对重组质粒菌发酵表达后，利用Ni-NTA-Agarose螯合层析柱纯化周质腔可溶性Fab蛋白。对所得包涵体依次变性，溶解，纯化后，利用透析进行复性，用Western blot检测Fab蛋白的特异性，Dot blot测定其生物学活性。结果：经Ni-NTA-Agarose柱纯化的周质腔可溶性Fab蛋白，有较好的生物学活性，并且总量达到80mg/L。对所获包涵体进行透析复性后，也可得到少量有活性的蛋白，但比例很小。结论；用pBAD/gⅢA-Top10表达系统表达人源抗-HBsFab片段，发酵培养后，经有效纯化可得到生物学活性较好的可溶性蛋白。为人源抗-HBsFab片段的大量制备提供了有效手段。     

不同临床病理特征涎腺黏液表皮样癌中CEACAM 5与PCNA的表达及对预后的影响

［摘要］ 目的 研究癌胚抗原相关细胞黏附分子5（carcinoembryonic antigen related cell adhesion molecule 5,CEACAM 5）及增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）在涎腺黏液表皮样癌(mucoepidermoid carcinoma,MEC)中的表达情况,并研究其表达与肿瘤患者临床预后的关系。 方法 应用免疫组织化学链霉菌抗生物素-过氧化物酶连接（streptavidin-perosidase,SP）法检测55例不同临床病理特征的涎腺MEC组织中CEACAM 5、PCNA的表达情况,30例涎腺多形性腺瘤（salivary pleomorphic adenoma,SPA）及30例癌旁正常涎腺组织作为对照;分析CEACAM 5、PCNA表达的相关性及其与临床预后的关系。 结果 MEC组CEACAM 5、PCNA表达阳性率明显高于SPA组和对照组（P＜0.01）。病理分级Ⅲ级涎腺MEC组织中CEACAM 5、PCNA表达阳性率均明显高于病理分级Ⅰ+Ⅱ级,TNM 分期Ⅲ+Ⅳ期涎腺MEC组织中CEACAM 5、PCNA表达阳性率均明显高于TNM 分期Ⅰ+Ⅱ期,有淋巴结转移涎腺MEC组织中CEACAM 5、PCNA表达阳性率均明显高于无淋巴结转移者( P＜0.01);不同性别、年龄、部位涎腺MEC组织中CEACAM 5、PCNA表达阳性率差异均无统计学意义(P＞0.05)。涎腺MEC组织中CEACAM 5和PCNA的表达呈正相关（P＜0.05）。涎腺MEC组织中CEACAM 5与PCNA表达阴性者的生存时间均明显长于表达阳性者（P＜0.05）。 结论 CEACAM 5和PCNA在涎腺MEC组织中异常高表达,能够协同调控肿瘤的增殖,影响肿瘤的生物学活性,最终影响肿瘤患者的预后。     

上颈部非腺源性包块临床诊疗分析

目的分析上颈部非腺源性包块的临床治疗效果,探讨其分布类型及最佳治疗方案。方法回顾性分析76例上颈部非腺源性包块患者的临床资料,分析其治疗效果。结果76例上颈部非腺源性包块中,良性肿瘤25例,恶性肿瘤19例,非肿瘤性疾病32例。良性肿瘤和恶性肿瘤以手术切除为主。非肿瘤性疾病则根据病变性质采取手术切除或药物对症治疗。结论上颈部非腺源性包块涵盖的疾病较为复杂,治疗应根据病变性质、位置及范围综合考虑,选择最佳治疗方案。     

微波对慢性牙周炎患者龈沟液中碱性磷酸酶的影响

目的 观察慢性牙周炎患者龈沟液(gingival crevicular fluid,GCF)中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)在牙周基础治疗结合微波治疗后的变化.方法 用滤纸条的袋内取样法取34例患者一侧104个位点的基础治疗结合微波治疗的GCF样本,同时取对侧104个位点的基础治疗的GCF样本作为对照组,用全自动生化分析仪测定龈沟液中碱性磷酸酶水平.结果 基础治疗结合微波治疗在临床指标改善及GCF-ALP水平下降方面均优于单纯基础治疗组(P<0.01).结论 微波治疗可以降低慢性牙周炎患者的GCF-ALP水平,对牙周炎有确切的治疗作用,可以在临床中推广应用.     

干髓术失败216例分析

干髓术又称干尸术 ,由于操作方法简便、疗程短、费用低等 ,在我国的基层单位仍是治疗后牙牙髓病的普遍方法。但是如果操作不当 ,就会引起许多不良后果。本文就干髓治疗失败 2 16例进行分析 ,以求进一步提高干髓术的治疗水平。　　作者单位 :0 75 0 0 0张家口医学院第一附属医院口腔科　　一、材料和方法1993年 1月至 1996年 12月 ,我科收治的因干髓术治疗失败的 2 16例病例。最短时间 4天 ,最长时间 8年 ,男性 118例 ,女性 98例。最小年龄 14岁 ,最大年龄 6 7岁。干髓术常见的失败原因根尖周炎 10 2例 ,占 47.2 2 % ;牙折 73例 ,占 33.8% ;…     

气管切开取出可摘局部义齿1例报告

气管异物在耳鼻喉科较为常见，但行气管切开取出异物者报道较少。笔者曾遇到因误吸可摘局部义齿，而行气管切开取出1例，现报告如下：患者，男性，50岁，主因误吸可摘局部义齿后咳嗽、憋气3天就诊。患者3天前在半卧位睡眠时，上颌可摘局部义齿脱落至咽部，随即因吸气将义齿吸入气管。当时咳嗽剧烈，但无呼吸困难，无咯血，数分钟后上述症状缓解。以后几天，轻微活动即感呼吸困难。入院查体：一般情况良好，心脏检查无阳性体征，体温36.8℃，脉搏74次/分，呼吸24次/分，血压135/85mmHg，双肺哮鸣音，呼吸音减弱。口腔检查：缺失。X线胸部透…     

三种方法纯化生物工程抗体片段的比较

比较3种不同纯化体系纯化生物工程抗－HBsFab的效率和效果，寻求高效，经济的生物工程产品批量纯化方法，采用增菌发酵抗－HBsFab阳性克隆，超声破菌法制备Fab上清，分别缓冲平衡抗Fab -Sepharose亲合胶，链球菌蛋白G（prot.G)-Sepharose胶和Ni-NTA离子螯合胶，对Fab上清进行过柱纯化，紫外光检测目的蛋白得率，SDS－PAGE鉴定产物的纯度并用HBsAg包被ELISA检测其生物活性，结果显示，等容积不同类别的胶体对目的蛋白的纯化效率依次为：Ni-NTA离子螯合胶＞prot.G-Sepharose胶＞抗－FabSepharose亲合胶；在各胶体饱和结合能力之内，3种方法中获高纯度产品，在SDS－PAGE中呈现单一区带：HBsAg包被ELISA检测结果为3种方法纯化制备的Fab在抗原结合能力上未显示明显差别，提示，3种纯化方法各有优势和应用限制，Ni-NTA法在经济性，实用性和纯化效率上明显优于其他两种方法。     

介入治疗对乏血供结肠癌肝转移的疗效分析

目的：评价乏血供结肠癌肝转移瘤行肝动脉介入治疗的临床疗效和影响因素。方法：回顾分析25例结肠癌肝转移瘤患者数字造影血管造影（DSA）的表现、介入治疗方案的选择、疗效评价和预后因素。结果：25例均为多发转移瘤,DSA造影多为瘤体中心乏血供的环形染色。共行74次介入治疗,其中单纯灌注化疗21次,化疗加碘油栓塞53次,0.5,1,2,3年生存率分别为88%,72%,32%,8%。结论：肝动脉介入治疗能有效提高乏血供结肠癌肝转移患者的生存期,应为首选治疗办法。     

螺旋CT三维成像对下颌神经管走向的研究

目的通过螺旋CT探讨下颌神经管与下颌骨的实际位置关系。方法利用螺旋CT对正常青年人,进行下颌骨的横断面连续薄层扫描,并进行多平面重建后,测量并计算正常人群中下颌神经管在下颌骨中的实际位置及走行方向。结果下颌骨多平面重建的冠状位CT图像能清楚显示下颌神经管的位置及走向。①在垂直方向下颌神经管距下颌骨下缘的距离小于距牙槽嵴顶的距离,在第二磨牙区距离下颌骨下缘最近。②在颊舌方向,颏孔至第一磨牙间,下颌神经管距颊侧骨板的距离小于距舌侧骨板的距离。自第二磨牙向后,下颌神经管距颊侧骨板的距离大于距舌侧骨板的距离。③下颌神经管的走行方向在颊舌方向,下颌神经管总体走行是由舌侧逐渐向颊侧倾斜达颏孔,越近磨牙后区距离舌侧骨板越近,越近颏孔距离颊侧骨板越近。在走行高度上,在第三磨牙区由上向下走行。自第二磨牙开始下颌神经管逐渐由下向上走行达颏孔。结论螺旋CT通过多平面重建后,可以准确测量并计算出下颌神经管在下颌骨中的三维空间位置,利用螺旋CT对下颌神经管的位置和走行进行研究是可行的。     

人源抗-HBs Fab与IFN-α融合蛋白的克隆与原核表达

目的:构建人源单克隆抗-HBs Fab-IFN-α表达载体,探讨该融合蛋白原核表达的可行性及其生物学活性.方法:用PCR体外扩增目的基因IFN-α,单酶点插入已含人源抗-HBsFab基因的载体,插入点位于轻链基因3‘未端,利用酶切、PCR鉴定筛选正确插入的阳性克隆,转化大肠杆菌,挑选单克隆表达、纯化目的蛋白,用ELISA方法检测融合蛋白IFN-α的抗原性及其抗体亲和性,用WISH细胞检测IFN-α生物学活性.结果:利用插入了人源抗-HBs Fab基因及IFN-α基因的pBAD/gⅢA原核表达系统,成功表达了具生物活性的λ轻链与IFN-α的融合蛋白,其既具有与抗-HBs Fab相近的HBsAg的亲和力,又具有干扰素的活性.结论:λ轻链与IFN-α融合蛋白的成功表达表明,应用原核系统能够同时表达某些特异抗体和其介导的部分生物活性因子,是一种经济、有效的方法,为特异抗体及其介导融合蛋白的制备和临床应用提供了线索.